《生物化学实验》教学大纲课程名称：生物化学实验课程编码：013B005A 学时：32学分： 2适用专业：生物技术、医学检验（本科）先修课程：无机化学、有机化学，普通生物学执笔人：周银审定人：夏光辉一、课程的性质、地位与任务生物化学是高等院校生物科学相关专业的重要专业基础课（必修）。

为了加强理论知识的学习并进行实践应用，生物化学实验课也随之开设。

生物化学实验课程锻炼了学生的实际动手能力，并将理论知识与实践相结合，提高学生观察,分析和解决问题的能力,培养学生严谨的工作作风和实事求是的科学态度,为学习专业课程和未来的科学研究及实际工作打下良好的基础。

二、教学目标1.知识目标通过本课程的学习,加深对生物化学基础理论,基本知识的理解,正确和较熟练地掌握比色、层析、电泳和离心等生物化学基本实验方法的原理和操作技能。

2.素质目标（1）要求明确实验目的，弄懂实验原理，学会实验方法，掌握实验技能。

（2）要求学生在教师的指导下，亲自动手，独立或者合作完成实验操作过程，如实记录实验结果，书写实验报告，培养学生的独立工作和分析问题的能力。

（3）要求学生严格遵守实验室规则，养成良好的实验习惯。

三、主要的教学方法主要以学生亲自动手操作为主，教师的原理讲解和示范操作为辅助，实验设置按照生物化学教学改革中的创新新、新颖性和独立性来进行，实验项目大多为设计性实验，提高学习的趣味性，并提高学生遇到问题后分析问题和独立解决问题的能力。

四、教学内容的学时分配序号实验项目学时实验性质备注演示验证设计综合必做选做1 基本要求及重要仪器的使用2 √√2 DNS法测还原糖的浓度2 √ √3 蛋白质等电点的测定和沉淀反应2 √√4 蛋白质及氨基酸的 2 √显色反应√5 柑橘皮果胶的提取及果冻制备2 √√6 酶的特性 2 √ √7 血清谷丙转氨酶活性测定酶的特性2 √√8 考马斯亮蓝法测蛋白质浓度2 √√9 糖的薄层层析 2 √√10 VC含量的测定 2 √√11 血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳2 √√12 花菜中提取DNA 2 √√√13 酸价的测定 2 √√√14 牛奶中提取酪蛋白 2 √√√15 酵母RNA的分离及组分鉴定2 √√√16 考试 2 √√五、主要教学内容实验一基本要求及重要仪器的使用（2学时）1. 教学重点：①明确实验室的规章制度。

②重要仪器的使用。

2. 教学难点：分光光度计技术、电泳技术和离心技术的介绍。

3. 知识与能力：教学内容企业标准知识能力①强调实验室的规章制度②722S型分光光度计的使用方法③离心机的使用方法④电泳仪电泳槽的使用方法⑤微量滴定管的使用方法基本仪器的操作实验二3，5-二硝基水杨酸（DNS）法测定还原糖（2学时）1. 教学重点：①掌握还原糖定量测定的原理和方法。

②熟悉分光光度计的原理和使用方法。

2. 教学难点：掌握还原糖定量测定的原理和方法。

3. 知识与能力：教学内容企业标准知识能力①分光光度计的使用原理和使用方法②标准曲线的应用和空白对照的意义、绘制标准曲线的方法③还原糖和总糖的概念分光光度计的使用原理和使用方法实验三蛋白质的等电点测定和沉淀反应（2学时）1. 教学重点：①蛋白质的两性解离性质。

②测定蛋白质等电点的方法。

③蛋白质变性与沉淀的关系。

2. 教学难点：蛋白质变性与沉淀的关系。

3. 知识与能力：教学内容企业标准知识能力①蛋白质的盐析。

②重金属盐沉淀蛋白质。

③生物碱沉淀蛋白质。

④加热沉淀蛋白质。

⑤乙醇沉淀蛋白质。

①测定蛋白质等电点的方法。

②蛋白质变性与沉淀的关系。

实验四蛋白质及氨基酸的显色反应（2学时）1. 教学重点：①了解构成蛋白质的基本结构单位及主要连接方式；②了解蛋白质和某些特殊氨基酸的颜色反应原理；③学习几种常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法。

2. 教学难点：蛋白质和某些特殊氨基酸的颜色反应原理。

3. 知识与能力：教学内容企业标准知识能力①双缩脲反应的原理和现象②黄色反应的原理和现象③醋酸铅反应的原理和现象蛋白质样品的定性检测实验五柑橘皮果胶的提取和果冻的制备（2学时）1. 教学重点：①掌握果胶提取的原理和流程；②了解果胶的应用。

2. 教学难点：掌握果胶提取的原理和流程。

3. 知识与能力：教学内容企业标准知识能力①果胶的生化特性和生产应用②果胶的提取原理和流程果胶的应用③实验试剂的使用目的④果冻的制备实验六酶的特性（2学时）1. 教学重点：①掌握酶促反应速度的几个主要影响因素②淀粉不同水解程度的产物及鉴定。

2. 教学难点：掌握酶促反应速度的几个主要影响因素及淀粉水解程度的鉴定。

3. 知识与能力：教学内容企业标准知识能力①唾液淀粉酶催化的酶促反应②淀粉水解程度的鉴定淀粉及淀粉水解物的鉴定③酶活性的影响因素实验七血清谷丙转氨酶活性测定（2学时）1. 教学重点：掌握血清谷丙转氨酶活性测定的基本原理、具体操作方法和临床意义。

2. 教学难点：血清谷丙转氨酶活性测定的基本原理。

3. 知识与能力：教学内容企业标准知识能力①酶活反应体系的配制②反应后吸光值的读取酶活性测定的临床应用③酶活性的计算实验八考马斯亮蓝法测蛋白质浓度（2学时）1. 教学重点：①学习考马斯亮蓝结合法测定蛋白质的浓度；②巩固分光光度计的使用。

2. 教学难点：考马斯亮蓝结合法测定蛋白质的浓度。

3. 知识与能力：教学内容企业标准知识能力①反应溶液的配置②标准曲线的绘制蛋白质样品的浓度检测③样品蛋白浓度的查对。

实验九糖的薄层层析（2学时）1. 教学重点：①了解薄层层析的基本过程；②熟悉薄层层析的操作过程。

2. 教学难点：熟悉薄层层析的操作过程。

3. 知识与能力：教学内容企业标准知识能力①吸附层析的原理②比移值的概念③薄层制备技术吸附层析的操作技术实验十VC含量的测定（2学时）1. 教学重点：学习测定VC含量的原理和方法。

2. 教学难点：学习测定VC含量的原理和方法。

3. 知识与能力：教学内容企业标准知识能力①辣椒匀浆的稀释②标准VC的滴定③样品VC的滴定④样品VC浓度的计算VC含量的测定实验十一血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳（2学时）1. 教学重点：①了解电泳技术的一般原理；②掌握醋酸纤维薄膜电泳的操作。

2. 教学难点：薄膜电泳的点样技术和漂洗方法3. 知识与能力：教学内容企业标准知识能力①薄膜电泳的原理和应用②电泳槽的基本构造和使用技术③薄膜电泳的点样技术和漂洗方法④小牛血清蛋白的组分和性质①薄膜电泳的原理和应用②电泳槽的基本构造和使用技术实验十二花菜中提取DNA （2学时）1. 教学重点：①学习和掌握从植物组织中分离核酸的原理和操作方法；②了解DNA组分的鉴定方法。

2. 教学难点：学习和掌握从植物组织中分离核酸的原理和操作方法。

3. 知识与能力：教学内容企业标准知识能力①原材料的预处理②核酸的分离动植物组织中DNA的提取和检测③核酸的醇析和醇洗④核酸的鉴定实验十三酸价的测定（2学时）1. 教学重点：学习测定脂肪酸价的原理和方法。

2. 教学难点：学习测定脂肪酸价的原理和方法。

3. 知识与能力：教学内容企业标准知识能力①油脂的溶解试样油酸价的测定②空白瓶的滴定③样品瓶的滴定实验十四牛奶中提取酪蛋白（2学时）1. 教学重点：①掌握一种酪蛋白提取的方法。

②掌握一种检测牛乳质量的方法。

③再次熟悉离心机的操作方法。

2. 教学难点：掌握一种检测牛乳质量的方法。

3. 知识与能力：教学内容企业标准知识能力①酪蛋白等电点沉淀②去除脂类杂质某乳品的质量检测方法及原理③去除水溶性杂质实验十五酵母RNA的分离及组分鉴定（2学时）1. 教学重点：①了解RNA的组分。

②掌握鉴定RNA组分的方法。

③熟悉离心机的原理和操作方法。

2. 教学难点：掌握鉴定RNA组分的方法。

3. 知识与能力：教学内容企业标准知识能力①RNA的组分和鉴定方法离心机的原理和操作方法②实验中各试剂的用处③离心机的使用方法六、考核方法及成绩评定考查和考试相结合。

考查成绩根据学生平时的实验态度、动手能力、理解能力、实验报告质量等方面综合评定。

考查成绩按70%的比例计入课程总评成绩。

期末考试分操作技能考试和理论笔试。

操作技能考试成绩按15%的比例计入课程总评成绩，理论笔试成绩按15%的比例计入课程总评成绩。

七、教材及教学参考书：教材[1]《生物化学实验》，何幼鸾、汤文浩，华师出版社，2013参考教材：[1]《现代生化技术》，郭勇主编，华南理工大学出版社，2001[2]《生物化学实验原理和方法》，李建武、萧能庚、余瑞元等主编，北京大学出版社，1994[3]《现代微生物学与实验技术》，林稚兰、黄秀梨主编，科学出版社，2000[4]《基础生物化学实验》，王秀奇、秦淑媛等，高等教育出版社，2003.6[5]《生物化学实验》（第三版），陈钧辉等，北京：科学出版社，2003[6]《生物化学技术原理及应用》，赵永芳主编，科学出版社，2002.7[7]《生化实验方法和技术》，张龙翔等，北京：高等教育出版社，1997。