鱼油软胶囊对小鼠抗疲劳作用的实验研究刘汝萃;范书琴;张建全;肖晶;张延秀【摘要】本实验研究了鱼油软胶囊对小鼠的抗疲劳作用.结果表明:经口给予小鼠不同剂量的鱼油软胶囊30d,高剂量(0.927 g/kg·BW)鱼油软胶囊能显著延长小鼠的负重游泳时间,低剂量(0.031 g/kg· BW)鱼油软胶囊和中剂量(0.309 g/kg·BW)鱼油软胶囊能显著提高肝糖原的储备量,同时能显著降低运动后血乳酸升高幅度,各剂量组对小鼠的体重增长、运动后血乳酸消除和运动后血清尿素氮水平均无明显影响.说明鱼油软胶囊具有抗疲劳作用.【期刊名称】《粮食与食品工业》【年(卷),期】2018(025)004【总页数】4页(P38-41)【关键词】鱼油;软胶囊;抗疲劳【作者】刘汝萃;范书琴;张建全;肖晶;张延秀【作者单位】山东禹王制药有限公司禹城251200;山东禹王制药有限公司禹城251200;山东禹王制药有限公司禹城251200;山东禹王制药有限公司禹城251200;山东禹王制药有限公司禹城251200【正文语种】中文【中图分类】TS201疲劳是机体复杂的生理生化过程，所谓抗疲劳就是延缓疲劳的产生或加速疲劳的消除。
精制鱼油含有丰富的Omega-3不饱和脂肪酸，其主要成分二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)具有预防心血管疾病[1-5]、抗衰老[6]、改善大脑功能[7]等作用。
红景天主要活性成分是红景天甙和酪醇[8]，此外还有黄酮类、酚类、多糖类、活性酶等[9]，大量研究表明，红景天可以增强糖原储备、降低耗氧速率，改善心脑等脏器的有氧代谢过程，增加运动耐力，显著提高动物的肺、心组织中的钠素水平及肝、心肌糖原的含量，从而减轻因缺氧导致的脏器损害[10-11]。
银杏叶提取物的有效成分主要是银杏黄酮和萜内酯，临床试验证明其具有清除自由基[12]，抗应激反应[13]，保护糖尿病大鼠心肌损伤[14]及抗疲劳[15]作用。
卵磷脂具有增强脑部活力，延缓细胞衰老，提高机体耐力的作用[16-18]。
本实验以精制鱼油、红景天提取物、银杏提取物和卵磷脂组成的鱼油软胶囊为原料，对其抗疲劳功能进行验证。
1 材料和方法1.1 样品鱼油软胶囊，成分含量为：DHA 22 g/100 g，红景天甙 240 mg/100 g，银杏黄酮 160 mg/100 g，卵磷脂 10 g/100 g。
1.2 实验动物选用体重为19.3～22.2 g的昆明种健康雄性小鼠60只，随机平均分为4组，作为Ⅰ组，进行肝糖原测定；体重为18.0～19.9 g的昆明种健康雄性小鼠60只，随机平均分为4组，作为Ⅱ 组，进行乳酸和血清尿素氮测定；体重为16.4～19.9g昆明种健康雄性小鼠60只，随机平均分为4组，作为Ⅲ 组，进行负重游泳实验。
1.3 剂制实验设0.031 g/kg·BW(低剂量组)、0.309 g/kg·BW(中剂量组)和0.927g/kg·BW(高剂量组)三个剂量组。
受试物以消毒水配制，对照组(0 g/kg剂量组)以消毒水替代受试物。
经口每日给小鼠受试物1次，连续灌胃30 d后测各项抗疲劳的指标，小鼠的灌胃剂量为20 mL/kg·BW。
1.4 主要仪器与试剂乳酸测定仪、动物天平、电子天平、离心机、高速分散器、沸水浴、振荡器、721分光光度计、游泳箱、铅皮、加样器、计时器。
乳酸测定膜、破膜液、5 mmol/L乳酸标准液、缓冲液、尿素氮测定试剂盒(由北京北化精细化学品有限责任公司生产)、5%三氯醋酸溶液(TCA)、72% H2SO4溶液、葡萄糖标准液(100 mg/dL)、蒽酮试剂(含0.05%的蒽酮，1%的硫脲，用72%的H2SO4溶液配制)。
1.5 实验方法1.5.1 负重游泳实验末次给予小鼠受试物30 min后，使小鼠在水深30 cm，水温(25±0.5)℃ 的游泳箱中游泳，在鼠尾根部加载小鼠体重5%的铅皮。
记录小鼠从开始游泳到死亡的时间，作为小鼠的负重游泳时间(min)。
1.5.2 血清尿素氮的测定采用二乙酰-肟法。
末次给予小鼠受试物30 min后，使小鼠在30 ℃ 的水中游泳90 min。
休息20 min后立即拔眼球采血0.5 mL。
在4 ℃静置3 h后，于5 000 r/min离心3 min，取20 μL血清按照试剂盒说明书操作。
1.5.3 肝糖原的测定采用蒽酮法。
末次给予小鼠受试物30 min后，立即处死小鼠，用生理盐水漂洗肝脏，之后用滤纸吸干，称取100 mg肝脏，向其中加入4 mL TCA匀浆，将匀浆在2 500 r/min离心15 min，取上清液。
按照肝糖原测定试剂盒说明书的方法测定肝糖原含量。
1.5.4 乳酸的测定末次给予小鼠受试物30 min后，采血20 μL加入40 μL破膜液中，并摇匀。
然后让小鼠在水中(30 ℃)游泳10 min后立即停止并采血20 μL，加入40 μL破膜液中，并摇匀。
休息20 min后，再采血20 μL，加入40 μL破膜液中，并摇匀，用乳酸测定仪测定。
1.6 数据处理用Stata软件处理实验数据。
2 结果与讨论2.1 鱼油软胶囊对小鼠体重的影响由表1可知，鱼油软胶囊各剂量组小鼠的初始体重与对照组相比，均无显著差异(P>0.05)。
表1 各组小鼠的初始体重组别抗疲劳1组抗疲劳2组抗疲劳3组体重/gP值体重/gP值体重/gP值对照组20.6±0.618.7±0.617.5±0.6低剂量组20.6±0.60.87518.8±0.50.60917.6±0.90.602中剂量组20.7±0.80.56518.7±0.50.73317.4±0.60.660高剂量组20.6±0.60.97918.7±0.50.94617.5±0.50.956由表2可知，经口给予小鼠不同剂量的鱼油软胶囊30 d，小鼠的体重增长值在鱼油软胶囊各剂量组与对照组相比，差异均无显著性(P>0.05)。
即鱼油软胶囊对小鼠的体重增长没有影响。
表2 样品对小鼠体重的影响组别动物数/只体重/g增长值/gP值抗疲劳一组对照组1536.8±3.916.2±4.3低剂量组1537.1±2.816.5±2.90.846中剂量组1537.9±3.417.2±3.70.459高剂量组1537.6±3.517.0±3.90.550抗疲劳二组对照组1536.2±4.217.5±4.6低剂量组1536.6±3.517.9±3.60.765中剂量组1536.5±2.517.7±2.30.850高剂量组1537.1±2.718.5±2.80.448抗疲劳三组对照组1535.9±2.018.4±1.9低剂量组1536.3±2.818.6±3.10.787中剂量组1537.5±2.620.1±2.70.062高剂量组1536.0±1.918.5±2.00.9012.2 鱼油软胶囊对小鼠负重游泳时间的影响由表3可知，经口给予小鼠鱼油软胶囊30 d，小鼠负重时间在高剂量组组与对照组相比，有显著性差异(P<0.05)；在低、中剂量组与对照组相比，差异均不显著(P>0.05)。
即高剂量组样品能明显延长小鼠的负重游泳时间。
表3 鱼油软胶囊对小鼠负重游泳时间的影响组别动物数/只游泳时间/minP值对照组1571.0±50.7低剂量组1569.7±54.00.948中剂量组1587.9±58.40.400高剂量组15113.5±54.7*0.037注：*P<0.05。
2.3 鱼油软胶囊对小鼠运动后血清尿素氮的影响血清中尿素氮的含量随运动负荷的增加而增加，小鼠机体对负荷的适应能力越强,小鼠血清中尿素氮的含量就越少。
由表4可知，经口给予小鼠鱼油软胶囊30 d，小鼠的血清尿素氮水平在鱼油软胶囊各剂量组与对照组相比，差异不显著(P>0.05)。
即样品对小鼠运动后的血清尿素氮水平无影响。
表4 鱼油软胶囊对小鼠运动后血清尿素氮的影响组别动物数/只血清尿素氮/(mg/dL)P值对照组1524.9±3.9低剂量组1426.8±3.30.122中剂量组1424.1±2.30.532高剂量组1526.6±3.40.1612.4 鱼油软胶囊对小鼠肝糖原储备量的影响肝糖原的储备是机体抗疲劳的重要物质基础，而运动需要消耗糖原来为机体提供能量。
因此肝糖原储备量越充足，给运动提供的能量就越多，机体的抗疲劳能力就越强。
由表5可知，经口给予小鼠不同剂量的鱼油软胶囊30 d，小鼠肝糖原的储备量低、中剂量组与对照组相比，有显著性差异(P<0.05)；高剂量组与对照组相比，无显著性差异(P>0.05)。
即低、中剂量鱼油软胶囊能提高小鼠肝糖原的储备。
表5 鱼油软胶囊对小鼠肝糖原储备量的影响组别动物数/只肝糖原/(mg/100 g肝)P值对照组142 880.4±1 347.6低剂量组153 997.5±751.2*0.015中剂量组143 884.5±1 500.2*0.031高剂量组152 732.7±1 092.60.741注：*P<0.05。
2.5 样品对小鼠运动后血乳酸水平的影响小鼠在剧烈运动以后，糖原无氧代谢产生的乳酸堆积是机体产生疲劳的重要原因之一。
由表6可见，小鼠运动后血乳酸升高幅度在低、中剂量组与对照组相比，差异有显著性(P<0.05)，在高剂量组与对照组相比，差异无显著性(P>0.05)。
即低、中剂量样品能降低小鼠运动后血乳酸升高幅度。
表6 样品对运动后血乳酸升高幅度的影响组别动物数/只安静血乳酸值/( mmol/L)运动后0 min血乳酸值/( mmol/L)血乳酸差值/( mmol/L)P值对照组152.19±0.994.80±0.952.62±1.11低剂量组152.14±0.923.89±1.221.75±0.95*0.033中剂量组152.26±1.053.91±1.041.65±0.94*0.018高剂量组152.22±1.015.07±0.752.84±1.320.572注：*P<0.05由表7可见，小鼠运动后血乳酸消除幅度在样品各剂量组与对对照组相比，差异均无显著性(P>0.05)。