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上呼吸道感染标本的采集
病毒：选用涤纶或人造棉头塑料柄的拭子（如：聚丙烯纤维头），不能用藻酸钙 及木柄拭子，可使病毒失活或抑制PCR反应。脱脂棉拭子含有荧光物质，影响荧 光定量PCR结果
细菌：选用藻酸钙拭子。棉拭子、尼龙拭子可抑制百日咳博德特菌生长 采样后用于病毒检测的拭子，将拭子头浸入含一定量采样液的螺口管中，尾部弃
去，旋紧管盖，及时送检，如不能立即送检，可暂时储存于4℃冰箱内，严禁-20 ℃冷冻。用于细菌检测的拭子插回采样管中或适宜的转运装置中，立即送检
支原体保存液
病毒采样拭子
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细菌采样拭子
Patients n (%)
262 (27.5) 94 (9.9) 41 (4.3) 40 (4.2) 17 (1.8) 16 (1.7) 14 (1.5) 11 (1.2) 6 (0.6) 5 (0.5) 5 (0.5) 4 (0.4) 4 (0.4) 4 (0.4) 1 (0.1) 0 (0.0)
• 混合感染在社区呼吸道感染中占有重要地位，以细菌合并非典型病原体混合感染居多1
病 原 体 检 出 率
(%)
入选2003年12月至2004年11月中国7个城市12个中心的665例CAP患者并进行病原体检测
1.刘又宁 陈民钧 赵铁梅等. 中华结核和呼吸杂志.2006;29(1):3-8； Liu Y et al. BMC Infectious Diseases. 2009;9:31.
咽拭子的采集方法
用拭子同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁（3-5次）
9
上呼吸道感染标本的采集
咽拭子的采集
正确拿咽拭子的方法
错误拿咽拭子的方法
上呼吸道感染标本的采集
鼻 拭 子 标 本 的 采 集
请患者头部保持不动，将拭子轻轻转动缓缓插入患者鼻腔，不要用力， 当遇到阻力后即到达后鼻咽，停留数秒吸取分泌物，轻轻旋转取出拭子
核酸类型 单股RNA 单股RNA
单股RNA 单股RNA 双股DNA 单股RNA 双股DNA 单链DNA 双链RNA
Jennings LC , et al. Thorax 2008; 63:42-8. Ruuskanen O. Lancet 2011;377:1264-75. 6 6
北京市成人CAP监测网：病毒性肺炎27.5%
Cillóniz C, et al. Thorax. 2011;66(4):340-346. 4
我国CAP的主要致病菌
• 2006年我国CAP的大型流调研究显示：肺炎支原体是我国CAP的最主要致病菌，其次为肺炎 链球菌1
• 在我国已经完成的另两项全国多中心成人CAP调查中，肺炎支原体感染的比例分别达到了 20.7%和38.9%，均已超过了肺炎链球菌(分离率分别为10.3%和14.8%)，成为成人CAP最常 见的致病原2,3
2010-2012年本课题组牵头，联合北京市12家医院 954例成人CAP患者中，病毒性肺炎占27.5%。 重要病毒：流感病毒、鼻病毒、腺病毒、偏肺病毒和呼吸道合胞病毒。
JiuXin Qu. BMC Infect DIs 2015 online first 7 7
上呼吸道标本类型及适应症
8
上呼吸道感染标本的采集
3. Tao LL et al. Chin Med J (Engl). 2012;125(17):2967-2972.
5
成人病毒性肺炎发病率高，但长期被忽视
每年新发病毒性肺炎约200万例，其中成人和儿童各100万例 10项成年人CAP综述（共2910例），病毒性肺炎占22%
病毒科 正粘病毒科 副粘病毒科
Pathogen identified
Respiratory Viruses Influenza virus A Human rhinovirus Adenovirus Human metapneumovirus Parainfluenza virus type 1 Parainfluenza virus type 3 Parainfluenza virus type 2 Influenza virus B Human enterovirus Respiratory syncytial virus type A Respiratory syncytial virus type B Coronavirus OC43/HKU1 Coronavirus 229E/NL63 Parainfluenza virus type 4 Bocavirus
披膜病毒科 小RNA病毒科 腺病毒科 冠状病毒科 疱疹病毒科 细小病毒科 呼肠孤病毒科
病毒种 流感病毒 呼吸道合胞病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、副流感病 毒、人类偏肺病毒
风疹病毒 鼻病毒、柯萨奇病毒和埃可病毒的部分型别 腺病毒 人类冠状病毒、SARS冠状病毒 单纯疱疹病毒、带状疱疹、EB和CMV 人类博卡病毒 呼肠孤病毒（1，2，3，4型）
William Osler, The Principles and Practice of Medicine, 1892
Diagnosis!
Diagnosis!
Diagnosis!
Medicine is a science of uncertainty and an art of probability.
最重要的是不要看远方模糊的事，而是做好手
头清楚的事
3
病原体检出率(%)
欧洲流调：CAP的主要病原体
• 肺炎链球菌和非典型病原体是CAP最主要致病菌，混合感染占重要地位
N=1463
一项1996年11月至2008年7月在西班牙进行的CAP流调研究，纳入3,524例CAP患者(15%门诊患 者,85%住院患者) ，其中1,463例患者病原学呈阳性反应。
破解呼吸道感染病原学诊断 的困境：需要你我他
王辉 北京大学人民医院检验科 Email：whuibj@
Lபைடு நூலகம்CN.MKT.GM.04.2016.5059
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内容
呼吸道感染病原学 困境和挑战 可能的破解之道
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The Three Most Important Elements in Practicing Medicine