第十八章高效液相色谱
法
Document number【SA80SAB-SAA9SYT-SAATC-SA6UT-SA18】
第十八章 高效液相色谱法
15.外标法测定黄芩颗粒剂中黄芩苷含量：色谱柱为Zirchrom C8柱（20cm ×，5um ）；流动相为乙腈-甲醇-水（含%三乙胺，磷酸调）（28：18：54）；以黄芩苷对照品配成浓度范围为～ml 的对照品溶液。

进样，测得黄芩苷峰面积，以峰面积和对照品浓度求得回归方程为：A=××103，r=.精密称取黄芩颗粒，置于50ml 量瓶中，用70%甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，精密量取1ml 于10ml 量瓶中，30%甲醇定容到刻度，摇匀即得供试品溶液。

平行测定供试品溶液和对照品溶液（ml ），得峰面积分别为4250701，5997670. 解：标样标样
A A c =c 599767042507018.6110
/=样c %4.17%1001255.01050%6=⨯⨯=-样c w 16．校正因子法测定复方炔诺酮片中炔雌醇的含量：ODS 色谱柱；甲醇-水（60：40）流动相；检测器UV280nm ；对硝基甲苯为内标物。

（1）校正因子的测定：取对硝基甲苯（内标物）、炔诺酮和炔雌醇对照品适量，用甲醇制成10ml 溶液，进样10ul ，记录色谱图。

重复三次。

测得含ml 内标物、ml 炔诺酮和ml 炔雌醇的对照品溶液平均峰面积列于表18-6。

（2）试样测定：取本品20片，精密称定，求出平均片重（片）。

研细后称取（约相当于炔诺酮），用甲醇配制成10ml 供试品溶液（含内标物ml ）。

测得峰面积列于表18-6。

表18-6 复方炔诺酮片中各成分及内标物平均峰面积（u v ·s ）
解：02.3)
10587.6/(100733.0)10043.1/(10035.0A /m A /m f 55s s =⨯⨯⨯⨯==醇
醇醇 试样含炔雌醇的量：)mg (449.010841.610387.1100733.002.3A A m f m 55s s =⨯⨯⨯⨯⨯=⋅
⋅=醇
醇醇 每片含炔雌醇的量：)/mg 0369.0(3.608
.732449.0片=⨯ 17．测定生物碱试样中黄连碱和小檗碱的含量，称取内标物、黄连碱和小檗碱对照品各
0.2000g 配成混合溶液。

测得峰面积分别为, 和4.04cm 2。

称取0.2400g 内标物和试样0.8560g 同法配制成溶液后，在相同色谱条件下测得峰面积为, 和4.54cm 2。

计算试样中黄连碱和小檗碱的含量。

解：05.143
.360.3A A A /m A /m f s s s ====黄黄
黄黄 18．计算在反相色谱中甲醇－乙腈－水（60:10:30）的强度因子。

如果改用四氢呋喃－甲醇－水，水的含量不变，为了保持相同的洗脱强度，甲醇的比例是多少
解：12.230.0010.02.360.00.3S S S S =⨯⨯⨯=ϕϕϕ=＋＋＋＋水水乙乙甲甲混
设改换溶剂后，甲醇的比例为x ，则
x = = %
19．用15cm 长的ODS 柱分离两个组分。

柱效n =×104m –1；测得t 0=；组分的10.41R =t min ；
2R t =。

(1)求k 1、k 2、α、R 值。

(2)若增加柱长至30cm ，分离度R 可否达
解：(1) 13.231
.131.110.4t t t t '
t k 00R 0R 111=-=-== (2) 由212221
L L R R =，则30.015.0R 0.122
2= R 2 = (达不到。