4.3.2 加菌量小于 l00cfu，供试品用量同供试品每份培养基接种的样品量。阳性对照
管培养 48～72 小时应生长良好．
4.4 生物试验中需用到的检定菌：
菌种名称 金黄色葡萄球菌
白色念珠菌
大肠埃希菌
铜绿假单胞菌
编号 CMCC(B) 26 003 CMCC(F) 98 001 CMCC(B) 44 102 CMCC(B) 10 104
生孢梭菌
CMCC(B) 64 941 培养基灵敏度检查、培养基适用性检查 需要时用
黑曲霉菌
CMCC(F) 98 003 培养基灵敏度检查、培养基适用性检查 需要时用
备注：其它需用到检定菌种的情况，具体参见相应引用标准。
4.5 检定菌悬液的制备 4.5.1 检定菌接种传代后应制备成菌悬液以方便取用. 4.5.2 菌液制备： 4.5.2.1 金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌菌悬液的制备：
4. 内容 4.1 检定菌的购买与接收 4.1.1 检定菌的购买：根据检验需要，由检验员填写购物申请单，注明：检定菌名称、
编号、购买数量、用途等，审核批准后，到省或市药检所购买。 4.1.2 检定菌的接收：检验员核对检定菌名称、编号、数量、形态特征准确无误后方
可接收。检定菌接收后，在容器外贴上标签（标签格式如下框 1）：
4.5.2 菌液制备后，在容器上贴上配制标签，填写“检定菌悬液制备记录”。 4.5.3 菌液制备后，若在常温下放置，应在 2 小时内使用；若保存在 2～8℃，可在 24
小时内使用。黑曲霉孢子悬液可保存在 2～8℃，在验证过的存储期内使用。 5. 记录保存：
品管部保管 5 年。 6.相关记录 6.1 检定菌管理记录 6.2 检定菌定期检查记录 6.3 检定菌悬液制备记录
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4.5.2.2 黑曲霉孢子悬液的制备： 接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基上，23～28℃培养 5～7 天， 加入 3～5ml 含 0.05%（ml/ml）聚山梨酯 80 的 0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。 然后，采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含 0.05%（ml/ml）聚山梨 酯 80 的 0.9%无菌氯化钠溶液制成每 1ml 含孢子数 50～100cfu 的孢子悬液。
使用目的 产品无菌试验阳性对照 培养基灵敏度检查、培养基适用性检查 培养基灵敏度检查、培养基适用性检查 生活饮用水大肠菌群检测阳性对照
培养基适用性检查
培养基灵敏度检查用 需要时用
需要时用
需要时用
枯草芽孢杆菌 CMCC(B) 63 501 培养基灵敏度检查、培养基适用性检查 需要时用
a. 接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤 培养基或营养琼脂培养基上，接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养 基中，30～35℃培养 18～24 小时； b. 接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基或改良马丁琼脂培养基上， 23～28℃培养 24～48 小时; 上述培养物用 0.9%无菌氯化钠溶液制成每 1ml 含菌数 50～100cfu（菌落形成单位） 的菌悬液；
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4.3 试验中阳性对照菌的选择
4.3.1 应根据供试品特性选择阳性对照菌：
a. 无抑菌作用及抗革兰阳性菌为主的供试品:以金黄色葡萄球菌为对照菌；
b. 抗革兰阴性菌为主的供试品以大肠埃希菌为对照菌；
c. 抗厌氧菌的供试品，以生孢梭菌为对照菌；
d. 抗霉菌的供试品，以白色念珠菌为对照菌。
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1．目的 制订检定菌管理规定，对从事操作的工作人员进行培训指导，规范操作，确保人 员安全操作及检验结果准确无误。
2．适用范围 本方法适用检定菌的保存和管理。
3. 职责 质检部对本规定的实施负责。
4.2.3 传代的方法：核对检定菌名称、编号、传代次数（5 次以内）、传代日期、传代
用培养基斜面准确无误后，按无菌操作要求，将菌种的典型菌落接种到琼脂培养
基斜面上（特殊菌种可用液体培养基）并在容器上贴上标签（标签格式如框 2）：
4.2.4 每天检查冰箱的温度并作适当的调整，使温度维持在 2～8℃，每周检查一次菌
种管的棉塞或胶塞是否松动、是否发霉、是否有杂菌生长及菌种的形态特征、干
燥状态。并填写“检定菌定期检查记录”。发现异常，应及时处理。
4.2.5 菌种传代次数应控制在 5 代内，超过 5 代或经检查不合格的应进行煮沸或高压
蒸汽灭菌，然后废弃。并及时填写“检定菌的销毁记录”。
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编制： 日期：
审核： 日期：
批准： 日期：
检定菌名称
检定菌名称
检定菌编号
检定菌编号
购买人
传代次数
购买日期
接种人
接收人
传代日期
接收（日框期 1）
（框 2）
4.1.3 购买后，置冰箱（2～8℃）中保存。
4.1.4 填写“检定菌接收记录”
4.2 检定菌的保存
4.2.1 检定菌由专人负责保管，保管员应受过专业培训，有一定的菌种保存经验。
4.2.2 检定菌需定期进行接种传代，芽孢杆菌传代周期为 3～6 个月，其它菌种为 1 个月。