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第三章工业发酵培养基及制备


摇瓶培养基(% ):
淀粉 5.5 葡萄糖 0.5 黄豆粉 4 蛋白胨 0.3
(NH4)2SO4 0.05 CaCO3 0.5 KN03 0.05 油少量
庆大霉素生产
发酵培养基(% ):
淀粉 1.5 蛋白胨 0.5 黄豆粉 3 玉米粉 1
(NH4)2S04 0.05 CaCO3 0.5 KNO3 0.05
四、 水:量要加足。
五、 前体
在产物的生物合成过程中,被菌体直接用 于产物合成而自身结构无显著改变的物质称前 体。
六、促进剂:促进产物合成的化学物质。 例如添加0.5%的柠檬酸盐对虾青素含量 可提高36.2%
七、消沫剂:工业发酵中常用一些消沫剂 消除发酵中产生的泡沫。有植物油脂和一 些高分子化合物。
硫酸镁0.04
青霉素0.01g/L
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青霉素发酵培养基(%):
葡萄糖10
硫酸铁0.01,
玉米浆4
硫酸锰0.01
苯乙酸0.5
硫酸锌0.01。
猪油0.5
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配制工业发酵培养基的一般要求
1. 营养比较丰富,浓度要恰当:太营养 菌体生长过盛,否则生长太差. 2. 原料彼此不能产生化学反应:如柠檬 酸,CaCO3 。
碳源 I
菌丝体干重/g·L-1 平均
II III
乳糖 1.7 谷壳 1.9 米糠 2.9 果糖 3.1 麦芽糖 5.3 蔗糖 6.2 葡萄糖 8.1 可溶性 8.1 淀粉 红薯粉 9.6 土豆粉 12.7
1.7 1.7 1.9 1.9 2.8 2.9 2.9 4.0 5.2 4.9 5.7 6.7 8.0 8.4 8.8 7.6
第三章 工业发酵培养基及制备
第一节 培养基的成分 第二节 培养基的类型和配方设计 第三节 影响培养基的质量的因素
概述
培养基是人们提供微生物生长 繁殖和生物合成各种代谢产物所需 要的按一定比例配制的多种营养物 质的混合物。
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谷氨酸生产培养基(%):
水解糖12
玉米浆0.3
尿素0.5
磷酸氢二钾0.1
脂肪。脂肪酸→乙酰CoA→三羧酸循环→产生 大量能量→耗氧→丙酮酸→乳酸。
第二节 培养基的成分
(三)有机酸,醇,柠檬酸,甲醇。 (四)碳氢化合物:石油产品,如谷氨酸生产
菌,用正十六烷作碳源,当发酵到100小时加 适量青霉素,谷氨酸产量达84 g/L。 碳源可分为速效碳和缓效碳,要配合使用。
碳源、氮源最适浓度组合为玉米粉 5%、黄豆饼粉0.5625%、葡萄糖 5%、蛋白胨0.5265%、蔗糖5%,按 此培养基进行培养,灵芝菌丝体的产 量为28.317g/L。
关键词 灵芝菌丝体;深层液体培养; 培养基
结果与分析
2.1 最适碳源试验 本试验选择了15种常用易得碳
源原料作比较不同碳源对灵芝菌 丝体生长的影响见下表。
氮源 I
菌丝体干重/g·L-1 平均
II III
硝酸钠 2.0 硝酸铵 2.6 硫酸铵 7.5 酵母膏 8.4 黄豆饼15.2 粉 花生饼15.9 粉 蛋白胨 15.8
2.2 2.5 3.1 3.2 8.8 8.3 9.2 8.0 14.3 13.1
14.6 15.0
14.6 15.6
2.259 3.028 8.242 8.577 14.266
二、培养基的设计
(一 )培养基的设计一般思路: 1. 单因子试验法 2. 正交试验法。 3. 中试发酵规模ห้องสมุดไป่ตู้一步优化配方。
参考文献
单因子试验法举例
微生物学杂志
研究报告· 灵芝菌丝体深层液体发酵培养基研 究
刘 冬,李世敏,许柏球,赖国红 (深圳职业技术学院生物应用工程系,广东深圳 518055)
摘 要 探讨了灵芝菌丝体深层 液体培养所需的营养条件。结果 表明,最适碳源单糖为葡萄糖,二糖 为蔗糖,多糖为玉米粉、小麦面粉、 麸皮粉或土豆粉;最适氮源为硫酸 铵、黄豆饼粉、花生饼粉或蛋白 胨;
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配制工业发酵培养基的一般要求
3. 原料成本低,蛋白胨可用玉米浆, 大豆粉代替。 4. 不影响通气搅拌的效果,如蛋白 质的含量高,泡沫多,通气差。
第一节 培养基的成分
一、 碳源: (一)糖类:单、双、多糖。淀粉的水解
是在热水中膨胀,然后用酶或酸水解。 (二)脂肪:一般在糖类缺乏时,菌利用
15.236
15.382
组别
第一组 第二组 第三组
正交设计确定优化的配方
正交分析表
水平
因素
A葡萄糖(%) B土豆粉(%) C硫酸铵(%) D黄豆粉(%)
1
0.2
2
0.3
3
0.4
1
0.01
0.5
3
0.02
三 发酵培养基:是供菌体生长繁殖 和合成大量代谢产物用的。要求组成 应丰富,完整。
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庆大霉素生产
孢子培养基(% ): 淀粉 0.8 天冬氨酸 0.002 麸皮 2 琼脂 1.8 pH 7.5
K2HPO4 0.05 CaCO3 0.1 KNO3 0.1 MgSO4 0.05 NaCl 0.05
庆大霉素生产
二、 氮源
1.有机氮源:黄豆粉,黄豆饼粉,玉米浆, (干态、液态),还有酵母粉,鱼粉,蛋白 胨,尿素等 2.无机氮源:如硫酸铵和硝酸钠。
生理酸性物质:(NH4)2SO4→2NH3+H2SO4 pH↓ 下降。 生理碱性物质:KNO3+4H2→NH3+2H2O+KOH,pH ↑ 上升。
三、无机盐和微量元素、生长因子: P:核酸;S:蛋白胨,铁,镁、锌、 钴以及维生素等。
9.8 10.3 12.4 12.4
1.772 1.948 2.923 3.955 5.178 6.237 8.212 8.220
9.932 13.237
组别
第一组 第二组 第三组 第四组 第五组
第六组
2.2 最适氮源试验
本试验选择4种常用易得有机氮 源和3种无机氮源比较其对灵芝 菌丝体生长的影响,从下表可以 看出,无机氮源中以硫酸铵为最 适氮源,有机氮源中以黄豆饼粉 等为最适氮源。
第三节 培养基的种类和配方设计
一、 培养基的种类
微生物学中有合成、天然、固体和半 固体、选择性、鉴别培养基。工业上有:
一 孢子培养基:氮源相对低些,如有的 生产菌加0.5%的酵母膏不产孢子。为什 么?孢子产生是在不利的环境下。如麸皮, 大米是较好生孢子的原料。
第三节 培养基的种类与选择
二 种子培养基:供孢子发芽和菌体 生长繁殖用的。其中氮源和维生素含 量应略高。
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