培养基的灭菌
灭菌以后培养基应该迅速冷却至所需温度，避免 长时间保存在灭菌锅内，造成过度灭菌，影响培 养基的营养成分或选择性效果。
每批培养基制备好以后，应仔细检查一遍，如发 现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培养基沾 染等、均应挑出弃去。并测定其最终pH。
将全部培养基放入36±1°C恒温箱培养过夜，如 发现有菌生长，即弃去。
培养基的制备
制备培养基用容器不得为铜锅或铁锅，以防有离 子混入培养基中，影响微生物的生长。
所有容器在使用前都要根据不同的情况，经过一 定的处理，洗刷干净。有的还要进行包装，经过 灭菌等准备就绪后，才能使用。
容器的大小需大于复水后培养基总体积的2倍以上， 避免在加热溶解过程中，培养基溢出。
培养基的制备
培养基的储存
培养基应存放于冷暗处，最好能放于普通冰箱 放置时间一般不宜超过一周。 倾注的平板培养基不宜超过3天。如果保存时间超
过2天，应将其放入密封的塑料袋中保存。 配好的肉汤类培养基如果保存时间超过2周，应将
其放在带有螺旋盖的试管或其它密闭的试管或容 器中防止蒸发
培养基的使用
平板在接种使用时，表面必须无明显潮湿水珠。 对于冰箱保存的平板，应待温度回复至室温后再
培养基的制备
因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化，培 养基各成分完全溶解后，应进行PH的初步调正。 例如，牛肉浸液约可降低pH0.2，而肠浸液pH却 会有显著的升高。因此，对这个步骤，操作者应 随时注意探索经验、以期能掌握培养基的最终PH， 保证培养基的质量。
一般灭菌前比最终pH高0.2-0.3 。 用1mol/L Na0H或 lmol/LHCL调整。
培养基的灭菌
已配制好的培养基必须立即灭菌，避免微生物生长繁殖而 消耗养分，改变培养基的酸碱度。
高温可破坏培养基的营养成分，还会使琼脂的凝胶强度下 降，因此必须严格控制灭菌温度和时间，并且不可重复灭 菌。
高压蒸汽灭菌锅的压力表等要定期进行检定，并定期采用 生物指示菌法或化学变色纸片对灭菌效果进行验证。
培养基的制备
培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错 乱，最好一次完成，不要中断。可将配方置于傍 侧，每称完一种成分即在配方面军做出记号，并 将所需称取的药品一次取齐，置于左侧，每种称 取完毕后，即移放于右侧。完全称取完毕后，还 应进行一次检查。
培养基所用化学药品均应是化学纯的
培养基的制备
要求生产企业提供：培养基成分名称及产品编号、批号、 使用前的pH、储藏信息和有效期、性能评价和所用测 试菌株、技术数据清单、质控证书以及必要的安全/危 害数据等材料。
验收
购买的培养基到货后，应有专人做好接受和验收 工作，应仔细核对生产企业提供的资料、培养基 名称、规格数量、外观特征、批号、保质期是否 符合要求。
在培养基分装灭菌前，各成分应溶解均匀。 在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动、以防焦化、
如发现有焦化现象、该培养基即不能使用，应重新制备。 待大部分固体成分溶化后，再用较小火力使所有成分完全 溶化，迄至煮沸。如为琼脂溶化，用另一部分水溶化其它 成分，然后将两溶液充分混合。在加热溶化过程中，因蒸 发而丢失的水分，最后必须加以补足。
培养基制备用水中不能含有任何抑制或影 响微生物生长的物质。
使用蒸馏水或与其同质的水。 最好不使用离子交换器生产的去离子水。
培养基的制备
每次制备培养基均应有记录，包括培养基 名称，配方及其来源，和各种成份的牌号， 最终pH值、消毒的温度和时间制备的日期 和制备者等，记录复制复制一份，原记录 保存备查，复制记录随制好的培养基一同 存放、以防发生混乱。
主要内容
培养基购置、贮存、制备、使用注意事项 培养基质量控制 常用菌株保存方法
一、培养基购置、贮存、 制备、使用注意事项
购置
依据ISO/IEC17025《检测和校准实验室能力的通用要 求》，对培养基的供应企业进行评价后选择合格的供应 商；
应选择产品市场信誉度高、有质量保证能力和服务保证 能力的企业；
计数培养基判断结果
干粉色泽均匀、研细度好，色泽符合要求 制备好的培养基有相应的颜色，一般的培养基应澄
清、无浑浊、无沉淀。 pH值符合、硬度适宜，划线不破、透明无沉淀物。
生长率 %） （ 试 对验 照培 培养 养基 基上 上菌 菌 10落 落 % 0总 总 70%数 数
菌落大小、形态与对照培养基一致。
使用 用于沉降菌检测的所有平板必须经无菌试验后才
可使用 固体培养基灭菌后再融化只允许一次。
培养பைடு நூலகம்质量控制
由于不同批次的蛋白胨、浸膏（粉）、琼 脂、胆盐等成分的质量及酸碱度不同等， 影响了培养基质量的稳定性 。因此对购入 的干培养基开展质量检验验收是实验室室 内质量控制的重要内容之一。
现有培养基质控标准
每批培养基到货物后都应对培养基的质量进行检 测，满足检测方法规定的要求后方可投入使用。
培养基的储存
干粉培养基应保存在阴凉干燥处，要避免阳光直 射；未开瓶的培养基在室温下的最长保存2年，开 瓶后的干粉培养基易吸湿，应注意防潮并在6个月 内用完。应定期对储存中的培养基进行常规检查， 如容器密闭性复查、首次开封日期、内容物的感 官检查，如果培养基发生结块、颜色异常和其他 变质迹象就不能再使用。
微生物限度检验培养基质量控制文稿演示
分类
主要用于增菌 用于检测动力及保存菌种 用于分离鉴定细菌
分类
普通琼脂培养基 血液琼脂培养基 双糖铁培养基 SS培养基 庖肉培养基
概念
由于不同批次的蛋白胨、浸膏（粉）、琼 脂、胆盐等成分的质量及酸碱度不同等， 影响了培养基质量的稳定性 。
适宜的培养基制备方法、储存条件和质量 控制是提高优质培养基的保证
WS/T 232 2003 商业性微生物培养基质量 检定规程
卫生部卫监发（1993）7号文件 食品卫生 微生物检验用干燥培养基生产质控和质量 标准
质控参数
1.外观：干粉色泽、研细度。2.溶解后培养 基色泽、透明度、杂质、沉淀物、硬度 （凝胶强度）；
3.灭菌后pH值；
4.菌落形态、菌落大小（直径）；5.生长率