一．植物组织水势的测定（小液流法）【器材与试剂】1.实验仪器试管，移液管，长弯针头，直径0.5cm打孔器，镊子。

2.实验试剂 1.00mol/L蔗糖溶液（342.3g/L）,10%甲烯蓝（用水配制）。

3.实验材料菠菜叶片【实验步骤】1.用1mol/L蔗糖母液配制一系列不同浓度的蔗糖溶液（0.2，0.3，0.4，0.5，0.8mol/L）各10mL，注入5支编号号的试管中，各管都加上塞子，按标号顺序在试管架上排成一列，作为对照组。

将原液稀释10倍配10mL吸原液 2 mL 3 mL 4 mL 5 mL 8 mL加水 8 mL 7 mL 6 mL 5 mL 2 mL2.另取5支试管或青霉素小瓶，对应于对照组各管编号，作为试验组。

然后从对照组的各管中分别取4mL溶液移入相同编号的试验组试管或青霉素小瓶中，并都加上塞子。

3.菠菜洗净，用打孔器在叶片中部靠近主脉附近打取页原片，随机取样，向试验组的每一试管或青霉素小瓶中放入相等数目（10片）的叶圆片，加塞，放置30min，每十分钟摇动一次，每次30秒钟。

4.用点样针头蘸一下10%甲烯蓝溶液（如有条件的话，用微量移液器吸取1μL）加入每一试管或青霉素小瓶中，。

震荡，此时溶液呈蓝色。

5.用5支自制长弯针头，从试验组的各管中一次吸取着色的液体少许，吸取溶液量应相等，赶走溶液中气泡，如针头有液珠必须擦干，然后伸入对照组同样浓度溶液的中部，缓慢从针头尖端横向放出一滴蓝色溶液，轻轻取出滴管。

6.观察蓝色液滴的移动方向，如果蓝色液滴向上移动，说明比重小，原组织细胞失水，溶液从叶片细胞中吸出水分而被冲淡，密度比原来小了外液失水变浓，比重大；如果液滴向下移动，则说明叶片细胞从溶液中吸了水，溶液密度变大，外液失水变稀，比重小；如果液滴不动，则说明叶片与溶液的水分交换平衡，即叶片的水势与此种浓度的溶液的渗透式相等。

7.记录液温。

色滴不动的相应温度。

8.书写实验报告。

1Pa=1牛顿·米-2（N·m-2）1MPa=106帕（Pa）=10巴（bar）1bar=105Pa1bar=0.987大气压1大气压=1.013 bar1MPa=9.87大气压（atm）1 bar=0.1 MPa1 MPa=103KPa衬质是Ψm是细胞的胶体物质、纤维素、毛细管溶质势Ψs或称渗透势（Ψπ）均为负值压力势Ψp细胞对原生质产生的压力一般为正P=iCRT（以bar表示） P为渗透压Ψs=-P Ψs=-iCRT R：表示气体常数0.083L·bar/M -Ψ：绝对温度 273℃+ti：解离常数（蔗糖为1）R=8.3144×107尔格（克分子·度）=0.8205大气压·升（克分子·度）=1.987卡（克分子·度）=8484克·米（千克分子·度）R=0.082大气压·升（克分子·度）P=iCRT=1×0.3×0.082×（273+19）=0.3×0.082×292=7.1832大气压1Pa=7.1832×1.013（bar）×105（Pa）=727658.161Mpa=0.727658167.1832÷9.87=0.7277811（MPa）P=-RtiC即：0.083 bar×（273℃+19℃）×1×0.3 =0.083×292×0.3=0.72708（bar）因为1 bar=105PaPa=1 bar/105=0.72708×105=72708MPa=106Pa=72708÷106=0.72708P=-0.72708MPa二．钾离子对气孔开度的影响【实验原理】保卫细胞的渗透系统可由钾离子所调节，无论是环式或非环式光合磷酸化，都可以形成ATP。

ATP不断供给保卫细胞原生质膜上的钾-氢离子交换泵做功，支持保卫细胞逆着离子浓度差而从周围表皮细胞吸收钾离子，降低保卫细胞透势从而使气孔张开。

钾离子泵学说认为：光照下由光合作用启动钾离子进入保卫细胞，保卫细胞的水势降低，便从邻近细胞吸水膨胀。

由于保卫细胞的特殊结构使气孔张开，黑暗中光合作用停止，钾离子从保卫细胞中渗出，保卫细胞的水势上升，水向外流，保卫细胞收缩，使气孔关闭，即钾离子进入或输出保卫细胞是气孔开放或关闭的原因。

气孔的分布：植物体上部叶的气孔较下部的多，叶尖端和中脉部分的气孔较叶基部和叶缘的多。

一般下表皮较多，旱金莲，苹果限于下表皮；莲，睡莲仅限于上表皮。

【器材与试剂】1.实验仪器人工气候箱，显微镜，目镜测微尺，烧杯，镊子，载玻片，盖玻片。

2.实验试剂 0.05mol/L KNO3（秤取5.06g KNO3，加蒸馏水溶解，稀释成1000mL），0.05mol/L NaNO3（秤取4.25g NaNO3，加蒸馏水溶解，稀释成1000mL）,1×10-3mol/L ATP二钠盐母液（秤取27.6mg ATP，加蒸馏水溶解，稀释成50mL，用上述母液再配制1×10-10mol/L ATP二钠盐溶液），1×10-13mol/L ATP+0.05mol/L KNO3（秤取5.06g硝酸钾加水溶解后，加入1mL 1×10-10mol/L ATP二钠盐溶液，再稀释成1000mL），1×10-13mol/L ATP+0.05mol/L NaNO3（秤取4.25g NaNO3加水溶解后，加入1mL 1×10-10mol/L ATP二钠盐溶液，再稀释成1000mL）。

3.实验材料盆栽紫鸭趾草于室温暗培养48h后镜检，如绝大多数气孔处于关闭状态时，即可用于实验。

【实验步骤】1.取5个烧杯分别加蒸馏水、0.05mol/L KNO3、0.05mol/L NaNO3、1×10-13mol/L ATP+0.05mol/L KNO3、1×10-13mol/LATP+0.05mol/L NaNO3，加入量以能淹没叶片为宜。

2.取紫鸭趾草成熟叶片1片，剪成大小差不多的5片，分别放入上述5个烧杯中。

3.将烧杯放入人工气候箱中培养，培养温度为25℃，光照强度为6000lx，持续培养4h。

4.将培养的叶片取出后，用尖头镊子撕取下表皮，40倍镜检，随机测量10个气孔的内径，取气孔内径平均值。

5.比较各处理间气孔的开度。

【注意事项】1.实验前盆栽紫鸭趾草需暗培养48h以上，以使绝大多数气孔关闭。

2.实验过程中，气孔会随处理时间的延长呈有节律的张开、收缩，可能会影响实验的效果3.浸泡时间要求一致。

【实验作业】试比较何种溶液处理气孔的开度最大，何种溶液处理的气孔开度最小，为什么？三．单盐毒害及离子间颉颃作用【实验目的】通过简单试验说明培养时培养液中各种离子平衡（各种离子及其浓度）的重要性。

【实验原理】离子间颉颃现象的本质是复杂的，它可能反应不同离子对原生质亲水胶粒的稳定性、原生质膜的透性，以及对各类酶活性调节等方面的相互制约作用，从而维持机体的正常生理状态。

【器材与试剂】1.实验仪器烧杯，纱布，石蜡。

（6.66g/L），2.实验试剂 0.12mol/L KCL(8.95g/L)，0.06mol/L CaCl20.12mol/L NaCl(7.01g/L)，所用药品均需用AR。

3.实验材料冬小麦苗【实验步骤】1.冬小麦苗培育两周，待根长1cm时可用作材料。

2.取4个小烧杯，一次分别倒入50mL下列盐溶液：（1）0.12mol/L KCL（2）0.06mol/L CaCl2（3）0.12mol/L NaCl1mL+0.12mol/L KCL 2.2mL （4）0.12mol/L NaCl 100mL+0.06mol/L CaCl2小烧杯用涂石蜡的纱布盖上。

挑选大小相等及根系发育一致的小麦幼苗9株，小心种植在纱布盖的孔眼里，使根系接触到溶液，液体部分用纸闭光，使根部遮光培养，叶基见光，在室温下培育2～3周后，即可看出在单盐溶液中，小麦幼苗生长受阻，特别是他们的根部出现畸形。

双盐的根系发达且颜色白，单盐的则根少发锈色。

观察内容：（1）根部：①根的条数及粗细情况②根毛情况③根尖生长状况④根细胞分裂情况⑤做简单统计（2）叶部①叶尖②叶脉③旗叶④最下叶3.每隔两天观察，2周后拿回。

【注意事项】培养期间注意补充水分，可更换一次培养液。

四．叶绿体色素的提取、分离【实验目的】了解叶绿素提取分离的原理，以及它们的光学特性在光合作用中的意义。

【实验原理】提取原理：叶绿素在叶绿体内以其部水的部分（叶绿酸部分）与蛋白质结合，茉脂部分（叶绿醇部分）与拟脂结合。

纯粹的有机溶剂不能打破色素与蛋白质的联系，故此，必须用能与水混合的有机溶剂，即有少量水存在时才能将叶绿素提取出来，常用的溶剂是酒精、丙酮等。

1.不能见明火，防火。

2.有机溶剂 95%乙醇，丙酮，石油醚，环己烷，无色汽油，乙醚，苯，四氯化碳，无水硫酸钠等均为纸层析的流动相即推进剂。

3.蔗糖，Al2O3，MgO，CaCO3均为吸附剂（滤纸也是吸附剂）等对各种物质有不同的吸附力。

被吸附的物质由于其结构中极性基因的种类和数不同，吸附力也不同。

4.同一种吸附剂在不同的溶剂中吸附能力也不同5.加石英砂便于研细。

6.加热时，温热即可不必煮沸。

7.按分子量大小迁移，小分子在前（上端），大分子在后（下端）。

8.丙酮=95%乙醇四氯化碳=无色汽油无水硫酸钠=苯分离原理：根据吸附原理，以滤纸作为吸附剂，借助一种适当的溶剂携带色素在滤纸上扩散时，由于吸附剂对不同色素的吸附能力不同，便可将色素分离。

Chl是一双羧酸酯在碱的作用下发生皂化反应产生的盐能溶于水，由此将chl于类胡萝卜素分开。

【器材与试剂】1.实验仪器大试管或展层缸，托盘天平，分光镜，研钵，量筒，烧杯，漏斗，软木塞，新华滤纸，毛细滴管，剪刀，分液漏斗，移液管，分光计。

2.实验试剂丙酮，甲醇，醋酸铜，盐酸，KOH，石英砂，CaCO3，无水Na2SO4，四氯化碳，乙醚。

3.实验材料新鲜植物叶片。

【实验步骤】1.叶绿体色素的提取与分离(1)秤取新鲜叶片4g，放入研钵中加丙酮5mL、少许CaCO3和石英砂，研磨成匀浆，再加丙酮8mL，以漏斗过滤之，取出3mL这种最初过滤的较浓色素提取液用于做色素的纸层析和荧光分析。

再用20mL丙酮分2～3次冲洗研钵并过滤，得到的色素提取液放于暗处备用。

(2)把展层用的滤纸剪成2cm×20cm的纸条，将其一端剪去两侧，中间留一长约1.5cm，宽约0.5cm的窄条。

(3)用毛细滴管或牙签取叶绿素溶液划线于窄条的上方，注意一次划线溶液不可过多导致线条过粗，可等风干后重复划线几次，使展层后效果好一些。