PNH不同时间尿样
含铁血黄素
红细胞膜缺陷的检验
红细胞渗透脆性试验
酸溶血试验 (Ham) 蔗糖水试验
3、蔗糖水溶血试验
离子浓度低，增强补体 与红细胞结合，膜 –孔， 水进入-细胞破坏
（二）红细胞内酶缺陷的检验
1、自身溶血试验及纠正试验 原理：细胞内酶缺陷（葡萄糖-6-磷酸 脱氢酶 G-6PD）(丙酮酸激酶)，葡萄糖 效解障碍，不能提供足量ATP，红细胞在 自身血浆中温育48小时，不能继续从血 浆摄取葡萄糖作能量来源，ATP减少，不 能维持红细胞内钠泵作用，导致溶血增 加。在温育过程中分别加入葡萄糖和ATP 作纠正物，看溶血能否纠正。
参考值： 正常人轻微溶血，溶血度<3.5%；
加葡萄糖、ATP溶血明显纠正，
溶血度<1%。
临床意义： （ 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 G-6PD缺乏症 蚕豆病）溶血增加，加葡萄 糖、ATP溶血部分纠正，（丙酮酸激酶缺 乏症）加葡萄糖不能纠正。加入ATP能纠 正。
高铁血红蛋白还原试验
G-6PD缺乏症筛选试验
实验室检查
提示红细胞破坏的实验室检查 提示骨髓幼红细胞代偿性增生的实验室 检查 提示红细胞寿命缩短的实验室检查
一、提示红细胞破坏的实验室检查 一）、血管外溶血 高胆红素血症：游离胆红素增高为主 粪胆原排出增多：可增至400~1000mg 尿胆原排出增多
二）、血管内溶血 血红蛋白血症：正常仅约1~10mg/L 血清结合珠蛋白降低：正常为0.5~1.5g/L 血红蛋白尿：游离血红蛋白>1300mg/L时 出现 含铁血黄素尿：主要见于慢性血管内溶血。
三、提示红细胞寿命缩短的实验室检查 1、红细胞形态改变：如球形、靶形、镰 形、椭圆形、口形等 2、吞噬红细胞现象及自身凝集反应 3、海因(Heiz)小体：体外活体染色后， 在光学显微镜下见红细胞内的1~2µ m大 小颗粒折光小体 4、红细胞渗透性脆性增加 5、红细胞寿命缩短：溶血最可靠的指标
红细胞膜缺陷的检验
1、异传性红细胞膜缺陷 2、获得性红细胞膜糖化肌醇脂（GPI）锚链蛋白异（PNH）
（二）遗传性红细胞内酶缺乏（G6PD） （三）珠蛋白和血红素异常
二、红细胞外部因素所致的溶血性贫血
1、免疫性溶血性贫血
2、血管性溶血性贫血 3、生物因素 蛇毒、疟疾、黑热病等 4、理化因素 5、同种免疫性溶血性贫血
发病机制
理化因素接触史、感染史
血红蛋白尿
阳性 抗 血片有 人 红细胞 球 畸形 蛋 白 阴性 试 血片无 验 红细胞 畸形
酸溶血试验
球形细胞 椭圆形细胞
易肯定病因 PNH 免疫性 遗传球 遗传椭圆
红细胞碎片 靶形细胞 血红蛋白电泳
高铁血红蛋白 还原试验
微血管病性 海洋性贫血 血红蛋白病
G6PD缺乏
治疗
一、去除病因 二、药物治疗 糖皮质激素 免疫抑制剂 三、输血 四、脾切除术：遗传性球形细胞增多症
1、血管内溶血：RBC在循环血 液中直接破坏如PNH 2、血管外溶血：RBC在脾脏破 坏如球形RBC增多症、脾亢 3、原位溶血：幼RBC在骨髓中 溶血如AL、巨幼贫
胆红素正常代谢示意图
溶血性黄胆疸发生机制示意图
三）、异常红细胞的清除 血红蛋白可被分解为铁、珠蛋白和卟 啉粪胆原的肠肝循环 三、骨髓中红糸造血代偿性增生
红细胞渗透脆性试验
酸溶血试验 (Ham) 蔗糖水试验
红细胞膜缺陷的检验
红细胞渗透脆性试验
酸溶血试验 (Ham) 蔗糖水试验
1、
红细胞渗透脆性试验
原理:是测定红细胞对不同浓度
低滲氯化钠溶血的抵抗能 力 渗透脆性减低 渗透脆性增高
方 法 ：
0.6
0.4
0.2
NaCl
参考值 开始溶血：0.42%~0.46%（4.2~4.6g/L）NaCL 完全溶血：0.28%~0.34%（2.8~3.4g/L）NaCL


临床意义 （1）脆性增高 遗传性球形红细胞增多症 （2）脆性减低 小细胞低色素性贫血：海洋性贫 血、缺铁性贫血
红细胞膜缺陷的检验
红细胞渗透脆性试验
酸溶血试验 (Ham) 蔗糖水试验
红细胞孵育渗透脆性试验 原理 37℃孵育24小时，细胞内葡萄糖消
耗增加，ATP减少，钠离子泵出减少，细 胞膨胀脆性增高 。
三）其他提示RBC破坏增多的检查 1、RBC寿命测定〈15天（正常半衰期 25～32天） 2、血片见RBC碎片 3、血清乳酸脱氢酶升高
二、提示骨髓幼红细胞代偿性增生的实验室检 查 1、网织红细胞增多：达0.05~0.2 2、周围血液中出现幼红细胞：约1%，还可 见豪-胶（Howell-Jolly)小体 3、骨髓幼红细胞增生
黄疸的定义
由于血清中胆血素升高（>34.2 mol/L ）致使
皮肤、粘膜和巩膜发黄的症状和体征。
正常胆红素水 平（1.7~17. 1 mol/L） 结合胆红素：0 ~ 3. 4 mol/L 非结合胆红素：1.7 ~ 13.68 mol/L
胆红素在17.1 mol/L ~ 34.2 mol/L之间称为隐性黄疸
临床表现
一、急性溶血： 起病急骤，可有严重腰背及四肢酸痛， 伴头痛、呕吐、寒战，随后出现高热、 面色苍白、血红蛋白尿和黄疸。 严重者出现周围循环衰竭，急性肾衰 竭。
二、慢性溶血性贫血 以血管外溶血多见，有贫血，黄疸，肝、 脾大三大特征。长其高胆红素血症可并 发胆石症和肝功能损害。婴儿时期起病 者可有骨骼改变。
溶血性贫血
Hemolytic Anemia
吉林医药学院
概念
溶血：红细胞非自然衰老而提前遭受破 坏的过程。 溶血性疾病：发生溶血而骨髓能够代偿， 未出现贫血。 溶血性贫血：溶血程度超过造血代偿能 力，出现贫血。
临床分类
一、红细胞内部异常所致的溶血性贫血
二、红细胞外部因素所致的溶血性贫血
一、红细胞内部异常所致的溶血性贫血 （一）红细胞膜异常性溶血性贫血
如何诊断溶血性贫血？
第一步 确定是否有溶血 第二步 哪一类溶贫 诊断的步骤如下： 1、详细询问病史 2、根据实验室检查确定哪类贫血
二、鉴别诊断 有贫血及网织红细胞增多的其他贫血 兼有贫血及非胆红素尿性黄疸者 有非胆红素尿性黄疸而无贫血者 有幼粒-幼红细胞性贫血、成熟红细胞畸 形、轻度网织红细胞增多
间接抗人球蛋白试验 ：检查血清中有无游 离的不完全抗体，敏感性差。
RBC
抗人球蛋白
IgG不完 全抗体
直接抗球蛋白试验（DAT） 阳性（右）
临床意义
1、正常人抗人球蛋白试验直接、间 接均阴性， 2、自身免疫性溶血性贫血（温抗体 型 37℃条件下作用最强 IgG）,(冷抗 体型 4℃条件下进行试验 IgM) 3、新生儿同种免疫溶血病、SLE、 RA、HD、NHL 可阳性。
（三）珠蛋白合成异常的试验
血红蛋白电泳检测：
醋酸纤维膜电泳法，检查有无 异常血红蛋白区带 诊断海洋性贫血 地中海贫血
+
异常HB带
—
醋酸纤维蛋白膜电泳
免疫性溶血的检验
抗人球蛋白试验 ( Coombs)
原理 直接抗人球蛋白试验： 自身免疫性溶血性
贫血（AIHA）血清中有抗自身红细胞的不完全抗 体，他与表面附有相应抗原的红细胞结合，成为 致敏红细胞，加入抗人球蛋白与红细胞表面不完 全抗体结合，使红细胞相互连接起来出现凝集现 象。来证实红细胞表面有不完全抗体。——抗人 球蛋白直接试验阳性；
取决于红细胞受到的破坏、 血红蛋白的降解过程 红系造血的代偿能力
发病机制
一、红细胞易于破坏寿命缩短 一）、红细胞膜的异常 红细胞膜支架异常 红细胞膜对阳离子的通透性发生改变 红细胞膜吸附有抗体或补体 、机械性因素
二、异常红细胞破坏的场所 一）、血管内溶血 二）、血管外溶血 三）、原位溶血（无效性红细胞生成）
参考值 未孵育 50%溶血4~4.45%
孵育 50%溶血4.65~5.9%
意义 脆性增高 遗传性球形红细胞增多症
脆性减低 缺铁性贫血 珠蛋白生成 障碍性贫血
2、酸溶血试验 (Ham) 原理：红细胞+弱酸血清（pH6.6~6.8） 37℃ 1小时 红细胞膜对补体敏感， 备解素作用下溶血。
临床意义：正常人阴性， 阵发性睡眠性 血红蛋白尿阳 性（PNH）