Fra bibliotek实验原理

2.钩悬法 是一种特别适用于耳类，也适用于伞菌类的多孢分离 法。
实验原理


3.孢子印分离法
取成熟子实体经表面消毒 后，切去菌柄，在20～ 24℃静置一天，大量孢子 落下形成孢子印。

接种环沾少量孢子在试管
培养基上划线培养。
实 验 材 料

材料：平菇、香菇、杏鲍菇较成熟的子实体 用具：培养皿；试管斜面培养基；酒精灯，接种刀， 75%酒精，消毒液；冰箱；培养箱等。
母种分离视频
实 验 步骤
5. 培养
取接组织的斜面试管放置于
25℃的培养箱中培养。 6. 转管 在菌丝长满斜面之前，菌丝生 长最旺盛时，挑取菌丝进行转管扩 繁。 母种转管视频
实验注意事项
（1）组织块分离法对于胶质的耳类及菇体较小较薄的菇类，如金 针菇等不太适宜。
（2） 此法应严格遵循无菌操作。
实验7
食用菌母种制作与转管技术
实验目 的

掌握了解食用菌组织分离的方法和实际操 作技术； 明确食用菌组织分离在食用菌生产中的重 要性。

实验原理
母种
原种
栽培种
实验原理

1.组织分离法：用子实体的某一部
分来分离菌种的方法。

优势：方法简便，后代不易发生变 异，是食用菌栽培中防止品性退化， 保持优良品种特性常用的一种手段。 应用：此法适宜多数食用菌，是野外工作者和种菇专 业户必须掌握的一种方法。
（3）纯化菌丝长至斜面1/2时，挑尖丝转管，培养成再生母种。 （4）控制菌龄菌丝即将长满斜面（一般7～10天）终止培养。分
别用于菌种保藏或繁衍原种。
（5）出菇试验将再生母种扩成原种、栽培种，使其出菇。看产量、 质量、形态、长势、抗性如何，鉴定为优质菌种后，才可供生产 使用。
结果与思考题
1.如何避免因污染而造成的组织分离的失败？ 2.判断你所分离的母钟是否标准？ 3.孢子分离的母种为何一定要做出菇试验？


培养基：PDA斜面培养基
实 验 步骤
1. PDA培养基的配置
配方： 马铃薯浸粉； 5.0g /L；葡萄糖20.0g /L；琼脂 20.0g /L ；
氯霉素0.1g /L。 制法：称取40g溶于1L蒸馏水中，煮沸溶解。分装试管或锥形瓶，
121℃高压灭菌15min。
实 验 步骤
2.种菇的选择
选择无病虫害、典型、八成成熟的食用菌子实体。
3. 环境和种菇消毒 在接种箱内，用镊子夹着燃烧的酒精棉球迅速擦拭菇 体。
或选用的子实体用0.1％开汞水或70％酒精表面消毒，
用无菌水冲洗并用无菌纱布擦去表面水分。
实 验 步骤
4.取接组织 将菇体撕开，用无菌尖头镊在柄盖交界处取绿豆粒 （0.3～0.4立方厘米）大组织，放入斜面培养基上。迅速 塞上棉塞。 如已开伞的种菇、则选菌盖与菌柄交界处的菌肉。 如种菇已受雨淋，吸水较多，应取菌褶作为接种材料。