日立HITACHI 7180糖化血红蛋白测定参考区间验证
目的应用CLSIC28-A2 文件对四川迈克试剂在日立HITACHI 7180全自动生化分析仪检测系统中进行参考区间的验证，确定其是否满足临床的要求。
方法运用免疫增强速率比浊法，采用我院门诊健康体检1280例个体标本进行测定，比较参考值和原始参考之间的可比性。
结果仪器测定HbAlc，1280例参考个体中60岁以内，有59例（或5%）的观测值在原始报告的参考限之外，厂商或提供参考区间的实验室报告的95%参考区间可以接受。
60岁以上须建立本实验室的参考区间。
结论我们认为，使用四川迈克试剂在日立HITACHI 7180全自动生化分析仪检测系统中进行检测，其厂家提供的参考区间（3.50±5.85%）在一定范围内可接受，但存在年龄差异，需要建立各年龄组的参考区间。
标签：全自动生化分析仪；参考区间；糖化血红蛋白
随着各种全自动生化仪器使用，同一检验项目，采用不同的方法和不同的检验系统进行检验，必须使用适当的方法来进行检验结果的可比性，如果检验结果不可比就必须建立不同仪器、不同方法、不同检测系统的参考区间。
我们依据美国国家临床实验室标准化研究所（CLSI）28-A2 文件的要求[1]，对本实验室日立HITACHI 7180全自动生化分析仪检测糖化血红蛋白参考区间进行实验评价，现报道如下。
1 资料与方法
1.1一般资料检测组为2013年1月～3月本院健康体检1280名人员，并同时进行肝功能、肾功能、血糖、血脂、血常规测定。
HbAlc用（x±s）表示，参考区间按x±1.96s计算。
男650人、女630人，年龄15～85岁。
1.2仪器与试剂仪器为HITACHI 7180全自动生化分析仪；试剂盒由四川迈克生物有限公司（批号0413021），质控品日本生研（高低值分别为18.5% 4.5%，批号299021），校准品四川迈克（批号0413021），四个浓度值分别为5.0%、8.5%、1
2.4%、16.5%。
1.3方法
1.3.1仪器熟悉阶段包括熟悉仪器的日常操作程序，保养程序，样品准备校准以及检测程序。
1.3.2方法熟悉阶段在进行参考值研究前，应对分析方法的性能进行验证评价。
其内容包括总不精密度，不超过1/3CLIA88允许误差，不准确度偏倚不超过1/2CLIA88允许误差[2]，最低检测限，线性范围，回收率和影响因素等。
如果使用同一型号分析仪器的重复测量，在建立参考区间时还要考虑批间差异，技术人员产生的变异以及仪器之间的变异。
无论是建立参考区间还是日常患者标本的检验，都必须用控制品进行常规质量控制。
保证同一检验项目结果的统一性，
准确可靠性。
1.3.3样品采用抗凝血2ml，静置3h后，以2500rmp离心2min，取血细胞层20ul，加入R4（溶血液）1ml并溶血，采用免疫增强速率比浊法检测糖化血红蛋白，试剂盒由四川迈克生物有限公司提供，严格按试剂盒说明书操作。
1.4统计学方法采用SPSS 13.0 软件对结果进行数据统计。
数据以均数，标准差表示，组间差异采用两样本均数比较t检验，以P＜0.05为差异有统计学。
2 结果
不同性别HbAlc的分布未发现明显差异，男850人（4.75±0.56），女590人（4.78±0.57），（t=1.282，P=0.20）；不同年龄分组HbAlc的均值存在统计学差异，以60岁为分界年龄（t=3.45，P=60岁为3.72%～6.18%；HbAlc与年龄（r=0.359，P＜0.01）均相关。
仪器测定HbAlc，1134例参考个体中60岁以下不超过59例（或5%的结果）的观测值在原始报告的参考限（3.45%～5.85%）之外，厂商或提供参考区间的实验室报告的95%参考区间可以接受，60岁以上须建立各实验室的参考值。
采用我院健康体检1280例个体标本在日立HITACHI 7180生化仪检测糖化血红蛋白的测定结果见表1。
3 讨论
3.1生物参考区间是解释检验结果，分析检验信息的一个基本尺度和依据，它是确定临床医学中的基本问题[3]，临床检验对象是患者，由于年龄，性别，民族，地域的原因差异，因而其参考区间也应有差异[4]。
因此，引进新仪器或使用新试剂必须对检测项目进行参考区间的验证。
3.2生物参考区间的验证必须在稳定，准确的检测系统及方法上进行，避免由于检验误差造成验证结果的符合程度，在验证工作前按说明书要求进行分析性能的评价，制定质量目标保证检验结果的统一性和准确性，确定一个可靠的参考区间非常重要。
随着愈来愈多新的检验项目或方法引入实验室，要求每个实验室，无论其规模大小，都必须对厂商提供的参考值进行验证以确定自己的参考区间。
因此，本研究采用CLSIC28-A2推荐方法对HITACHI 7180全自动生化分仪器测定HbAlc进行验证，1280例参考个体中60岁以下不超过59例（或5%的结果）的观测值在原始报告的参考限之外，厂商或提供参考区间的实验室报告的95%参考区间可以接受。
本研究表明60岁以上须建立本实验室的生物学参考区间。
因此HbAlc的值水平存在年龄差异，必须对其适用性进行验证，不同实验室需要建立各自的参考范围。
参考文献：
[1]NCCLS.C28-A2.How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory Approved guideline-second edition[S].CLSI.2000.
[2]杨有业，张秀明.临床检验方法学评价[M].人民卫生出版社，2007：137.
[3]毕波，吕元.定量检测方法学性能验证的系统设计[J].中华检验医学杂志，2007，30：143-145.
[4]尹伯元，邓尚平.放射免疫分析在医学中的应用[M].原子能出版，1991：109.
[5]宋娟，姚传华.糖尿病周围神经病变患者一氧化氮、糖化血红蛋白等测定意义[J].国外医学，床生物化学与检验学分册，2005，01：8-9.
[6]石俊明，杜倩，郝东义.2型糖尿病糖化血红蛋白与视网膜和周围神经病变的关系探讨[J].医药论坛杂志，2007，18：94+96.编辑/哈涛。