动物实验基本技术
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动物实验基本技术
➢实验动物抓取与固定 ➢实验动物分组与标记 ➢实验动物被毛去除方法 ➢实验动物给药 ➢实验动物麻醉 ➢实验动物取血 ➢实验动物处死
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一、实验动物抓取与固定
➢目的：暴露手术操作部位
✓小鼠的抓取保定 ✓大鼠的抓取保定 ✓豚鼠的抓取保定 ✓家兔的抓取保定
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染色法--染色方法
➢双色涂染法：
✓两种颜色同时染色标记，一种标记为个位数， 另一种标记为十位数
✓涂染方法同单色涂染法 ✓可标记100位以内的号码
➢直接标号法：
➢染色剂直接在实验动物身上编写号码 ➢实验动物太小或号码位数太多不适宜
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耳孔法
➢用打孔机直接在实验动物的耳朵上打孔编号， 根据打在动物耳朵上的部位和孔的多少来区 分实验动物。
✓右手抓住鼠尾并提起，把大鼠置于笼盖或其 他粗糙面上，向后方轻拉
✓左手顺序按卡大鼠背部，稍加压力向头部滑 行，拇指和食指捏住其两耳和颈部皮肤
✓右手拉紧大鼠尾部，拉直鼠身， ✓左手其余三指固定背部皮肤在大鱼际肌上
➢保定：同小鼠
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3.豚鼠的抓取保定
➢抓取：
✓左手轻轻扣、按住豚鼠背部，顺势抓住其肩 胛上方皮肤，拇指和食指环握颈部
✓染色剂的毒性对实验动物的影响
➢适用动物--大、小鼠
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染色法--常用染色剂
➢3%～5%苦味酸，染成黄色 ➢0.5%中性红或品红溶液，染成红色 ➢2%硝酸银溶液，染成咖啡色 ➢煤焦油酒精溶液，染成黑色
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染色法--染色方法
➢单色涂染法：
✓单一颜色的染色剂涂染 ✓涂染顺序：从左到右，从上到下 ✓适用于每组实验动物不超过10只
余数（两组以上）作为归入的组次分组 ✓最后随机调整，使各组的动物数达到均等
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分组原则--随机分组(1)
➢完全随机分组--如小鼠20只，分甲、乙两组
✓小鼠编为1号～20号 ✓随机数表中取出20个随机数依次分配给1～20
号动物 ✓设单数为甲组，双数为乙组（下表），结果
甲组9只，乙组11只
动物编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
✓再取下一个随机数，除以组数，所得余数作 为下一轮分配开始的组次，顺序分配每组一 只，直到分完为止。
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建立对照组
➢空白对照--不加任何处理，排除动物本身的
影响
➢实验对照--实验条件对照 ➢标准对照--标准值对照（阳性对照） ➢自身对照--自身前后对照 ➢相互对照--各实验组相互对照
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✓右手托住其臀部 ✓抓取时必须快、准、稳、柔
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4.家兔的抓取保定
➢抓取：
✓右手抓住颈背部皮肤，提起家兔 ✓左手托住其臀部
➢保定：
✓四肢和门牙固定在手术台上，其中前肢是交 叉固定。
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4.家兔的抓取保定
➢抓取：
✓右手抓住颈背部皮肤，提起家兔 ✓左手托住其臀部
➢保定：
✓四肢和门牙固定在手术台上，其中前肢是交 叉固定。
随 机 数 03 47 43 73 86 36 96 47 36 61 68 34 30 13 70 55 74 30 77 12
组 别 甲甲甲甲乙乙乙甲乙甲乙乙乙甲乙甲乙乙甲乙
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Hale Waihona Puke 分组原则--随机分组(1)
➢完全随机分组--如小鼠20只，分甲、乙两组
✓小鼠编为1号～20号
✓随机数表中取出20个随机数依次分配给1～20 号动物
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2.标记编号
➢目的--将同种动物进行区别，以便于观察。 ➢要求--编号方法不对动物生理或实验反应产
生影响，且号码清楚、易认和耐久。
➢常用方法：
✓染色法 ✓耳孔法 ✓烙印法 ✓挂牌法
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染色法
➢用化学药品在实验动物身体明显部位涂染， 以染色部位、颜色标记区分实验动物。
➢缺点：
✓长时间使用，染色剂会自行褪色，需不断补 充和加深染色--慢性实验不适用
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二、实验动物分组与标记
1.分组： ➢分组原则--随机分组
✓每只动物都有同等机会被分配到各个实验组 中去，避免人为因素对实验造成影响。
➢建立对照组
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分组原则--随机分组(1)
➢完全随机分组：
✓将全部动物编号 ✓从随机数表中任取一段随机数字，给各个动
物依次配号 ✓按所配数字的奇偶（两组）或除以组数后的
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1.小鼠的抓取保定
➢抓取：
✓右手抓住鼠尾并提起，把小鼠置于笼盖或其 他粗糙面上，向后方轻拉
✓左手拇指和食指捏住其两耳和颈部皮肤 ✓右手拉紧小鼠尾部，拉直鼠身， ✓左手无名指和小指压紧尾巴和后肢，中指和
手掌心夹住背部皮肤，使小鼠呈一直线
➢保定：四肢及门牙用棉线固定在解剖台上
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1.小鼠的抓取保定
➢抓取：
✓右手抓住鼠尾并提起，把小鼠置于笼盖或其 他粗糙面上，向后方轻拉
✓左手拇指和食指捏住其两耳和颈部皮肤 ✓右手拉紧小鼠尾部，拉直鼠身， ✓左手无名指和小指压紧尾巴和后肢，中指和
手掌心夹住背部皮肤，使小鼠呈一直线
➢保定：四肢及门牙用棉线固定在解剖台上
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2.大鼠的抓取保定
➢抓取：基本同小鼠
➢打孔后须用消毒过的滑石粉抹在打孔局部， 以免伤口愈合将耳孔闭合。
➢也可用剪刀在实验动物的耳廓上剪缺口的方 法来区分实验动物。
➢适用动物--家兔
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耳孔法
➢用打孔机直接在实验动物的耳朵上打孔编号， 根据打在动物耳朵上的部位和孔的多少来区 分实验动物。
➢打孔后须用消毒过的滑石粉抹在打孔局部， 以免伤口愈合将耳孔闭合。
➢也可用剪刀在实验动物的耳廓上剪缺口的方 法来区分实验动物。
➢适用动物--家兔
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烙印法
➢直接把标记编号烙印在实验动物身上，如盖 印章一样，用来区别实验动物。
➢适用动物--犬
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挂牌法
➢将编好的号码烙印在金属牌上，挂在实验动 物颈部、耳部、肢体或笼具上，用来区别实 验动物。
✓设单数为甲组，双数为乙组（表1-3-2），结 果甲组9只，乙组11只
✓再查随机数表的第21个数为13，将13÷11＝1
余2。则将乙组中的第二位（6号动物）取出
给甲组。若差数﹥2，可依次法调整直至两组
动物数相等。
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分组原则--随机分组(2)
➢简化随机分组--实际工作中
✓从随机数表中的任一数字开始顺序取数，把 取得的随机数除以组数，将所得余数作为这 一轮开始分配的组次，从该组开始顺序分配 一只