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如何用噬菌体感染实验证明DNA 是遗传信息的载体？
35S
32P
35S
32P
DNA是遗传物质！
蛋白质外壳无 放射性， DNA上有放
分离蛋白质外 壳及DNA内核， 并测量放射性
子代
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为什么要用放射性核素作为示踪剂？
➢ 一般非放射性物质进入机体后无法区别哪些是外来的？哪
些是原有的物质？
➢ 有些物质进入机体后发生代谢转化、分解，无法再找到它
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Radiopharmaceutical
Radiotherapy Principle
放射性核素标记化合物：它是指在化合物分
子中引入可起示踪作用的放射性核素，并保持原有化合物的 理化和生物学性质不变的一类化合物。
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本章内容
第一节 基本概念
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一、几个重要参数
1.放射性浓度：它是指单位体积的溶液中含有的放射
的踪迹。
Tracer
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核医学应用
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PET and SPECT: Advanced Imaging Systems
Positron Emission Tomography Single-Photon Emission Computed Tomography
A PET scan can be an effective tool to diagnose Parkinson’s disease
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三、定位标记与非定位标记
准定位标记
非定位标记：标记原子的结合部位无法确定。分为均匀标记
和全标记。
➢均匀标记：指放射性原子均匀地分布于分子中，以“U”表示。如
用14CO2通过植物光合作用制得的14C-葡萄糖其中分子六个碳原子从 统计学上看被均匀标记上14C，故可写成14C-葡萄糖(U)或u-14C-葡萄
性活度。以Bq/L或Bq/ml等表示。
2.放射化学纯度：指所指定的放射性标记化合物的放
射性活度占该样品的总放射性活度的百分比。要求
放化纯度要达到95%以上
放化纯度(%)=(标记物的放射性活度)/(样品总的放射性活度)×100%
放射性示踪实验是以测量放射性的踪迹来显示该物质的行踪的，
如果示踪剂中含有放射数杂质，就会使实验结果紊乱，程中引入，而且也会随着
标记物贮存时间的延长而逐渐产生。因此不仅制备标记化合物
时得要进行纯化分离，而且在贮存过程中仍要密切监测它的放
射化学纯度，特别是高比活度的氚标记化合物。
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• 3. 放射性比活度
单位质量（摩尔、容积）物质所含放射性的多少， 后者常称为放射性浓度。
第四章 放射性核素标记化合物
Radionuclide Labeled Compounds
2014-2-28
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示踪技术
观察野生动物大熊猫的生活习性
无线电发射器
示踪物
➢放射性核素 ➢酶 ➢荧光素
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➢1923年, G.Hevesy首次通过测定放射性铅的射线来
观察其在动、植物体内的分布；
➢1952年 Hershey 32P、35S →DNA是遗传物质； ➢1959年 Berson、Yalow →RIA； ➢1958年 Meselson、Stahl →DNA半保留复制； ➢1977 年，Frederick Sanger 等采用放射性标记技术
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三、定位标记与非定位标记
定位标记：指标记原子标记在化合物的指定位置上，以符号
“S”表示。例如1(S)-14C-醋酸、2(S)-14C-醋酸，前者表示14C标记 在醋酸羧基碳上，即CH3-14COOH，后者则标记在甲基碳上，即 14CH3-COOH，两者所能示踪的基团不同，制备二者的合成路线 也完全不同。
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4.化学纯度:指某一化学形式存在的物质量在该样品的总
重量中所占的百分比。
5.放射性核素纯度：是指特定的放射性核素的放射性
活度占总放射性活度的百分数，表示为：
放射性核素纯度(%) = (特定的放射性核素的活度)/(样品的总放射性活 度)×100%
一般要求放射性核素纯度要达到99%以上。
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6. 标记位置及命名:
和ARG，成功地进行了DNA 序列测定。
32P、131I、14C、3H先后被用于医学实验研究
示踪实验之父
RNA-DNA逆转录、遗传的三联密码、细胞周期、微量物 质测量等均离不开示踪技术。
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Introduction
如何用噬菌体感染实验 证明DNA 是遗传信息的载体？
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如何用噬菌体感染实验证明DNA 是遗传信息的载体？
标记化合物命名，通常先指出标记部位再指出标记核素， 最后列出化合物名称，三部分中以二短横线相联，如： 1-14C-醋酸。
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二、同位素标记与非同位素标记
同位素标记：指化合物中的某一稳定核素被其放射性同
位素置换的方法。如用3H取代化合物分子中的1H。
非同位素标记：采用并非原化合物所含元素的放射性核
素(一般选用性质比较接近的放射性核素)进行标记的方法。 如蛋白质用131I或125I标记，所得标记物与原来化合物不完全 相同。
单位：MBq/mg、GBq/mg、TBq/g或MBq/mmol、 GBq/mmol、MBq/ml。
• 对比活度的要求因使用目的而异：一般用于竞争结合分析 法测定微量物质时要求比活度高，以提高分析方法的灵敏 度。作为示踪剂用于观察某些物质的体内过程时，则要求 尽量接近生理状态下的用量而同时具有可测量的放射性活 度。
• 过高或过低均不好：
• 放射线比活度越高，示踪的灵敏度也越高，但制备和使用 高比活度标记物，有如下因素的限制：一是受原料比活度 和制备方法的限制；二是比活度愈高，制备操作难度愈大； 三是比活度高时，特别是氚标记物，易引起辐射自分解， 还会对被示踪的机体产生毒性(如研究对象的细胞损伤和 蛋白变性) ，影响实验结果。
糖。
➢全标记：是指放射性核素的原子随机地无严格定位地分布于被标
记化合物分子结构上，以“G”表示。如G-3H-胆固醇，标记分子中 的所有氢原子都可被取代，但机率各不相同。
• 过低的比活度因其灵敏度过低而达不到预期的实验目的。15
• 3. 放射性比活度
• 放射线核素的理论比活度:当该种核素的丰度是100%时其 放射性活度。它的大小只取决于核素的半衰期。
• A理论=λ×N阿伏加德罗常数=0.693/T1/2×6.02×1023
• 标记化合物的放射性比活度:
A=
该化合物上的放射线核素活度(Bq) 化合物质量(g)或摩尔数(mol)