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影响酶活性的因素实验设计解析

唾液淀粉酶的最适pH值约为6.8。
酶具高度的特异性。所谓特异性是指一种 酶能对一种化合物或一类化合物起催化作 用,而不能对别的物质发生催化反应。
本实验以唾液淀粉酶为例,此酶只能催化 淀粉的水解,最终产物为麦芽糖和少量的 葡萄糖 。
淀粉水解程度不同,遇碘呈色反应不同。因 此,可以通过呈色反应,了解淀粉水解的程 度,从而间接判断唾液淀粉酶活力的大小。 淀粉水解如下:
影响酶活性的因素
生化实验第五组 组员:林诗雯、伍晨楠、 段宇鑫、王雪翎、张艺
一、目的
1、了解pH对酶活性的影响。 2、了解淀粉的水解过程,与各个过程遇碘
的呈色现象。
二、原理
酶的活性受环境pH的影响极为显著。通常, 各种酶只有在一定的pH范围内才表现它的 活性。一种酶表现其活性最高时的pH值, 称为该酶的最适pH。低于或高于最适pH 时,酶的活性逐渐降低。
五、观察并记录实验现象
实验现象
解释结果
淀粉水解:淀粉 紫色糊精 红色糊精 麦芽糖及 少量葡萄糖
遇碘呈色: 蓝色 紫色 红色 无色
三、试剂与仪器
(一)试剂
蒸馏水 0.2%淀粉液 0.1mol/L柠檬酸 0.2mol/LNa2HPO4 pH8.0缓冲液 pH6.8缓冲液 pH5.0缓冲液 碘液
(二)仪器
控温水浴锅 白瓷板 试管、滴管、移液管(1-2ml)、锥形瓶
0.1mol/L柠檬酸 (mL) 9.70
4.55
0.55
取试管3支,编号,按下表进行操作
项目
试管编号
1
2
3
pH5.0的缓冲溶液(mL)
2


pH6.8的缓冲溶液(mL)

2

pH8.0的缓冲溶液(mL)


2
0.2%淀粉溶液(mL) 稀释唾液(mL)
检查淀粉水解程度
2
2
2
1
1
1
将上述各管溶液混匀后在37℃水浴中保温, 然后每隔1min,从2号管中取出1滴反应液置于白 瓷板上,用碘液检查淀粉水解程度,直至反应液 不再变色(为橙黄色),取出所有试管,冷却。
四、操作步骤
1.稀释唾液的制备:先用自来水漱口以清洁 口腔 ,然后取20mL蒸馏水含于口中,并 做咀嚼动作,2min后吐入小烧杯中,加倍 稀释备用。
附: pH 5.0、6.8、8.0三种缓冲液
2
6.8
3
8.0
0.2mol/LNa2HPO4 (mL) 10.30 15.45 19.45
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