H H3C C* COOH H3C CH
*
COOH
COOH
COOH
酶
H2N CH3
H
＋H
CH3
NHCOCH3
消旋丙氨酸
NH2
消旋乙酰丙氨酸
NHCOCH3
L-丙氨酸（溶于乙醇）D-乙酰丙氨酸 （不溶于乙醇）
三．色谱法
1. 高效液相色谱法(HPLC)
HPLC法包括直接法和间接法 直接法的分离原理：手性药物对映体之 一与手性固定相或手性流动相之间发生 分子间的三点作用,同时另一对映异构体 则发生两点作用,形成暂时的非对映异构 体的结合物质,前者较后者稳定,通过洗 脱使两对映异构体分离
优先结晶法是一种高效、简单而又快捷 的拆分方法，晶种的加入造成2个对映异 构体具有不同的结晶速率是该动态过程 控制的关键。 利用循环优先结晶方法进行拆分的实例： 抗高血压药物L－甲基多巴的拆分[5]，见 图（三）。
HO HO H3C COOH NH2
图（三）L－甲基多巴
1.3 逆向结晶法
在外消旋体的饱和溶液中加入可溶性某 一种构型的异构体（如R-异构体），添 加的（R）-异构体就会吸附到外消旋溶 液中的同种构型异构体结晶的表面，从 而抑制了这种构造体结晶的继续生长， 而溶液中的（S）-异构体结晶速度就会 加快，从而形成结晶析出。
奥沙西泮新戊酸酯
2．气相色谱法(GC)
在气相色谱仪中选择适当的吸附剂作固 定相(通常是手性固定相),使之选择性地 吸附外消旋体中的一种异构体,可以快速 分离手性化合物。 手性化合物的直接气相色谱分离,其关键 问题是必须找到一个合适的手性固定相, 如高聚物固定相、均三氮苯型固定相、 菊酰胺型固定相、光学活性金属络合物 固定相等。
手性药物的拆分
组员： 霍浩华 杨群伟 薛国顺 郑雪云 徐国中
在医药工业,已知药物中约 30%～40%是光学活性的手性药物， 在生物的手性环境中,药物的手性 不同会表现出截然不同的生理、 药理、毒理作用 ,因此手性药物的 制备显得异常重要。
制备手性药物的方法
（1）手性源合成法:是以天然手性物质为原 料合成其他手性化合物 （2）不对称合成法:是在催化剂或酶的作用 下合成得到过量的单一对映体化合物的方 法 （3）拆分法:是在手性助剂的作用下,将外 消旋体拆分为纯对映体。 外消旋体的手性拆分目前在单一手性 物质的制备上占有极其重要的地位，是制 备手性药物的关键。
＋
HCl
1、直接结晶法
1.1 自发结晶拆分法
当外消旋体在结晶的过程中，自发形 成聚集体，为了能增加生成这种聚集体的可 能性，可将非聚集体的化合物通过衍生化的 方法变成具有聚集体性质的化合物 。
CH3 பைடு நூலகம் NO2 NO2 NO2 NO2
* OH + OH
O
图（二）
1.2 优先结晶法
也称诱导结晶法，是在饱和或过饱和的 外消旋体溶液中加入其中一个对映异构 体的晶种，使该对映异构体稍稍过量而 造成不对称环境，结晶就会按非平衡的 过程进行。它仅适用于拆分能形成聚集 体的外消旋体，而且该聚集体是稳定的 结晶形式。
(-)-R'N 2 H
＋ 分 结 级 晶 (+)-RCO -(-)-R'N H 2 3 对 体 映 ＋ (-)-RCO (-)-R'N H 2 3 ＋ (+)-RCO H + (-)-R'N H 2 3 ＋ (-)-RCO H + (-)-R'N H （ 一 图 ） 2 3
产 （ 物 1） ＋ (+)-RCO -(-)-R'N H HCl 2 3 产 （ (－ 物 2） )-RCO (-)-R'N H 2 3
3．4毛细管电色谱法(CEC)
综合了HPLC法和CE法的优点而发展起来 的一种新型微分离技术,需要选择合适的 手性固定相、合适pH值的缓冲液、合适 的电压和温度对对映体进行拆分。
但也不容忽略，虽然拆分技术仍是目前 手性药物生产中采用的主要工艺,但人们 更注意到拆分之后留下一半无用的复杂 小分子产品是不能接受的。因为它不符 合环保条例要求的“绿色生产工艺”。
随着越来越多的催化过程成为现实,催化 不对称选择性合成方法使用得越来越多。 相信不对称催化技术会是未来手性药物 等精细化学品合成的关键技术,原则上是 今后生产手性分子的最好途径,但无论用 什么方法,判断实用性的底线是生产成本 的经济性。 总之,药物生产中的手性问题是精细化学 品公司必须解决的问题,但生产工艺的确 立需要综合考虑各种影响因素。
2．间接结晶法
利用外消旋体(dlA）的化学性质使其与 某一光学活性试剂（拆分剂）（dB或lB） 作用以生成2种非对映异构体的盐或其他 复合产物，然后利用2种非对映异构体的 盐的溶解度差异，将它们分离，最后最 脱去拆分剂，便可以分别得到一种对映 异构体。
适用于这类光学拆分方法的外消旋体有 酸、碱、醇、酚、醛、酮、酰胺及氨基 酸。原理表达式如下：
手性拆分方法
1、化学法：包括直接结晶法、间接 结晶法； 2、酶法； 3、色谱法：包括超临界流体色谱 (SFC)法、高效液相色谱(HPLC)法、 气相色谱(GC)法、毛细管电泳(CE) 法。
一、化学法
利用手性试剂与外消旋体反应,生成两个非 对映异构体,再利用产物的物理性质差异将 其拆分。
(±) R O H C2
dlA + dB dA dB + lA dB
[6]
二． 酶法
酶的活性中心是一个不对称结构,这 种结构有利于识别外消旋体。在一 定条件下,酶只能催化外消旋体中的 一个对映体发生反应而成为不同的 化合物,从而使两个对映体分开。 脂肪酶、酯酶、蛋白酶、转氨酶等 多种酶已用于外消旋体的拆分。
优点：酶催化的反应条件温和（温度通常在0－ 50℃, pH值接近7.0）； 酶无毒、易降解、不会造成环境污染 。 例：乙酰化物变成L-(+)-丙氨酸和D-(-)-乙酰丙 氨酸
间接法是利用手性药物对映体混合物在 预处理中进行柱前衍生组成一对非对映 异构体,根据其在理化性质上的差异,应 用HPLC法在非手性柱上得以分离。
例如:奥沙西泮新戊酸酯(oxazepam pivalate)以DNBPG为拆分剂,可以制 备拆分获得单一对映体。
H N Cl N O O O C(CH3)3
GC法适用于酸和碱外消旋体的拆分。对 于既非酸又非碱的外消旋体的拆分,就要 设法在分子中引进酸性基团,然后按拆分 酸的方法拆分。
3．毛细管电泳法(CE)
3．1毛细管区带电泳法（CZE）
CZE的原理是在毛细管内充入缓冲溶液, 由于各成分所带电荷不同而以不同的速 度在区带内迁移,中性物质在电场中不移 动。CZE主要用于分离带电离子和易电离 的物质。
3．2胶束电动色谱法(MEKC)
MEKC的原理是在缓冲液中加入溶解度大 于临界胶束溶解度的表面活性剂,胶束相 类似于色谱中的固定相,缓冲液的电渗流 相当于色谱中的流动相,基于溶质在胶束 相与水相间分配的不同以及电泳淌度差 异而得以分离。
3．3毛细管凝胶电泳法(CGE)
CGE的原理是将凝胶移到毛细管内作支持 物,利用分子筛的原理,不同的药物主要 靠分子形状、分子量不同而分离,常用于 蛋白质和多肽的分离。