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04 VEGF信号通路的作用
VEGF/VEGFR2所介导的信号级联通路可以调控血管内皮 细胞的增殖、迁移、存活，引起血管通透性的改变，控制 血管的新生。（在肿瘤的生长过程中需要新生血管来供应 营养物质和排泄代谢物。)
VEGF能够引起内皮细胞增生，引起其渗透性增强，导致血 管肿瘤、血管渗透，水肿及炎症。
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（一）DC101封闭性阻断VEGFR2
通过qRT-PCR、免疫荧光可以证明：VEGFR2存在于 血管内皮细胞。
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DC1w0e1lc是omVe EtoGusFeRth2es的e P封ow闭erP性oin抗t te体mp，lat强es, New 烈抑C制on肿ten瘤t de血sig管n, 再10 生yea，rs eDxpCe1rie0n1ce作用于 皮肤癌小鼠模型，可见内皮细胞增殖显 著减少、肿瘤血管密度明显降低， CSCs的比例降低。
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06 VEGF对皮肤癌发生与发展的调控
在人类皮肤癌中，鳞状细胞癌的发病率居第二位，世界上每年有 500,000人发病。
DMBA/TPA（二羟甲基丁酸/对苯二甲酸）化学诱导小鼠皮肤癌，小 能够促进血管内皮细胞增殖从而增加肿 瘤的血管密度，促进肿瘤生长。
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Ca2+-磷脂依赖性激酶途径
VEGF活化PLCγ, PLCγ水解膜组分PIP2产生IP3和DAG。 IP3诱导细胞内Ca2+释放，促进前列腺素的生成，提高血管 渗透性。Ca2 + 使PKC结合并聚合至质膜，在DAG（二酯酰 甘油）的作用下活化，PKC也可作为eNOS和Raf1-MEK1/2ERK1/2的上游激活物，促进NO的产生，促进基因的表达 和细胞的增殖。
三种
CSC markers:CD34+、Hmga
免疫 TEC markers:K5、K14
染色 EC markers:endoglin、CD31
CSC:肿瘤干细胞 TEC:肿瘤上皮细胞
EC：血管内皮细胞
皮肤癌的TEC可以显示CSC的markers CD34+,但内 皮细胞没有显示CSC的markers CD34+, 因此可
VEGF
血管内皮生长因子
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目录
01 血管的形成 02 VEGF及其受体 03 VEGF诱发的细胞内信号转导 04 VEGF信号通路的作用 05 作用于VEGF信号通路的血管生成抑制剂 06 VEGF对皮肤癌发生与发展的调控
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01 血管的形成
血管生成：胚胎早期成血管细胞分化形成原始血管。 血管新生：即从已经存在的血管中构建出来新的血管，正
由于血管生成在皮肤鳞状细胞癌的发生发展有重要影响，由此推 断，VEGF对皮肤癌的生长也有重要的促进作用。
很多肿瘤生长过程中，血管微环境能够影响肿瘤干细胞（CSC）的 功能。但是VEGF是否能够直接影响CSC的增殖，尚未有明确结论。
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一.皮肤癌血管微环境中是否存在CSCs？
VEGF可诱导P38-MARK活化，P38-MAPK继而活化 MAPKAPK-2/3，并使丝状肌动蛋白（F-Actin）聚合调节 分子和热休克蛋白27（HSP27）发生磷酸化，引起肌动蛋 白骨架的重组，产生EC移行。
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PI3K-Akt/PKB途径
VEGF与VEGFR2结合后，PI3K发生磷酸化，活化的PI3K与底 物PIP2结合将其转化为PIP3，PIP3诱导Akt/PKB磷酸化。磷 酸化的Akt既可通过磷酸化BAD和Caspase9（天冬氨酸特异 性半胱氨酸蛋白酶）抑制BAD和Caspase9的活性，诱导EC增 生和移行，也可通过激活eNOS产生NO,控制造血功能和AMI （急性骨髓白血病）细胞的生长。
在脑肿瘤中，血管微环境中存在CSC并 能影响其功能，但皮肤癌血管微环境 中是否存在CSC尚不明确。皮肤癌中的 肿瘤上皮细胞（TEC）具有克隆性增殖 潜能，并且TEC移植到免疫缺陷的小鼠 后可形成肿瘤，因此可以推断TEC即为 CSCs。
为确定皮肤癌血管微环境是否存在CSCs，进一 步通过免疫组织化学染色研究：
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05 作用于VEGF信号通路的血管生成抑制剂
直接靶向VEGF的血管生成抑制剂 VEGF单克隆抗体（贝伐单抗， 世界上首个VEGF抑制 剂) 可溶性VEGFR药物（Aflibercept） VEGF的反义寡核苷酸
作用于VEGF通路中其他信号传递分子的血管生成抑制剂 VEGFR酪氨酸激酶抑制剂(索拉非尼，世界上首个用于 临床的多靶点抗肿瘤药物) 缺氧诱导因子抑制剂
常情况下血管新生仅发生在胚胎发育期，创伤愈合期和女 性的生理周期，病理条件下也会出现异常的血管新生。 复杂血管系统的形成还需要其他信号通路，如：肝配蛋白 、TGF-β（转化生长因子）、PDGF（血小板原生长因子） 等信号通路
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02 VEGF及其受体
VEGF: VEGFA、 VEGFB 、VEGFC、 VEGFD、PIGF（ 胎盘生长因子）、 orf viral VEGF同系物
VEGFR：VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3 其中VEGFR2是血管新生和有丝分裂过程主要的VEGF信号 转导受体。
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03 VEGF诱发的细胞内信号转导
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丝裂原活化的蛋白激酶（MAPK）途径
VEGF结合到VEGFR2上，引起SHC磷酸化，活化的SHC 与接头蛋白（GRB2）结合，GRB2通过SH2结构域结合鸟 苷酸交换蛋白（SOS），使之接近Ras，然后进一步激活 PAPK级联反应：Raf1→MEK1/2 →ERK1/2。
以排除内皮细胞的影响，证明TEC即为皮肤癌里
的CSC
血管微环境中存在CSC
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二.VEGF对CSC的影响
以上实验已证明小鼠皮肤癌血管微环境 中存在CSC，并且现已知VEGF对血管 微环境的形成有重要影响，但VEGF对 CSC是否有直接影响尚未证实。
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（一）DC101封闭性阻断 VEGFR2 （二）皮肤癌小鼠模型里敲 除Vegfa基因 （三）皮肤癌小鼠模型里过 表达VEGF