下,随着球磨时间的增加,其剪切应力显著下降。
用幂方程τ=k γm (其中k 为稠度系数;m 为流动特征指数对曲线进行拟合,结果如表2所示。
由拟合结果可知,在不同温度下,相关系数R 2在0.9850~0.9993之间,这说明方程与曲线有较好的相关性。
同一样品的稠度系数k 随着温度的升高而减小,说明温度升高可以减小体系的稠度,增强淀粉糊的流动性。
在同一温度下随着球磨时间的增加,稠度系数k 显著下降,流动指数m 则是呈现增加的趋势,说明球磨后的绿豆淀粉更趋近于牛顿流体。
3结论上述实验结果表明,机械球磨方法可以有效地将绿豆淀粉非晶化,球磨一定时间后淀粉颗粒的偏光十字消失,X -射线衍射曲线的尖峰衍射特征逐渐减弱,绿豆淀粉颗粒的结晶结构受到严重破坏。
球磨处理后绿豆淀粉糊的流变特性在不同浓度和温度下发生了变化,绿豆淀粉糊随着球磨时间的延长稠度系数k 不断减小,而流动特征指数m 则不断增大,说明球磨处理后绿豆淀粉糊趋向于牛顿流体的特征。
参考文献:[1]Shinji Tamaki,Makoto Hismatsu,Katsunori Teranishi,et al.Structural change of maize starch granules by ball-mill treatment[J].S tarch,1998, 50(8:342-348.[2]Shinji Tamaki,Makoto Hisamatsu,Katsunori Teranishi,et al. Structural change of potato starch granules by ball-mill treatment[J].S tarch,1997,49(11:431-438.[3]胡飞,陈玲,李琳.马铃薯淀粉颗粒在微细化过程中结晶结构的变化[J].精细化工,2002,19(2:114-117.[4]Sherman P.Food texture and rheology[M].New York:Aca-demic Press,1979.[5]Prentice J H.Measurements in the rheology of foodstuffs [M].London:Elsevier Applied Science Publishers,1984.[6]胡飞,李平凡,陈玲.微细化马铃薯淀粉流变性质的研究[J].粮食与饲料工业,2002,(7:41-43.[7]二国二郎.淀粉科学手册[M].王微青,等,译.北京:轻工业出版社, 1990.31-43,163-167.[8]Mohd Nurul I Muhd,Azemi B M N,Manan D M A.Rheo-logical b ehaviour o f s ago(Metroxylon s agu s tarch p aste[J].Food Chemistry,1999,64:501-505.收稿日期:2004-07-14*通讯作者基金项目:天津市教委科研项目(20039902作者简介:乌兰(1976-,女,硕士研究生,研究方向为食品科学、天然产物开发。
金银花中绿原酸的提取及检测乌兰,张泽生*(天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津300222摘要:采用多种方法分别从金银花中提取绿原酸,用紫外光谱法和高效液相色谱法对其进行定性定量分析。
同时用金银花乙醇提取物对大肠杆菌进行抗菌试验。
绿原酸提取试验结果表明:用70%乙醇热回流提取是金银花中绿原酸提取的最佳方法,获得绿原酸的提取率高于其他方法,提取终产物与标准品的最高吸收峰均在324nm 处,终产物中绿原酸的含量为43.35%。
抗菌试验结果表明:金银花提取物具有较强的抑菌活性。
关键词:金银花;绿原酸;提取;检测;抗菌活性Extraction and Examination of Chlorogenic Acid from Flos LoniceraeWU Lan,ZHANG Ze-sheng*(Food Engineering and Biology Technology,Tianjin University of Science and Technology,Tianjin300222,ChinaAbstract:Optimization of the extracting method of chlorogenic acid from Flos Lonicerae was studied by several differentmethods.Two different ways of Ultraviolet(UV and Visible Spectrophotometr and High Performance Liquid Chromatography (HPLC have been carried out for the quantitative and qualitative determination of chlorogenic acid in Flos Lonicerae.Inhibition test against pathogenic bacteria has been done with Flos Lonicerae ethanol and chlorogenic acid.The results of chlorogenic acid extraction showed that chlorogenic acid tiptop absorb-apex was324nm,with ethanol of70%concentration extraction was remarkably superior to other methods.The content of chlorogenic acid with70%ethanol extraction was43.35%,so the ethanol with70%concentration extraction was the optimum condition. The antibacterial action of chlorogenic acidin vitro o n E scherichia Coliand extracted with70%ethanol from Flos Lonicerae showed that F los Lonicerae had strong antimicrobial activity.Key words:Flos Lonicerae;chlorogenicacid;extraction;examination;antimicrobial activity中图分类号:TS207.3文献标识码:A文章编号:1002-6630(200505-0130-05金银花为忍冬科(Caprifoliaceae忍冬属(Lonicera植物忍冬(Lonicera japonica thunb及同属多种植物的干燥花蕾,它是一种“药食同源”的绿色植物,是临床常用的中药之一。
近代研究一般认为金银花的生物活性有效成分为绿原酸类化合物,并且常以绿原酸含量的高低来评价金银花质量的优劣[1]。
绿原酸具有显著的清热解毒、抗菌消炎和抗衰老作用;对消化道的癌症有明显的抑制作用;还具有抗生育作用及对免疫系统的调节作用;绿原酸还具有增香和护色作用,可用于食品和果品保鲜。
绿原酸是含有羧基和邻二酚羟基的有机酸,易溶于水、醇溶液和丙酮等溶剂。
目前,从金银花中提取绿原酸多采用水煎法、水提醇沉、稀醇回流法、动态浸提法、超声波法和渗漉法等,国内学者对绿原酸不同提取工艺的评价仍存在分歧,但多数认为乙醇回流法较好。
为进一步优化乙醇回流法的提取工艺,本文进行了金银花中绿原酸的提取试验,并采用紫外分光光度法及《中华人民共和国药典》(2000年版要求采用高效液相色谱法(HPLC等作了相应的含量测定,以及经典的生物检测法[2,3]对金银花提取物的生物活性进行检测。
1材料与方法1.1材料1.1.1试验材料河南金银花。
1.1.2试验菌株大肠埃希氏菌(Escherichia Coil,G-,购自湖北武汉大学中国典型培养物保藏中心。
1.1.3培养基固体肉汤培养基g/L:蛋白胨10.0,牛肉浸膏5.0,NaCl 5.0,琼脂20.0,pH7.2,121℃灭菌20min;半固体肉汤培养基g/L:蛋白胨10.0,牛肉浸膏5.0,NaCl 5.0,琼脂8.0,pH7.2,121℃灭菌20min;琼脂培养基g/L:琼脂20.0,121℃灭菌20min。
1.1.4实验仪器KDF-2116康达多功能食品粉碎机(天津市达康电器公司,微量进样器(基因公司,O R I O N 818型pH计(美国,RE-3000旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器,SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸,调温加热套(河北省黄骅市中兴,超净工作台(苏净集团,H P S-250生化培养箱(哈尔滨市东明医疗仪器,AB204-N分析天平(美国Mettler-Toledo Group,Uvmini-1240紫外可见分光光度计(日本岛津有限公司,高效液相色谱仪(美国Lab,数码相机CASIO(日本,游标卡尺。
1.1.5主要试剂无水乙醇、甲醇、氯化钠、柠檬酸、三乙胺(分析纯、乙腈(色谱纯,绿原酸标准品(S i g m a公司,庆大霉素(华北制药厂,生产批号: 20040218,80万单位/2ml。
1.2实验方法1.2.1绿原酸的基本提取工艺1.2.1.1破碎水提取时将金银花低温烘干后切至0.6~ 0.8cm;乙醇提取时将烘干后的金银花用粉碎机破碎至约20目;1.2.1.2热回流浸提破碎后将金银花置于磨口圆底烧瓶中,加入适量的水或乙醇溶液,用调温电热套加热至微沸状态,热回流2次,第一次1h,第二次0.5h;1.2.1.3抽滤用布氏抽滤器减压处理浸提液;1.2.1.4浓缩合并浸提液,用薄膜旋转蒸发器减压浓缩(40℃至无乙醇味,回收的乙醇待用;1.2.1.5冷沉离心将浓缩液置于4℃冷藏24h后10000r/ min离心30min,取上清,同时将沉淀用少量蒸馏水再洗脱一次,离心后合并两次上清液,定容。
1.2.1.6真空冷冻干燥将提取液先于超低温冰箱中冷冻0.5h,然后至于真空冷冻干燥剂中干燥成粉末。
1.2.2绿原酸的检测对金银花中绿原酸定性定量的测定有颜色反应法、容量法、极谱法、比色法、紫外分光光度法、三波长分光光度法、导数光谱法、纸层析—比色法、纸层析—紫外分光光度法、薄层光密度法、薄层层析—紫外分光光度法、薄层扫描法、气相层析法、G C-M C法、高效液相色谱法(HPLC及生物检测法。