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6. 生理与健康状况
健康、未产未孕 给药前检疫观察 大、小鼠、兔、豚鼠1周，犬、猴2~3周 ①适应新环境，减少环境和生理条件变化可 能对试验结果的影响 ②筛检健康状况不符合试验要求的动物
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（二） 染毒方式
最常用的染毒途径为经口、经呼吸道、经皮及注射途径。 ❖ 工业化学物：经皮肤和呼吸道 ❖ 农用化学物：经口、经皮肤和呼吸道 ❖ 药品：经口和注射 ❖ 食品：经口 ❖ 环境污染物：经口、皮肤和呼吸道
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3.急性毒性分级法 （acute toxic class method）
选用剂量(25、200、2 000 mg/kg)之一，单性别3只动物进 行试验，确定动物的生死后再进行下一步试验。 有3种可能的结局：
a. 不需进一步试验即可分级， b.下一阶段以相同剂量再做另一性别试验， c.下一阶段以较高或较低的剂量水平进行。 根据在某一染毒剂量下，死亡发生的数量来判定大致的 LD50值范围，直接进行危害评估和毒性分级。
有关急性毒性试验设计及方法
曲线拟合：概率 单位法，即Bliss 法
插值法：寇氏法
中，不正确的是
A．采用寇氏法和 Bliss 法一般 设5～8组 B．寇氏法和 Bliss 法一般以
一般设5～8个剂量 组；霍恩法固定设4 个剂量组。
i=(LD100 –LD0 )/(n-1)公式计算 组距 C．使用霍恩氏法固定设4个剂 量组
种属和品系
性别、年龄、体重
微生物学等级 饲养环境
动物数目 实验前处理
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实验动物
种属和品系 首选大鼠 还需选择一种非 啮齿动物：狗
性别、年龄、体重
雌雄各半 刚成年、健康、未曾 交配和受孕的动物
大鼠180～240g 小鼠18～25g 家兔2～2.5kg
豚鼠200～250g Beagle犬4～6kg 杂种犬8～15kg
有关急性毒性试验目
的，不正确的是 1.确定LD50等急性毒性参数，并根 A．阐明外源化学物毒
据LD50对急性毒性进行分级
性作用的中毒机制
2.观察中毒表现和死亡情况，初步 B．确定 LOAEL 和
评价受试物的毒性、毒效应特征、靶 器官和剂量-反应（效应）。
3.为亚急性、亚慢性和慢性毒性试 验染毒剂量设计和观察指标选择提供
风向 21
一、急性毒性概念
急性毒性（acute toxicity） 实验动物或人一次或24h内多次接触一定剂量外源 化学物短期内所产生的健康损害作用和致死效应。 观察指标包括一般行为和外观改变、大体形态变 化以及死亡效应。
急性毒性的观察时间，一般为14天，如有 必要可延长至14天以上。
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正确理解急性毒性概念
第六章 一般毒性作用
公共卫生学院 徐莉春
1
第一节 概述
第二节 急性毒性作用
第三节 局部毒性作用
第四节 短期、亚慢性和慢性毒性作用
2
第一节 概 述
一、一般毒性作用的概念和意义 二、一般毒性试验动物选择和染毒方式
3
一、一般毒性作用的概念和意义 1. 概念
外来化学物在一定剂量、一定接触时间和 接触方式下对试验动物产生的综合毒效应
度评定的重要内容，在制定卫生标准及管理毒理学 决策方面具有重要意义
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二、动物选择和染毒方式 一、实验动物选择
1. 物种和 2.品系 选择基本原则
* 毒性反应与人最接近
* 自然寿命不太长
选择原则
* 易于饲养和操作
*经济并易于获得
6
物种和品系
啮齿类（rodent species） 大鼠：Sprague-Dawley（SD）、Wistar 小鼠：昆明种（KM）、ICR（美国 癌 症研究所，Institute of Cancer Research）、 NIH 豚鼠 家兔 非啮齿类（nonrodent species） 狗或猴
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（2）预试验
先用少量动物，以较大的剂量间隔染毒，找出 10%-90%（或0%-100%）的致死剂量范围。
可根据以下公式计算出组距
i=(lgLD90-lgLD10)／(n-1) 或i=(lgLD100-lgLD0)／(n-1)
i为组距，相邻的两个剂量组对数剂量之差； n为设计的剂量组数。
1
2
3
4
急性接触的次数
一次 经口、经注射，一次 操作瞬间给予实验动物 一定量的受试物； 经皮、经呼吸道，在 一段规定时间内使实验 动物持续接触受试物。
24h内多次 外源化学物毒性很
低，一次最大容积染 毒不足以充分了解急 性毒性作用，24h内 多次染毒。不超过3 次，间隔至少4h。
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二、急性毒性试验的目的
先使用化学法脱毛或机械法脱毛，将动 物脊柱两侧背毛脱去，去毛面积常为体表 面积的10％。
将受试物均匀涂敷于动物背部皮肤染 毒区，然后用油纸覆盖，以无刺激胶布 固定，防止动物舔食。
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4. 经注射途径染毒 腹腔注射、肌内注射、皮下注射、
静脉注射。
图9—3 小鼠腹腔注射
图9－4 小鼠尾静脉注射
兔耳缘静脉注射
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2. 经消化道（口）染毒（oral exposure） 灌胃、喂饲和胶囊。灌胃是最常用的染毒途径。
将受试物配制成溶液或混悬液， 利用等容量灌胃法。 灌胃法优点是剂量准确，缺点是工作量 大，并有误入气管和伤及食道的可能。
图 小鼠灌胃 法
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3. 经皮肤染毒（dermal exposure） 先脱毛，再染毒
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第二节 急性毒性作用
一、急性毒性的概念 二、急性毒性试验方法的目的 三、急性毒性试验方法要点 四、急性毒性分级
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1984年，印度博帕尔事件
12月2日晚，美国联合碳化公司在印度博帕尔市 农药厂，地下储罐剧毒异氰酸甲酯因压力升高爆炸 外泄。45吨毒气形成一股浓密烟雾，以5000m/h速 度袭击博帕尔市区。
气管内注入
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下列关于急性毒性实验中经呼吸道 染毒的叙述中，错误的是 A．研究气体、蒸汽、烟、尘等形式 存在的污染物的急性毒性 B．呼吸道染毒可分为静式和动式吸 入两种方式 C．静式染毒的优点为设备简单、操 作方便 D．动式染毒的不足之处为装置复杂、 价格昂贵 E．静式染毒可以使实验动物得到充足 的氧气补充
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实验动物分组与数量
✓ 根据组数和每组数量来 决定总数量
✓ LD50，一般为5-7组 ✓ 大、小鼠每组10只，犬
类6只 ✓ 严格遵循随机、均衡的
原则
下述有关急性毒性试验的实验动 物要求中，不正确的是 A．一般选择哺乳动物，以大小 鼠最为常用 B．使用刚成年、健康未交配和 未受孕的动物 C．通常用雄性动物进行实验 D．实验动物分组时应严格遵循 随机原则 E．实验动物需要预检
NOAEL C．评价外源化学物对 机体毒性剂量一反应 关系，并根据LD50 进 行毒性分级
依据和建议。
D．为致癌试验的剂量
4.为毒作用机制研究提供初步线索。
设计提供依据 E．测试并求出毒物的
毒性参数如 LD50
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二、急性毒性试验方法的要点
（一）经典的急性毒性试验
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（一）经典的急性毒性试验
实验动物的选择
✓ 同一次试验同一批实验动物体重变异范围 不应超过平均体重的20%
大鼠180～240g 小鼠18～25g 家兔2～2.5kg
豚鼠200～250g Beagle犬4～6kg 杂种犬8～15kg
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亚慢性
年龄：性刚成熟 大鼠6-8周，体重100g左右 小鼠体重15g左右 犬 8~12月
慢性
年龄：刚离乳 大鼠3-4周，体重约50-70g 小鼠3周，体重约10-15g 犬一般在4-6月
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3. 级别
GB 14922-1994《实验动物 微生物学和寄生虫学监测等 级（啮齿类和兔类）》
普通级 一级
清洁级 二级
无特定病原体级（SPF级） 三级
无菌级 四级
GB 14922.2-2001《实验动物 微生物
学等级及监测》(2002年5月1日开始实
施)
新标准对实验动物等级进行了重新
设定，将小鼠和大鼠微生物学等级分
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4. 上-下法 （up/down methቤተ መጻሕፍቲ ባይዱd）
“上-下”法最早诞生于第二次世界大战中， 适用一种“全或无”的反应。 用1只动物序贯进行 不死亡，下一只提高一档剂量， 死亡，就降一档剂量做。 但每一只存活动物都需观察至14 d， 后期死亡动物在统计结果时也要记为死亡
GB 21826-2008-T 化学品 急性经口毒性试 验方法 上下增减剂量法(UDP)
有关急性毒性评价，错误的是 A．目前世界各国采用的急性分 级标准多以LD50为标准进行划分 的 B．LD50只是一个点剂量 C．仅用LD50参数反映某物质的 急性毒性有局限 D．LD50应结合剂量一反应关系 曲线斜率及毒作用特征共同评价 E．一般来说LD50是一个稳定的 常数
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（二）急性毒性替代试验
毒性
一般毒性 （基础毒性）
特殊毒性
急性毒性
致突变
亚急性
致癌
（短期、重复剂量毒性
致畸
亚慢性毒性
…
4
慢性毒性
2. 研究目的
研究目的
确定受 试物毒 作用的 表现和 性质
确定受 试物毒 作用剂 量-反应 （效应） 关系
确定受 试物毒 作用的 靶器官
确定损 害的可 逆性
一般毒性作用是认识化学物毒性的基础，危险
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实验动物的饲养环境
恒定的温度：22±3℃ 湿度：30~70% 光照度：昼夜各半 饲料合格、饮水合格、垫料合格
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实验动物的给药前禁食处理
经消化道染毒时，要求试验前对动物禁食 大鼠、小鼠——隔夜进食。 大动物——染毒前不喂食即可。 染毒后继续禁食2~4h，但在禁食时要保障饮水。