由图 2 可以看出， 随着真空度增加， 绿原酸损失 到 0. 03 MPa 后， 损失量变化不大。这可能是 减少， 低压下， 浓缩到一定浓度需要的时间长， 造成绿原 压力对浓缩条件影响不大， 取 酸损失大。总体上， 最佳的浓缩压力是 0. 03 MPa。 3． 2． 3 pH 值对减压浓缩影响 用氢氧化钠和浓盐酸调节不同 pH 值， 取 pH 值 7， 11 ～ 12， 为 2 ～ 3， 并固定温度为 70℃ ， 压力为 0． 03
［ 7 ］
本试验通过对提取料液比、 提取时间、 提取次 pH 值等因素的重复对比， 数、 确定了水提的最佳提 取条件。但是不同的浓缩条件可能会造成绿原酸 不同程度的损失， 而此前浓缩条件对绿原酸含量的 影响未见系统的研究报道。
取绿原酸对照品适量， 精密称定， 置于棕色量 加 50% 甲醇制成每 1 mL 含 20 μg 的溶液。 瓶中， 2． 3． 3 线性试验 4． 00， 6． 00， 8． 00， 分别精密吸取对照液 2． 00， 10． 00 mL， 加 50% 甲醇至 10 mL， 以峰面积积分值为 纵坐标， 绿原酸含量为横坐标， 得到回归方程为： Y = 393 882． 8X － 41 221， R2 = 0． 996 2。
提取时间 / h 提取次数 1 2 3 1 2 3
49 王雪梅， 等： 金银花中绿原酸提取浓缩工艺
表2 试验号 A 1 2 3 4 5 6 7 8 9 k1 k2 k3 极差 R 1 1 1 2 2 2 3 3 3 2． 340 2． 389 2． 472 0． 132 B 1 2 3 1 2 3 1 2 3 2． 448 2． 441 2． 312 0． 136 C 1 2 3 2 3 1 3 1 2 2． 302 2． 337 2． 563 0． 262 D 1 2 3 3 1 2 2 3 1 2． 493 2． 419 2． 289 0． 204 图1 温度对减压浓缩效果影响 正交试验结果及极差分析 因素 绿原酸含 量 g/g 2． 381 7 2． 335 5 2． 302 4 2． 261 0 2． 683 8 2． 221 4 2． 701 3 2． 302 5 2． 413 3
［ 1 ］
花的主要药效成分。 金银花中绿原酸的提取方法有水提法 法
［ 3 ］ ［ 2 ］
、 醇提
［ 4 ］ ［ 5 ］ 、 微波提取法 、 超声提取法 等。后 2 种提
但无法用于工业化大生 取工艺虽然提取率较高， 产。醇提法操作相对简单， 但是溶剂不易回收， 增 操 加了生产成本。水提法为传统煎煮中药的方法， 且不涉及溶剂回收问题， 工业化生产 作简单方便，
第 25 卷 第 3 期
重 庆 理 工 大 学 学 报（ 自然科学）
2011 年 3 月
Mar． 2011 Journal of Chongqing University of Technology（ Natural Science） Vol． 25 No． 3
3
3． 1
结果与讨论
绿原酸提取正交试验设计 8］ ， 根据文献 ［ 选取料液比、 提取时间每个因素设 3 个水平 （ 表 1） 。采用 L9 （ 34 ） 正交试验， 以金银花中绿原酸 含量为指标， 优化绿原酸的提取工艺。试验安排及 极差分析结果见表 2， 方差分析见表 3。 由表 2 可以看出， 影响金银花提取效果的因素 顺序是 C ＞ D ＞ B ＞ A， 即提取次数 ＞ pH 值 ＞ 提取时 间 ＞ 料 液 比。 金 银 花 中 绿 原 酸 提 取 最 佳 条 件 为 A3 B1 C3 D1 ， 即料液比 1∶ 12， 提取时间 1 h， 提取次数 3 pH 值为 2 ～ 3。 次， 由表 3 可以看出， 对金银花中绿原酸提取效果 其次是 pH 值， 料液 影响最显著的因素是提取次数， 比和提取时间对绿原酸提取率影响不显著。
定的温度范围内， 温度较低， 减压浓缩达到一定的 导致绿原酸的损失， 又由于绿 密度需要的时间长， 原酸不稳定
［ 9 ］
， 温度过高， 会加速它的分解， 使得最
终绿原酸的得率降低。故减压浓缩的最佳温度是 70 ℃ 。
注： 绿原酸的含量为绿原酸提取量与投料的金银花质 量之比（ g / g） 表3 因素 料液比 提取时间 提取次数 pH 值 误差 方差分析 F比 1． 001 1． 296 4． 444 2． 370 F 临界值 显著性 19． 000 19． 000 19． 000 19． 000 *
Technology of CHA Extracting Inspissation from Honeysuckle
WANG Xuemei，JIANG Li，YUAN Hongjiang，QUAN Xuejun
（ School of Chemistry and Chemical Engineering，Chongqing University of Technology，Chongqing 400054，China）
金银花中绿原酸提取浓缩工艺
王雪梅， 蒋 丽， 袁红江， 全学军
（ 重庆理工大学 化学化工学院， 重庆 400054）
摘
要： 以金银花为原料， 对其中绿原酸的水提浓缩条件进行优化。结果表明， 提取最佳条件
pH 值为 2 ～ 3。 减压浓缩的最佳条件： 浓缩压力 提取时间 1h， 提取次数 3 次， 为： 料液比 1∶ 12， P = 0． 03 MPa， pH 值为 2 ～ 3。 温度 T = 70 ℃ ， 关 键 词： 绿原酸； HPLC； 提取； 正交试验； 减压浓缩 中图分类号： S567． 7 文献标识码： A 文章编号： 1674 － 8425（ 2011） 03 － 0047 － 04
［ 6 ］
2． 3 2． 3． 1
绿原酸含量测定 色谱条件
［ 7 ］
。
色谱柱为 Phenomenex Luna C18 柱 （ 4． 6 mm × 150 mm， 5 μm ） ； 流 动 相 为 乙 腈 － 0． 4% 磷 酸 （ 12∶ 88） ； 检测波长为 327 nm； 进样量 10 μL。 2． 3． 2 绿原酸对照品溶液制备
由图 3 可以看出， 随着 pH 值增大， 绿原酸损失 量急剧增大。这可能是由于绿原酸属于有机酸类， 酸性条件对绿原酸起到保护作用， 反之在碱性条件 会加速它的分解。故最佳的浓缩 pH 值是 2 ～ 3。 下，
， 绿原酸类中绿原酸为金银
收稿日期： 2011 － 01 － 12 作者简介： 王雪梅（ 1984—） ， 女， 湖北人， 硕士研究生， 主要从事生物分离研究。
48 重庆理工大学学报 时绝大多数采用此法。提取得到的浸提液需要浓 缩才能成药。减压浓缩是分离和提纯性质不稳定 的液体以及低熔点固体有机物的常用方法
减压浓缩单因素实验 在最佳的提取条件 A3 B1 C3 D1 下得到 11 等份
图2 压力对减压浓缩效果的影响
pH 值为 金银花的提取液（ 绿原酸含量为 2． 701 3% ， 7） ， 用于不同条件下的减压浓缩。 3． 2． 1 温度对减压浓缩的影响 70 ℃ ， 80 ℃ ， 90 ℃ ， 分别取温度为 60 ℃ ， 并固 pH 值为 7， 进行实验， 定减压浓缩压力为 0． 03 MPa， 结果如图 1 所示。 由图 1 可知， 温度较低， 浓缩时绿原酸质量含量 随温度增加， 损失减少， 但达到 70 ℃ ， 损失量又开始 增加， 到 90 ℃ ， 损失急剧增加。这可能是因为在一
1
1． 1
试验材料
试验材料及药品 金银花： 购于安微亳州市药材市场； 绿原酸标
准品： 购于中国药品生物制品检定所； 其他药品包 浓盐酸、 乙腈、 甲醇、 磷酸， 其中甲醇为 括氢氧化钠、 色谱纯， 其他均为分析纯。 1． 2 主要设备 MH － 5000 型电热套 （ 西安唯信检测设备有限 公司） ； HC － TP － 12 型架盘天平（ 天津天平仪器有 限公司 ） ； pHS － 3C 精密 pH 计 （ 上海盛磁有限公 司） ； 波美计（ 天津浩连科技发展有限公司） ； SHB － III（ A） 型循环水多用真空泵（ 陕西太康生物科技有 限公司） ； AS 系列超声波发生器 （ 哈尔滨博实科技 有限公司） ； Waters 高效液相色谱仪（ UV 检测器） 。
Abstract： Taken honeysuckle as the material，the paper optimized the condition of extracting inapissation in the water of CHA． The result shows that the condition of optimal extracting should be as 1∶ 12 rate of material to liquid，extracting time as 1 h，extracting number of times as 3，pH value as 2 ～ 3． And the condition of optimal decompression inspissation should be P = 0. 03 MPA， T = 70 ℃ ， pH value from 2 to 3． Key words： CHA； HPLC； extracting； orthogonal test； decompression inspissation 金银花又名忍冬花， 为忍冬科忍冬属植物。自 古以来， 金银花常用于清热解毒， 治疗温病发热、 热 毒血痢、 痈疡等症， 亦用于风热感冒、 支气管炎等病 金银花具有抑菌、 抗病毒、 症。现代药理研究表明， 抗炎、 解热、 调节免疫等作用。金银花化学成分为 绿原酸类、 木犀草素、 三萜皂苷、 咖啡酸、 挥 黄酮类、 发油类及微量元素等
3． 2． 2
压力对减压浓缩的影响
0． 03， 0． 06， 0． 08 MPa， 分别取压力为 0． 01， 并固 pH 值为 7， 定温度为 70 ℃ ， 进行实验， 结果如图 2 所示。