高效液相色谱仪验证方案
1.0 概述
根据质量控制的要求，为满足分析检测工作的需要，我司新购高效液相色谱仪一台。

本仪器由LC-16高效液相色谱仪溶液传输单元，UM4800蒸发光散射检测器，C18色谱柱，色谱工作站及其它配套设备组成。

本仪器主要用于成品含量测定、鉴别，有关物质测定。

按照GMP规范和我司《验证管理规程》要求，对该仪器进行验证。

2.0验证目的
2.1确认目前的实验室环境能够满足该仪器的使用，仪器的运行、性能符合相应的要求。

2.2确认该仪器能够满足我司日常分析检测工作的需要。

3.0适用范围
本方案适用于LC-16高效液相色谱仪的验证。

4.0验证小组成员
组长：邓忠志
组员：邓红梅唐小曼
5.0职责
5.1检验小组职责：
5.2 QA负责验证方案的审核和监督实施，验证报告的审核及验证的组织协调工作。

5.3 质量负责人负责验证方案的审批，验证报告的评定。

相关技术支持及本次验证过程参与人员的培训工作。

6.0参考文件
7.0 进度计划：
2016年11月10日，完成人员培训工作；
2016年11月 11日至11月14日，完成安装确认及运行确认工
作；
2016年11月 15日至11月 16日，完成性能确认及适用性预实验工作；
2016年11月17日进行数据分析汇总，完成验证报告
8.0测试项目
8．1人员培训确认
目的:确认所有参与方案实施的人员经过验证活动培训。

程序：对方案实施人员进行LC-16高效液相色谱仪验证方案培训，并由培训人对培训效果进行评价。

方案实施人员熟悉LC-16高效液相色谱仪构造和运行，并填写培训记录。

可接受标准：所有方案实施人员已经过LC-16高效液相色谱仪验证方案培训，培训效果合格。

所有方案实施人员熟悉LC-16高效液相色谱仪构造和运行，培训记录存在。

测试报告：测试结果填写在测试报告1《人员培训确认》表内，如有偏差记录在偏差报告中。

8.2测试仪器仪表校准确认
目的：确认测试使用仪器仪表均经过校准，且在有效期内。

程序：检查校正所用仪器仪表的校准证书，记录仪器仪表名称、型号、编号、校准日期及下次校准日期。

记录检查结果。

可接受标准：测试所用仪器仪表均经过校准，且在有效期内。

测试报告：测试结果填写在测试报告2《测试仪器仪表校准确认》表内，如有偏差记录在偏差报告中。

8.3安装确认
8.3.1仪器基本信息确认
目的：确认仪器型号、仪器各部件、生产厂家与采购订单及装箱单一致。

程序：检查仪器型号、仪器各部件是否与生产厂家、采购订单及装箱单一致。

可接受标准：仪器型号、仪器各部件、生产厂家与采购订单及装箱单一致。

测试报告：测试结果填写在测试报告3《仪器基本信息确认》表内，如有偏差记录在偏差报告中。

8.3.2 仪器相关资料及存放地点确认
目的：确认仪器相关资料完整，存放地点明确。

程序：依据测试报告4《仪器相关资料及存放地点确认》的列表，逐项检查各个资料是否完好，填写存放地点。

可接受标准：仪器相关资料完整，存放地点明确。

测试报告：测试结果填写在测试报告4《仪器相关资料及存放地点确认》表内，如有偏差记录在偏差报告中。

8.3.3 仪器安装环境确认
目的：确认仪器的安装环境符合要求。

程序：依据测试报告5《仪器安装环境确认》的列表，逐项检查各个项目，填写检查情况。

可接受标准：检查结果符合测试报告5《仪器安装环境确认》列表中的要求。

测试报告：测试结果填写在测试报告5《仪器安装环境确认》表内，如有偏差记录在偏差报告中。

8.4泵流量准确度和稳定性测试
目的：确认泵流量的准确度和稳定性。

程序：1>系统不接色谱柱，直接通过两通连接，用纯化水作为流动相，通过管路冲洗系统，使系统中充满纯化水。

2>准备一个容量瓶，记录其重量，精确到万分之一。

3>断开两通，设置泵流速为0.5ml/min、1.0ml/min、1.5ml/min，待有水稳定流出后，用容量瓶接取流出的纯化水，同时进行计时，采集样品5分钟。

4>称量带有纯化水的容量瓶.
5>重复测试3次。

6>根据当时温度下的纯水密度，折算出水的体积，进而得到泵流量的数值，精确到万分之一。

7>根据下面公式分别计算泵流量设定值误差和流量稳定性误差。

Ss=(Fm-Fs)/Fs*100%
Sr=(Fmax-Fmin)/F*100%
Fm=(W2-W1)/ρt
Fm为流量实测值（ml/min)
W2为容量瓶+流动相的重量（g)
W1为容量瓶的重量（g)
Fs为流量设定值（ml/min)
ρ为实验温度下流动相的密度（g/cm3)
t为收集流动相的时间
Fmax同一组测量中流量最大值（ml/min)
Fmin同一组测量中流量最小值（ml/min)
F同一组测量值的算术平均值（ml/min)
可接受标准 Ss≤2%,Sr≤2%
测试报告：测试结果填写在测试报告6《泵流量准确度和稳定性测试》表内，如有偏差记录在偏差报告中。

8.5泵流量精确度测试
目的：确认泵流量的精确度。

程序：1>系统不接色谱柱，直接通过两通连接，用纯化水作为流动相，通过管路冲洗系统，使系统中充满纯化水。

2>准备一个容量瓶，记录其重量，精确到万分之一。

3>断开两通，设置泵流速为1.0ml/min待有水稳定流出后，用容量瓶接取流出的纯化水，同时进行计时，每10分钟称取一次，共采集样品6次。

4>称量带有纯化水的容量瓶.
5>根据当时温度下的纯水密度，折算出水的体积，进而得到泵流量的数值，精确到万分之一。

6>计算6次结果的值。

可接受标准 RSD<=1%
测试报告：测试结果填写在测试报告7《泵流量精确度测试》表内，如有偏差记录在偏差报告中。

8.6柱温箱准确度与稳定性测试
目的：确认柱温箱控温的准确度与稳定性。

程序：将温度探头放置于柱温箱中，设置柱温箱分别为20℃、35℃
和45℃，然后根据程序开始升温。

待温度稳定后，记录温度与时间，并开始计时，每隔10分钟进行一次记录，共记录6次数据。

计算算术平均值，设定值与平均值的误差ΔT代表了柱温箱控温的准确度，测试数值中的最大值和最小值之差代表了柱温箱控温的稳定性。

可接受标准：柱温箱控温的准确度不超过±1%
柱温箱控温的稳定性不超过±1℃
测试报告：测试结果填写在测试报告8《柱温箱准确度与稳定性测试
》表内，如有偏差记录在偏差报告中。

8.7蒸发光检测器基线漂移测试
目的：确认蒸发光检测器的基本性能。

程序：系统不接色谱柱，直接通过两通连接，用90%的水和10%甲醇溶液作为流动相，设定泵的流速为1ml/mim，调节载气流速为3L/min,设定漂移管温度40℃，待系统基线平稳后，采集基线图谱30min，测量基线漂移。

可执行标准：漂移＜1.0mv/h
测试报告：将采集的基线图谱打印下来，附在测试报告9《蒸发光检测器基线漂移测试》内，如有偏差记录在偏差报告中。

8.8系统重复性测试
目的：确认高效液相系统样品分析的重复性
程序：在仪器稳定后，选用浓度为5mg/l的葡萄糖水溶液作为校准物质，进样量为20μL，采用相同的条件重复测量6次，计算6次的保留时间和峰面积的相对标准偏差，得到仪器定性与定量重复性数据。

可接受范围：RSD≤2％
测试报告：测试结果填写在测试报告10《系统重复性测试》表内，如有偏差记录在偏差报告中。

8.9适用性预试验
目的：确认高效液相系统适用单硫酸卡那霉素检测。

程序：按照《中国药典2015年版一部》硫酸卡那霉素品种正文相下的规定，进行系统适用性实验。

可接受标准：分离度>5
测试报告：将图谱及分析结果附在测试报告11《适用性预试验》内，如有偏差记录在偏差报告中。

9、异常情况处理程序
验证过程应严格按照本验证方案执行，如有检测结果偏离标准要求时，应做偏差调查，并重新检测。

验证方案在实施过程中如需修改，应有明确理由并经质量负责人批准后方可更改。

所有异常情况及处理过程均应记录备案。

10、再验证周期
验证小组负责起草再验证周期。

11、验证结论及评价
验证小组根据验证情况对验证结果进行综合评审，做出验证结论，提交验证报告。

测试报告1 人员培训确认
测试报告2 测试仪器仪表校准确认
测试报告3 仪器基本信息确认
测试报告4 仪器相关资料及存放地点确认
测试报告5 仪器安装环境确认
测试报告6 泵流量准确度与稳定性测试
测试报告7 泵流量精密度测试
测试报告8 柱温箱准确度与稳定性测试
测试报告9 蒸发光检测器基线漂移测试
测试报告10 系统重复性测试
测试报告11 适用性预试验。