提取细胞核蛋白的步骤：
1.向培养细胞的平皿中加入少量（保证在1.5ml TUBE内能放下）冷PBS(或1*D-Hanks)
2.，用细胞刮刀尽可能多的刮下细胞，收集到1.5ml的离心管中。

在预冷的离心机中，４度，1000rcf，1－3分钟，沉降细胞。

为尽可能多的获得细胞，可将一次离心后的上清再重复刮细胞一次；
2. 将细胞重悬于cell lysis buffer中（加入体积106细胞/200uL，体积估计方法还是没确
定,should be sufficient; 一般就是一个10cm平皿加1ml cell lysis buffer）,添加蛋白酶抑
制剂；先破细胞膜，得到细胞核（没有用B DOUNCE）；
冰上放置（不震荡，可偶尔用枪轻吹）30分钟至1小时（此时核膜没有破，有核染色为证），充分裂解；
cell lysis buffer：
5mM PIPES pH 8.0 85mM KCL, 0.5% NP40, 1% protein inhibitor;
3. ４度，1000rcf，20分钟，上清为胞质蛋白（蛋白浓度比较低，如需要检测，建议先
浓缩一下），沉淀为细胞核；
此时可以将沉淀冻存于－70℃；
4. 将沉淀重悬于100-200 ul nucleai lysis buffer（体积视目的蛋白表达丰度而定，一般
50-100ul）中，添加蛋白酶抑制剂，冰上放置30分钟至1小时（每5分钟震荡一次），充分裂解；可以观察到沉淀慢慢消失，溶液变澄清；
nucleai lysis buffer：成分同SDS lysis buffer；
50mM Tris-Cl pH 8.1, 10mM EDTA, 1% SDS, 1% protein inhibitor;
5. 四度，最大转速离心，10分钟以上（尽可能沉淀完全），上清即为细胞核蛋白；
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