100 级 1 000 级
手术室
（5 个/m）
（ 10 个/m）
II 标准洁净 0.75 个/（30min·90 皿） 1.5 个/（30min·90 皿） 5 1 000 级 10 000 级
手术室 （25 个/m）
（50 个/m）
III 一般洁净 2 个/（30min·90 皿） 4 个/（30min·90 皿）
结果判定：
Ι类环境：洁净手术部符合GB50333要求；其它洁净场所≤ ４cfu／30min·平皿。
Ⅱ类区域：细菌总数≤４cfu／15min·平皿 Ⅲ、Ⅳ类区域：细菌总数≤４cfu／5min·平皿
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监测部门
医院感染高风险部门如手术部(室)、产房、导管室、层流洁净 病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重症监护病房、新生儿 室、母婴同室、血液透析中心(室)、烧伤病房的空气净化与消 毒质量进行监测
规范采集标本的意义：
采集标本准确，无污染，培养结果
准确。
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采样前准备：
1、环境准备：(略——消毒）
2、物品准备：
检验科准备：培养皿，无菌试管、无菌 棉拭子等。
科室准备：无菌镊子、无菌剪刀、无菌
棉签、无菌手套、酒精灯、打火机、胶布、
笔等。
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4
采样时间：消毒处理后，医疗活动前期 采样时间：消毒处理后，医疗活动前期间 采样后尽快检测，送检时间≤6小时，若样品
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中和剂的选择
消毒剂
中和剂成分
0.5%碘伏
0.5%硫代硫酸钠、0.5%吐温80
消毒剂 2000mg/L有效氯
0.5%硫代硫酸钠、0.5%吐温80
75%乙醇
0.5%卵磷脂、0.5%吐温80
季铵盐
0.5%卵磷脂、0.5%吐温80
洗必泰 2%戊二醛
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0.5%卵磷脂、0.5%吐温80 1%甘氨酸、0.5%吐温80
保存0—4℃，送检时间≤24h。
快检测，送检时间≤6小时，若样品保存 0—4℃，送检时间≤24h
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5
一、医务人员手消毒效果监测采样
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结果判断
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二、物体表面消毒效果监测采样方法
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注意：根据使用消毒剂选择含相应中和剂的采用液
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门把手等不规则物体表面：直接涂抹
图 104—1 局部百级、周围千级
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2、局部千级、周围万级：手术区布放 3 点（对脚布点），周边区布放 6 点（长 边内 2 点，短边内 1 点）（图 104—2）
图 104—2 局部千级、周围万级
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3、局部万级、周边十万级：手术区布放 3 点（对角布点），周边区布放 4 点（每 边内 1 点）（图 104—3）
监测频度 医院应对感染高风险部门每季度进行监测；洁净手术部
(室)及其他洁净场所.新建与改建验收时以及更换高效过 滤器后应进行监测；遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关 时随时进行监测，并进行相应致病微生物的检测。
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注意事项
采样前，应关好门、窗，在无人走动的情况下，静止 10分钟后采样。
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图 104—3 局部万级、周围十万级
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SUCCESS
THANK YOU
2020/12/11
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3、十万级：布放 5 点（避开送风口正下方）（图 104—4）。
图 104—4 十万级
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3、三十万级：面积>30m²布放 4 点，面积≤30m²布放 2 点（避开送风口正下方） （图 104—5）
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采样方法
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表 104—1 清净室空气细菌菌落数总数标准（空态或静态）
等级 手术室 沉降法（浮游法）细菌最大平均浓度 表面最大 空气洁净度级别
名 称 手术区
周边数 染菌数
（个/㎡） 手术区 周边区
I
特别洁净 0.2 个/（30min·90 皿） 0.4 个/（30min·90 皿） 5
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采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，应由远处向近 处摆放，平皿盖由远处向近处打开；收集时应由近处 向远处收集，平皿盖由近侧向远侧扣盖。暴露时间（ Ι类环境暴露30min；Ⅱ类环境暴露15min；Ⅲ、Ⅳ类 环境暴露５min）后盖上平皿及时送检。
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未采用洁净技术净化空气的房间采用平板暴露法
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微生物监测采样技术
院感办 2015.11
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1
主要内容：
一、手消毒效果监测采样方法
二、物体表面消毒效果监测采样方法
三、空气消毒效果监测采样方法
四、使用中消毒液染菌量监测采样方法
五、紫外线灯管强度监测方法
六、环境卫生学监测结果分析流程
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环境卫生学监测的目的：
监测消毒效果是否达到标准要求， 追寻消毒方法是否正确。
面积＞30 ㎡面积≤30m²来自图 104—5 三十万级
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洁净手术室静态（空态）时空气采样方法（沉降法）
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未采用洁净技术净化空气的房间
室内面积≤30cm2，设内中外对角线三点， 内外点距墙壁1米处；室内面积〉30m2，设 四角及中央5点，四角的布点位置应距墙壁 1m处，将普通
将普通营养琼脂平皿（φ９０ｍｍ）放 置各采样点，采样高度为距地面０.８ ｍ－１.５ｍ；
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四、使用中消毒液染菌量监测
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采样方法：
用无菌吸管吸取使用中消毒液１ml，加入９ml含 有相应中和剂的采样管。
采样后1h内送检（4小时检测）。 使用中消毒剂应每季度进行监测，灭菌剂应
每月进行监测。
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结果判断
灭菌用消毒液的菌落总数应为 0 cfu／ml 皮肤粘膜消毒液的菌落总数 ≤10 cfu／ml 消毒用消毒液的菌落总数 ≤100 cfu／ml
5 10 000 级 100 000 级
手术室
（75 个/m）
（150 个/m）
IV 准洁净
5 个/（30min·90 皿）（175 个/m）
5
300 000 级
手术室
注：1.浮游法的细菌最大平均浓度采用括号内数值。细菌浓度是直接所测的结果，不是沉降 法和浮游法互相换算的结果。
2.I 级眼科专用手术室周边区按 10 000 级要求。 3.表面最大染菌数（·单位：个/㎡）推荐采用涂抹法，每次采样面积为 100 ㎡。 36
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小型物体表面的结果计算，用ｃｆｕ／件表示。
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三、空气消毒效果监测采样方法
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监测方法
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洁净手术部采样方法
监测时将采样器置于室内中央0.8m---1.5m高度，采样 时间≦30min，房间大于10m2者，每增加10m2增设一个 采样点。
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1、局部百级、周围千级：手术区布放 5 点（双对角布点），周边区布放 8 点（每 边内 2 点）（图 104—1）