理理想想区区域域
18.09.2020
细胞重叠
13
细胞太稀
实验五白细胞分类计数
中性粒细胞（Ne）：在瑞氏染色血涂片上呈圆
形 ， 直 径 10 ～ 13µm ， 胞 浆 染 粉 红 色 ， 核 形 一 叶 （杆状核）至五叶不等，以三叶者多见，染成深 紫红色，胞浆中有许多细小均匀紫红色颗粒。
18.09.2020
18.09.2020
6
2．染色
❖ 1）准备：血膜干透后，用蜡笔在两端划线，以防 止染色时染液外溢。将血涂片放染色架上。
❖ 2）加染液：在涂片上滴加瑞氏染液数滴，以染液 覆盖整个血膜为度，稍静置1min。
❖ 3）加缓冲液：滴加缓冲液等量或多些，与上述染 液充分混匀。
❖ 4）染色：染色10min.
❖ 5）冲洗：不要先倒掉染液，平持血涂片用流水缓 缓冲洗干净。
• 推片，载玻片
[试剂]
• Wright染液
Wright
1.0g
甲醇
600ml
• 磷酸盐缓冲液（PH6.4～6.8）
• 香柏油
[标本来源]
•
18.09.2020
EDTA-K2抗凝全血
5
实验五白细胞分类计数
1.制备血涂片 ❖1)推片：血膜厚薄适中，边缘整齐，
外观呈舌形，头、体、尾分明。 ❖2）干燥 ❖3）标记
Mo 3%～8%
Eo
0.5%～5%
Ba
0%～1%
18.09.2020
19
[注意事项]
1.血涂片制备要厚薄适宜、均匀、头体尾分明， 无溶血、无空洞。
2.很多因素影响涂片时血膜的厚度。血滴大、 血粘度高、推片角度大、速度快则血膜厚， 反之则血膜薄。
3.按一定顺序，有秩序地连续进行，避免选择 视野。
4.分类计数时应同时报告RBC和WBC的形态
❖ 6）干燥：直立血涂片，使其自然干燥。
18.09.2020
7
血涂片制作
18.09.2020
8
羽 状 尾 部
良好血涂片外观
－羽（子弹头）状尾部
－周边有空白
18.09.2020
－无划痕
9
18.09.2020
不 良 血 涂 片
10
2．瑞氏染色操作
18.09.2020
11
3．白细胞分类：
低倍镜下所见
先用低倍镜选择厚薄适宜，染色 良好，细胞分布均匀的体尾交界 处，滴加香柏油一滴，油镜下分 类计数。分类时要有秩序的连续 进行，避免主观选择视野。通常 分类计数100个白细胞，计算并 报告各种白细胞所占比例。
18.09.2020
结果记录方式：
Ne 正 一 Ly 正 Mo 正 Eo 正 Ba 正
12
体尾交界处
18.09.2020
3
染色原理： • 血红蛋白、嗜酸性颗粒均为碱性物质，故与酸
性染料伊红结合而染成红色，呈嗜酸性。 • 细胞核的核蛋白为酸性物质，故与碱性染料美
兰结合，染成深蓝色或深紫红色，呈嗜碱性。 • 中性颗粒与美兰和伊红同时结合而染为淡紫红
色，呈嗜中性。
18.09.2020
4
[器材]
• 光学显微镜
14
嗜酸性粒细胞（Eo）：较中性粒细胞稍大，胞 核多为两叶，呈眼镜、八字形，核染色质粗糙 染深紫红色，胞浆内充满粗大均匀的嗜酸性颗 粒，瑞氏染色时呈桔红色，有折光性。
18.09.2020
15
嗜碱性粒细胞（Ba）：胞浆中含有大小不等
的嗜碱性颗粒，瑞氏染色时呈兰黑色。于光学显 微镜下常见胞浆中有小空泡，乃因嗜碱性颗粒易 溶于水或因功能活动而脱颗粒所致；核呈淡紫红 色常看不清，呈杆状或分叶状。
实验二
实验五白细胞分类计 数
谢海啸
18.09.2020
1
实验五白细胞分类计数
白细胞分类计数是将血液制备成涂片，
瑞氏染色后显微镜下根据白细胞的形
态特征进行分类计数。通常分类100
个白细胞，计算得出各种白细胞所占
百分比。
18.09.2020
2
瑞氏染色原理：
• 瑞氏染料溶于甲醇，离解为带正电的碱性美兰 （M+）和带负电的酸性伊红（E-）离子。细胞的 染色既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。 各种细胞成分的化学性质不同，对染料的亲和力 也不一样，故可呈不同的着色特点。
18.09是.2020否有异常。退化细胞不计数。
20
实验五白细胞分类计数
RBC异常
18.09.2020
21
中性粒细胞
血小板
嗜酸性粒细胞
淋巴细胞
嗜碱性粒细胞（右）
18.09.2020
单核细胞 22
18.09.2020
16
淋巴细胞（Ly）：胞体呈圆形，直径介于
6～15µm之间，在成人血涂片中以小淋巴细胞 为多见，直径6～9µm，核大呈深紫色致密而浓 染，胞浆量极少；大淋巴细胞胞浆量较多，呈 清澈的淡蓝色，可见少量嗜苯胺蓝颗粒，胞核 圆或椭圆，常偏向细胞一侧，染色较深。
18.09.2020
17
单核细胞（Mo）：在瑞氏染色涂片上为12～
20µm，胞体圆形、椭圆形或不规则形；核形多种 多样，最重要的特点是染色质较细致疏松，呈丝 网状或条缕状，着色较淡胞浆较多，淡兰色，含
大量细小尘土样颗粒。
18.09.2020
18
[参考值]
正常成人外周血白细胞分类参考值：
Ne
50%～70%
Ly
20%～40%