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第15章-免疫学检测方法及其原理

检测
未知 抗原 抗体
检测
二、特点
1.特异性 是抗原抗体检测的基本原理
2.可逆性 3.可见性
是抗原抗体亲和度大小的体现 是形成可见复合物的关键
三、常见的抗原抗体反应种类
1.凝集反应(agglutination)
颗粒性抗原(细菌或细胞)与相应抗体结合后,在 一定条件下,出现肉眼可见的凝集物,称凝集反应 ①玻片法 直接凝集反应 ②试管法 间接凝集反应 半定量试验,如肥达反应 将可溶性抗原吸附于一种与免疫无关 的颗粒状载体表面,成为致敏颗粒 (免疫微球),再与相应抗体结合出 现凝集现象称为间接凝集反应。 定性试验,如血型鉴定
三、分子生物学分型技术
1.聚合酶链反应与SSP分型法 2.PCR-SSO分型法 3.SBT分型法
第15章 免疫ห้องสมุดไป่ตู้检测方法及其原理
学习目标
1.解释血清学反应的概念和特点 2.叙述抗原抗体检测方法及用途 3.简述免疫标记技术的原理和方法 4.简述T细胞功能检测的方法
第1节 抗原和抗体的检测
一、原理
利用抗原抗体在体外特异性结合后出现的各种现象,可 对样品中的抗原或抗体进行定性、定位和定量的检测 已知 抗体 抗原
第2节 免疫细胞及其功能的检测
一、免疫细胞数量的检测
流式细胞术
二、免疫细胞功能的检测
1.T细胞功能的检测 (1)淋巴细胞转化试验 (2)细胞毒试验 2.B细胞功能检测 B细胞增殖试验 抗体形成细胞测定
3.检测细胞免疫功能的皮肤试验 正常机体对特定抗原产生细胞免疫应答后,再用相同抗原 做皮肤试验,即出现以局部红肿为特征的迟发性超敏反应, 细胞免疫正常者呈阳性反应,而细胞免疫低下者则呈阴性 反应。
2.沉淀反应(precipitation) 可溶性抗原(血清蛋白、外毒素、组织浸出液、细菌 滤液等)与相应抗体结合,在一定条件下,形成肉眼可见的 沉淀物,称沉淀反应。
(1)单向琼脂扩散试验
(2)双向琼脂扩散试验 (3)对流免疫电泳 3.补体参与的反应(complement mediated reactions)
第3节 细胞因子的检测
1.生物活性检测 2.免疫学检测法 3.生物学检测
第4节 HLA分型技术
一、血清学分型技术
1.HLA-Ⅰ类抗原的检测 HLA-A、B、C抗原型别鉴定常规使用微量补体依赖 淋巴细胞毒试验(CDC试验)。 2.HLA-DR、DQ抗原检测
二、细胞学分型技术
LA-Dw和HLA-DP抗原的特异性可用混合淋巴细胞反 应(MLR)检测。
4.免疫标记技术(immunolabelling technique) (1)免疫荧光法(immunofluorescence technique)
(2)免疫酶技术(immunoenzymatic techinques, EIA)
图15-5 ELASA操作原理示意图
(3)放射免疫测定法(radioimmunoassay,RIA)
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