文件名称: 全程C反应蛋白（CRP）测定试剂盒文件编号：（荧光免疫层析法）工艺规程版本/修改状态： V1.0/00 受控状态：受控编制人：日期：年月日审核人：日期：年月日批准人：日期：年月日生效日期：年月日颁发部门：质量部颁发份数： 2 份分发部门：生产部、质量部受控编号：全程C反应蛋白（CRP）测定试剂盒（荧光免疫层析法）1.产品名称、剂型、注册分类、规格、定义、组成及用途中文名称：全程C反应蛋白（CRP）测定试剂盒（荧光免疫层析法）规格：25人份/盒、40人份/盒剂型：诊断试剂注册分类：二类6840体外诊断试剂定义、组成及预期用途：本产品采用高度特异性的抗原抗体反应及免疫层析分析技术，通过夹心法检测原理来体外定量测定人血清、血浆样本中C反应蛋白（CRP）的含量。
依据：《全程C反应蛋白（CRP）测定试剂盒（荧光免疫层析法）产品技术要求》文件名称: 全程C反应蛋白（CRP）测定试剂盒文件编号：（荧光免疫层析法）工艺规程版本/修改状态： V1.0/00 受控状态：受控目录1.生产工艺流程图2.试剂卡制备生产工艺3.质量控制点4.主要原辅料、包装材料消耗定额、能源消耗定额、物料平衡的计算方法5.包装要求、标签、说明书(附样本)与产品贮存方法及有效期6.设备一览表7.技术安全及劳动保护文件名称: 全程C 反应蛋白（CRP ）测定试剂盒（荧光免疫层析法）工艺规程 文件编号：版本/修改状态： V1.0/00受控状态： 受 控1. CRP 生产工艺流程图羊抗兔IgG 抗体鼠抗C 反应蛋白抗体包被液配制（C 线）包被液配制（T 线）划线（NC 膜）BSA 及其他化学试剂贴膜组装探针稀释液配制样品垫制作 # ★BSA 及其他化学试剂样本稀释液配制分装★切条样品垫处理NC 膜干燥 # ★压卡装袋贴签、组装成品检验烧数据卡化学试剂合格入库不合格品控制十万级洁净区十万级洁净区干燥 环境#★：关键工序◇：质量控制点#：湿度≤30%半成品检验合格十万级洁净区干燥环境 #标准曲线制作合格不合格兔IgG 抗体微球偶联物鼠抗人CRP 抗体微球偶联物BSA 及其他化学试剂样品垫处理液配制探针配制....半成品检验不合格品控制不合格不合格品控制不合格合格不合格品控制不合格半成品检验万级洁净区文件名称: 全程C 反应蛋白（CRP ）测定试剂盒（荧光免疫层析法）工艺规程 文件编号：版本/修改状态： V1.0/00受控状态： 受 控2. 试剂卡制备生产工艺2.1工序一：样品垫制作 2.2工序二：ＮＣ膜制备 2.3工序三：样本稀释液制备 2.4工序四： 贴膜组装 2.5工序五： 切条 2.6工序六：压卡装袋 2.7工序七：烧数据卡2.8工序八：全程C 反应蛋白（CRP ）测定试剂盒（荧光免疫层析法）试剂盒组装2.1 工序一：样品垫制作 2.1.1 探针稀释液 2.1.1.1 标准配方名称 物料名称 配制1000ml 使用量75人份使用量探针稀释液三羟甲基氨基甲烷2.4228g0.12ml调节PH=8.4±0.2 蔗糖 150g 牛血清白蛋白 5g proclin3000.3ml纯化水定容至1000ml2.1.1.2 配制方法按照标准配方准确称取三羟甲基氨基甲烷2.4228g ，放入洁净烧杯中，加纯化水800ml ，放入1个洁净的磁力搅拌子，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，使用多参数测试仪测量PH 值应在8.4±0.2范围内，再依次加入蔗糖150g 、牛血清白蛋白5g 、proclin300 0.3ml ，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，将溶液缓缓倒入容积为1000ml 的容量瓶中，用纯化水反复冲洗3次烧杯，所有溶液倒入上述容量瓶中，用纯化水定容至1000ml 。
混合均匀4～30℃保存备用，有效期7天。
2.1.2 样品垫处理液 2.1.2.1 标准配方文件名称: 全程C 反应蛋白（CRP ）测定试剂盒（荧光免疫层析法）工艺规程 文件编号：版本/修改状态： V1.0/00受控状态： 受 控名称 物料名称 配制1000ml 使用量75人份使用量样品垫处理液十二水合磷酸氢二钠 5.73g 40ml 二水合磷酸二氢钠0.62g调节PH=7.4±0.2 纯化水定容至1000ml2.1.2.2 配制方法按照标准配方分别准确称取十二水合磷酸氢二钠5.73g 、二水合磷酸二氢钠0.62g ，放入洁净烧杯中，加纯化水800ml ，放入1个洁净的磁力搅拌子，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，使用多参数测试仪测量PH 值应在7.4±0.2范围内，将充分溶解并调好pH 的溶液缓缓倒入容积为1000ml 的容量瓶中，用纯化水反复冲洗3次烧杯，所有溶液倒入上述容量瓶中，用纯化水定容至1000ml ，混合均匀4～30℃保存备用，有效期7天。
2.1.3 样品垫制作 2.1.3.1样品垫处理(1) 将玻璃纤维平铺到水平槽内，倒入足量样品垫处理液，应让玻璃纤维完全浸泡入样品垫处理液中； （2）浸泡至少15分钟，保证玻璃纤维完全浸透，玻璃纤维表面无气泡； （3）玻璃纤维浸透后，将玻璃纤维取出，45度恒温干燥4-6小时； （4）干燥完成后4～30℃封存备用，有效期7天。
2.1.3.2样品垫制作（1）处理后的样品垫裁切成29mm 宽度；（2）按照兔IgG 抗体微球偶联物：鼠抗人CRP 抗体微球偶联物：探针稀释液=1:3:20的比例配制探针溶液； （3）按4ul/cm 喷量，将配制好的探针溶液均匀喷点到已裁切的样品垫上。
（4）在45度恒温干燥、湿度小于30%的环境下干燥4-6小时。
注：干燥湿度的控制是本岗位的工艺要点之一，湿度应控制在30%以下。
（5）干燥完成后4～30℃封存备用，有效期14个月。
注：干燥后应避免长时间放置于4～30℃环境。
2.2工序二：ＮＣ膜制备 2.2.1 包被液 2.2.1.1标准配方名称物料名称配制1000ml 使用量 75人份使用量文件名称: 全程C 反应蛋白（CRP ）测定试剂盒（荧光免疫层析法）工艺规程 文件编号：版本/修改状态： V1.0/00受控状态： 受 控包被液磷酸氢二钾 1.82g 0.06ml二水合磷酸二氢钠0.22g氯化钠 8.76g调节PH=7.2±0.2 蔗糖30g纯化水定容至1000ml2.2.1.2配制方法按照标准配方分别准确称取磷酸氢二钾1.82g 、二水合磷酸二氢钠0.22g 、氯化钠8.76g ，放入洁净烧杯中，加纯化水800ml ，放入1个洁净的磁力搅拌子，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，使用多参数测试仪测量PH 值应在7.2±0.2范围内，再加入蔗糖30g ，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，将溶液缓缓倒入容积为1000ml 的容量瓶中，用纯化水反复冲洗3次烧杯，所有溶液倒入上述容量瓶中，用纯化水定容至1000ml ，混合均匀4～30℃保存备用，有效期7天。
2.2.2 C 线包被液使用包被液将羊抗兔IgG 抗体稀释成终浓度为1mg/ml 。
充分混合后保存备用。
注：现用现配 2.2.3 T 线包被液使用包被液将鼠抗人C 反应蛋白抗体稀释成终浓度为1mg/ml 。
充分混合后保存备用。
注：现用现配 2.2.4 NC 膜划线（1）按左图所示，将PVC 底板摆好；除去PVC 底板中间25mm 处的保护纸，沿上面保护纸的下边缘，将硝酸纤维素膜（NC 膜）贴在该区； 注：1.粘贴上下边缘与相邻区上下边缘齐平；2.粘贴时注意动作轻柔，避免用手直接按压硝酸纤维素膜（NC 膜）表面。
（2）贴吸水滤纸：按27mm 的宽度将吸水滤纸切割成条，除去PVC 底板上端25mm 处的保护纸，将切好的吸水滤纸贴在该区；注：吸水滤纸下边缘超出该区2mm 覆盖硝酸纤维素膜（NC 膜）；上边缘与底板边缘齐平。
（3）使用划线包被机按照1μl/cm 包被量将C 线包被液及T 线包被液包被至NC 膜适当位置；文件名称: 全程C反应蛋白（CRP）测定试剂盒（荧光免疫层析法）工艺规程文件编号：版本/修改状态： V1.0/00 受控状态：受控（4）C、T线区域间距应调节足够宽度以保证检测仪可以显著区分，习惯上C线距NC膜上边缘距离为10mm，CT线之间间距为6mm，T线与NC膜下边缘间距为9mm。
注：1、贴膜和包被过程应注意避免膜的污染。
2、划线时的湿度条件是NC膜制备的要点之一，湿度应控制在45％～65%。
3、制备前需将C线包被液、T线包被液与硝酸纤维素膜（NC膜）平衡至相同温度。
2.2.5 NC膜干燥将包被的NC膜放置在相对湿度≤30%(环境温度18℃～26℃)条件下干燥。
NC膜干燥时间至少6小时。
干燥完成后封存备用，有效期14个月。
注：1、干燥时，湿度的控制是本岗位的工艺要点之一，湿度应控制在≤30%。
干燥后应避免长时间放置于4～30℃环境。
2.3工序三：样本稀释液制备2.3.1 标准配方名称物料名称配制1000ml使用量75人份使用量样本稀释液磷酸氢二钾 1.82g37.5ml二水合磷酸二氢钠0.22g氯化钠8.76g调PH至7.4±0.2S9 10g乙二胺四乙酸二钠0.2g聚乙烯吡咯烷酮（40K）3gProclin300 0.3ml牛血清白蛋白5g2.3.2配制方法按照标准配方分别准确称取磷酸氢二钾1.82g、二水合磷酸二氢钠0.22g、氯化钠8.76g，放入洁净烧杯中，加纯化水800ml，放入1个洁净的磁力搅拌子，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，使用多参数测试仪测量PH值应在7.4±0.2范围内，再依次加入S9 10g、乙二胺四乙酸二钠0.2g、聚乙烯吡咯烷酮（40K）3g、Proclin300 0.3ml、牛血清白蛋白5g，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，将溶液缓缓倒入容积为1000ml的容量瓶中，用纯化水反复冲洗3次烧杯，所有溶液倒入上述容量瓶中，用纯化水定容至1000ml，混合均匀后4-30℃保存备用，有效期7天。
文件名称: 全程C反应蛋白（CRP）测定试剂盒文件编号：（荧光免疫层析法）工艺规程版本/修改状态： V1.0/00 受控状态：受控2.3.3分装将上面配制好的样本稀释液按照500ul/支的装量进行分装，4-30℃条件下保存，有效期12个月。
2.3.4标签打印、贴签2.3.5质控项目和标准项目标准外观样本稀释液为无色透明液体，无悬浮物及沉淀物。
净含量样本稀释液净含量应在标示值的90%～110%之间。
pH 在7.4±0.2范围内。
2.4工序四：贴膜组装（湿度≤30%）（1）贴样品垫：将样品垫贴在已包被好的NC膜底板28mm处；注：样品垫上边缘1mm覆盖NC膜；下边缘与底板边缘齐平。
（2）贴好后，应如下图所示；注：1、避免混淆是本工序的要点，确保指令、样品垫标示和包被好的NC膜三者之间的完全一致。