PART B 生物分离工程实验
实验九硅胶色谱法分离甘油三酯
一、实验目的
通过从粗油中分离甘油三酯，学习运用凝胶色谱法分离油脂中各个成分的方法。

二、实验原理
吸附色谱是利用吸附剂对被分离物质的吸附能力不同，用溶剂或气体洗脱，以使组分分离。

常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等有吸附活性的物质。

硅胶色谱频繁使用在脂质中的单一脂质，糖脂质以及磷脂质的分离。

各种脂质被硅胶吸附，随着洗脱溶液的极性增加，各种极性不同的化合物被分离出来。

三、实验仪器
1. 层析柱(1.5×75cm)
2. 250mL 三角容量瓶
3. 分析天平（0.001g）
4. 真空浓缩装置
5. 搜集瓶
6. 氮气
四、实验材料与试剂
1. 正己烷 200mL
2. 乙醚15mL
3. 蒸馏水 1.3mL
4. 硅胶（100目左右） 25g
五、实验步骤
1. 活化硅胶（110度，6小时干燥）25g中加入5%蒸馏水使其部分钝化并充分混
匀放置30分钟。

加入正己烷至刚好淹没硅胶为止并用超声波脱气3分钟。

2. 层析柱底部放入脱脂棉少许（防止硅胶泄漏），将硅胶放入到层析柱中正己烷
溶液要没过硅胶层表面。

3. 准确称取食用油1±0.001 g加入到硅胶层析柱中用150mL正己烷/乙醚
（87∶13，v/v）洗脱，洗脱速度为2-3滴/min。

洗脱时表面不能干和。

4. 收集的洗脱液用真空浓缩装置浓缩至无有机溶剂气味为止。

5. 准确称取浓缩物质量。

六、回收率计算
回收率= Ws/W×100%
Ws：回收的甘油三酯质量（g）
W：食用油质量（g）
七、思考题
1. 实验中加水的目的是什么？
2. 怎样验证洗脱液中收集的甘油三酯的纯度。