；.
16
淋巴细胞（Ly）：胞体呈圆形，直径介于6～15µm之间，在成人血涂片中 以小淋巴细胞为多见，直径6～9µm，核大呈深紫色致密而浓染，胞浆量 极少；大淋巴细胞胞浆量较多，呈清澈的淡蓝色，可见少量嗜苯胺蓝颗粒， 胞核圆或椭圆，常偏向细胞一侧，染色较深。
；.
17
单核细胞（Mo）：在瑞氏染色涂片上为12～20µm，胞体圆形、椭圆形或不 规则形；核形多种多样，最重要的特点是染色质较细致疏松，呈丝网状或条 缕状，着色较淡胞浆较多，淡兰色，含大量细小尘土样颗粒。
；.
7
血涂片制作
；.
8
羽 状 尾 部
良好血涂片外观 －羽（子弹头）状尾部
－周边有空白 －无划痕
；.
9
不 良 血 涂 片
；.
10
2．瑞氏染色操作
；.
11
3．白细胞分类：
低倍镜下所见
先用低倍镜选择厚薄适宜，染色良好，细胞分布均
匀的体尾交界处，滴加香柏油一滴，油镜下分类计
数。分类时要有秩序的连续进行，避免主观选择视
计数。
；.
20
RBC异常
；.
21
中性粒细胞
血小板
嗜酸性粒细胞
嗜碱性粒细胞（右）
淋巴细胞
；.
单核细胞
22
实验报告（注意学号） 1原理 2方法
3各类细胞百分比报告
4讨论
；.
23
野。通常分类计数100个白细胞，计算并报告各种
白细胞所占比例。
结果记录方 式：
Ne 正 一 Ly 正 Mo 正 Eo 正 Ba 正
；.
12
体尾交界处
理理想想区区域域
细胞重叠
细胞太稀
；.
13
各类成熟白细胞的形态学：
中性粒细胞（Ne）：在瑞氏染色血涂片上呈圆形，直径10～13µm，胞浆染粉 红色，核形一叶（杆状核）至五叶不等，以三叶者多见，染成深紫红色，胞 浆中有许多细小均匀紫红色颗粒。
；.
18
[参考值]
正常成人外周血白细胞分类参考值：
Ne
50%～70%
Ly
20%～40%
Mo 3%～8%
Eo
0.5%～5%
Ba
0%～1%
；.
19
[注意事项]
1.血涂片制备要厚薄适宜、均匀、头体尾分明，无溶血、无空洞。 2.很多因素影响涂片时血膜的厚度。血滴大、血粘度高、推片角度大、
速度快则血膜厚，反之则血膜薄。 3.按一定顺序，有秩序地连续进行，避免选择视野。 4.分类计数时应同时报告RBC和WBC的形态是否有异常。退化细胞不
；.
3
染色原理：
• 血红蛋白、嗜酸性颗粒均为碱性物质，故与酸性染料伊红结合而染成红 色，呈嗜酸性。
• 细胞核的核蛋白为酸性物质，故与碱性染料美兰结合，染成深蓝色或深 紫红色，呈嗜碱性。
• 中性颗粒与美兰和伊红同时结合而染为淡紫红色，呈Байду номын сангаас中性。
；.
4
[器材]
• 光学显微镜
• 推片，载玻片
[试剂]
• Wright染液
实验二
白细胞分类计数 （differention count of leukocyte）
谢海啸
；.
1
一、白细胞分类计数
白细胞分类计数是将血液制备成涂片，瑞氏染色后显微镜下根据白 细胞的形态特征进行分类计数。通常分类100个白细胞，计算得出 各种白细胞所占百分比。
；.
2
瑞氏染色原理：
• 瑞氏染料溶于甲醇，离解为带正电的碱性美兰（M+）和带负电的酸性伊红 （E-）离子。细胞的染色既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。各种 细胞成分的化学性质不同，对染料的亲和力也不一样，故可呈不同的着色特 点。
将血涂片放染色架上。 ❖ 2）加染液：在涂片上滴加瑞氏染液数滴，以染液覆盖整个血膜为度，
稍静置1min。 ❖ 3）加缓冲液：滴加缓冲液等量或多些，与上述染液充分混匀。 ❖ 4）染色：染色10min. ❖ 5）冲洗：不要先倒掉染液，平持血涂片用流水缓缓冲洗干净。 ❖ 6）干燥：直立血涂片，使其自然干燥。
Wright
1.0g
甲醇
600ml
• 磷酸盐缓冲液（PH6.4～6.8）
• 香柏油
[标本来源]
• EDTA-K2抗凝全血
；.
5
[操作]
1.制备血涂片 ❖ 1)推片：血膜厚薄适中，边缘整齐，外观呈舌形，头、体、尾
分明。 ❖ 2）干燥 ❖ 3）标记
；.
6
2．染色 ❖ 1）准备：血膜干透后，用蜡笔在两端划线，以防止染色时染液外溢。
；.
14
嗜酸性粒细胞（Eo）：较中性粒细胞稍大，胞核多为两叶，呈眼镜、八 字形，核染色质粗糙染深紫红色，胞浆内充满粗大均匀的嗜酸性颗粒， 瑞氏染色时呈桔红色，有折光性。
；.
15
嗜碱性粒细胞（Ba）：胞浆中含有大小不等的嗜碱性颗粒，瑞氏染色时呈兰 黑色。于光学显微镜下常见胞浆中有小空泡，乃因嗜碱性颗粒易溶于水或因 功能活动而脱颗粒所致；核呈淡紫红色常看不清，呈杆状或分叶状。