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（五）等速电泳 采用两种不同浓度的电解质组成 ，一种为前导电解质，充满整个毛细管柱；另一 种为尾随电解质，置于一端的电泳槽中。前导电 解质的迁移率高于任何样品组分，后者则低于任 何样品组分，被分离的组分按其不同的迁移率夹 在中间，在强电场的作用下，各被分离组分在前 导电解质与尾随电解 质之间的空隙中移动， 实现分离。
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（三）根据支持载体的位置或形状可分成：水平电泳 、垂直电泳、板状电泳、柱状电泳、U型管电泳 、倒V字形电泳、毛细管电泳等。
（四）根据支持物的特点又可分为： ①无阻滞支持物电泳。②高密度的凝胶电泳。
（五）根据电源控制的不同，一般可分为以下3类： 1. 恒压电泳; 2. 恒流电泳; 3. 恒功率电泳 。
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若将带净电荷Q的粒子放入电场，则该 粒子所受到的电荷引力为：
（6-1）
F引=E Q
在溶液中,运动粒子与溶液之间存在阻力F阻
（6-2）
F阻=6πrηV
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当F引=F阻时
EQ= 6πrηV
V = EQ/6πrη
（6-3）
由上式可以看出,粒子的移动速度
(泳动速度V)与电场强度(E)和粒子所带电荷量
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第一节 电泳原理
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一、电泳的基本原理 物质分子在正常情况下一般不带电，即所带正负电荷
量相 等，故不显示带电性。但是在一定的物理作用或化 学反应条件下，某些物质分子会成为带电的离子，不同的 物质，由于其带电性质、颗粒形状和大小不同，因而在一 定的电场中它们的移动方向和移 动速度也不同，因此可使它们分离。
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（六）根据自动化程度的不同，可分为半自动和 全自动型。
（七）根据其功能的不同，可分为制备型、分析 型、转移型、浓缩型等。
（八）根据用法的类型可分为：双向电泳、交叉 电泳、连续纸电泳、电泳－层析相结合技术等。
（九）根据不同的使用目的可分为：核酸电泳、 血清蛋白电泳、制备电泳、DNA测序电泳等。
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2．等电聚焦电泳的特点 ①使用两性载体电解质，在电极之间形成稳
定、连续、线性的pH梯度；②由于“聚焦效应” ，即使很小的样品也能获得清晰、鲜明的区带界 面；③电泳速度快;④分辨率高;⑤加入样品的位 置可任意选择；⑥可用于测定蛋白质类物质的等 电点;⑦适用于中、大分子量（如蛋白质、肽类、 同工酶等）生物组分的分离分析。
它具有机械强度好、弹性大、
透明、化学稳定性高、无电渗
作用、设备简单、样品量小
(1～100μg）、分辨率高等优点。
06-04 凝胶电泳 图
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（四）等电聚焦电泳
1． 等电聚焦电泳过程 一种利用有pH 值梯度的介质，分离等电点不同的蛋白质 的电泳技术。
06-05 净电荷与PH的关系曲线
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将等电点不同的蛋白质混合物加入有pH值梯度 的凝胶介质中，在电场内经过一段时间后，各 组分将分别聚焦在各自等电点相应的pH值位置 上，最后，样品的各组分在各自的等电点聚焦 成一条清晰而稳定的窄带。
06-06 等速电泳示意图
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（六）双向凝胶电泳（二维电泳） 第一向采用等电聚焦 根据复杂的蛋白质成
分中各个蛋白质的PI的不同，将蛋白质进行分离 。
第二向采用了十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺 凝胶电泳 （SDS-PAGE）就是按蛋白质分子量的大 小使其在垂直方向进行分离。其结果不再是条带
状，而是呈现为斑点状 。
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二、电泳方法简介
（一）纸电泳 指用滤纸作为支持 载体的电泳方法。是最早使用的区带电泳 。
图
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06-02 平卧式电泳槽装置示意
将滤纸条水平地架设在两个装有缓冲 溶液的容器之间，样品点于滤纸中央。当 滤纸条被缓冲液润湿后，再盖上绝缘密封 罩，即可由电泳电源输入直流电压 （100V～1000V）进行电泳。
(Q)成正比,而与粒子的半径(r)及溶液的粘度
(η)成反比。
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二、影响电泳的外界因素 （一）电场强度 （二）溶液的pH值 （三）溶液的离子强度 （四）电渗作用 （五）粒子的迁移率 （六）吸附作用
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第二节 常用电泳技术和电泳方法
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一、电泳技术的分类 （一）根据工作原理的不同：可分为移界电泳、 区带电泳、等速电泳、等电聚焦电泳、免疫电 泳等。 （二）根据有无固体支持物可分为：自由电泳和 支持物电泳
第五章 电泳分析技术
医学检验教研室 宜春职业技术学院
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一、概述
1.电泳是指带电荷的溶质或粒子 在电场中向着与其本身所带电荷相反的 电极移动的现象。
2.利用电泳现象将多组分物质分 离、分析的技术叫做电泳技术
3.可以实现电泳分离技术的仪器 称之为电泳仪
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目前，电泳技术已广泛用于蛋白质、多肽 、氨基酸、核苷酸、无机离子等成份的分离和鉴 定，甚至还用于细胞与病毒的研究。
临床常用的电泳分析方法主要有醋酸纤维素 薄膜电泳、凝胶电泳、等电聚焦电泳、双向电泳 和毛细管电泳等。
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本章目录
第一节 第二节 第三节 第四节 第五节 第六节
电泳原理 常用电泳技术和电泳方法 常用电泳设备的基本结构及技术指标 毛细管电泳的基本结构和分离模式 电泳仪的临床应用 电泳技术的质量控制
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（二）醋酸纤维素薄膜电泳 电泳时经过膜的预处理、加样、电泳、
染色、脱色与透明即可得到满意的分离效果。此电 泳的特点是分离速度快、
电泳时间短、样品 用量少。因此特别 适合于病理情况下 微量异常蛋白的检测。
06-03 血清蛋白的电泳图谱
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（三）凝胶电泳
由区带电泳中派生出一种用凝胶物质作支持物进 行电泳的方式，被称为凝胶电泳。普通的凝胶电泳在板 上进行，以凝胶作为介质。电泳中常用的凝胶为葡聚糖 、交联聚丙烯酰胺和琼脂糖。
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PI 逐渐降低
(七）免疫电泳 免疫电泳是琼脂平板电泳和双相免疫扩
散两种方法的结合。将抗原样品在琼脂平板上先进行 电泳，使其中的各种成分因电泳迁移率的不同而彼此 分开，然后加入抗体做双相免疫扩散，把已分离的各 抗原成分与抗体在琼脂中扩散而相遇，在二者比例适 当的地方，形成肉眼可见的沉淀弧。
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胶性 PH9 中电 加解 入质 了溶
双液
第一向 等电聚焦
PI 逐 渐 降 低
等电聚焦胶放在SDS －聚丙烯酰胺凝胶上
PH3
加上电场
蛋白质
染色后，蛋
后建立稳
溶液加
白质因PI值
定PH梯度
入，建
不同，沿PH
立电场
梯度分离开第二向来自SDS－聚丙 烯酰胺凝胶 电泳
分子 量逐 渐降 低
06-07 双向凝胶电泳示意图