GB/T 27404-2008 实验室质量控制规范 食品理化检测 “如果检测结果用回收率进行校准，应在原始记录的结 果中明确说明并描述校准公式”
三、定量方法
2. 内标法
Ø 单点校正法 Ø 内标标准曲线法
三、定量方法
2. 内标法
内标物要满足以下要求： （a）试样中不含有该物质； （b）与被测组分性质比较接近； （c）不与试样发生化学反应； （d）出峰位置应位于被测组分附近。
ESIESI+
m/z- 179→79.9 m/z + 202→122
甜蜜素
SN/T 1948-2007 进出口食品中环己基氨
基磺酸钠的检测方法
应研究样品基质和检测器 性能引起的图谱改变
化合物 麻黄碱 伪麻黄碱
保留时间 （min）
6.9
8.0
定性离子对
166/148 166/133 166/148 166/133
•C7H6N2O2 8.50 0.72 0.45
化合物 C7H11N4
M+1 9.25
C8H6 O3 8.36
C8H8NO2 9.23
C8H11N2O 9.61
C8H12N3 9.98
二、定性（确证）方法
1. 基本原则
Ø质谱法只有在与色谱分离在线或脱机联用时才能作 为确证方法 Ø在分析仪器上的进样顺序是：空白溶剂、阴性控制 样品、要确证的样品、阳性控制样品再进样，最后是 阴性控制样品
Ø 扫描速度
ü色谱峰的数据点数目和峰宽、扫描时间有关
Ø 分辨率
质谱仪主要性能指标
质谱仪主要性能指标
分辨率
磁质谱的分辨率定义最为严格：对两个相等 强度的相邻峰，当两峰间的峰谷不大于其峰高10%时 ，则认为两峰已经分开，其分辨率：
磁质谱中，R不随m/z变化，在测定小分子时有优势 eg. R=5000，500与500.1 5000与5001
二、定性（确证）方法
质量碎片类型和识别点的关系
MS技术 低分辨质谱（LR）
LR-MSn母离子 LR-MSn子离子 高分辨质谱（HR） HR-MSn母离子 HR-MSn子离子
每种离子的识别点数 1.0 1.0 1.5 2.0 2.0 2.5
ü 每个离子计算一次 ü EI-GC-MS、CI-GC-MS作为不同的技术计算 ü 用不同反应得到的衍生物，可增加识别点数 ü 包括二级离子和多级离子 ü 可最多结合三种不同的技术确定最小识别点数
三、定量方法
Ø外标标准曲线法
空白样品加入系列浓度的标准工作液，提取后得到 系列基质标准工作液
ØGB/T 21312-2007 动物源性食品中14种喹诺酮药物残留 检测方法 液相色谱-质谱/质谱法 ØGB/T 22969-2008 奶粉和牛奶中链霉素、双氢链霉素和卡 那霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 ØGB/T 水果、蔬菜中啶虫脒残留量的测定 液相色谱-串联质 谱法 ØGB/T 21313-2007 动物源性食品中β-受体激动剂残留检测 方法 液相色谱-质谱/质谱法
三、定量方法
Ø外标标准曲线法
以空白样品提取液配制标准工作溶液
ØGB/T 23409-2009 蜂王浆中土霉素、四环素、金霉素、强力 霉素残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 ØGB/T 23408-2009 蜂蜜中大环内酯类药物残留量测定 液相色 谱-质谱/质谱法 ØGB/T 22986-2008 牛奶和奶粉中氢化泼尼松残留量的测定 液 相色谱-串联质谱法 ØGB/T 22978-2008 牛奶和奶粉中地塞米松残留量的测定 液相 色谱-串联质谱法
1-Cl 2-Cl
1-Br 2-Br
3-Br 4-Br
Beynon 表 例如： M=150
•化合物 M+2
•C6H14NOCl 0.38
M+1 8.15
M+2 0.49
•C6H14O4 0.95
6.86 1.0
•C7H2O4 0.78
7.75 1.06
•C7H4NO3 0.61
8.13 1.06
三、定量方法
a: 以纯溶剂配制标准溶液，测定的峰面积Aa b: 以空白样品的提取液配制标准溶液，测定的峰面积 Ab c: 在空白样品加入标准溶液，提取后得到基质标准溶 液，测定的峰面积Ac
绝对回收率 Ac/Aa，包含提取效率和基质效应 提取回收率 Ac/Ab，不包含基质效应 绝对回收率 = 提取回收率*绝对基质效应
“采用M+1的准分子离子的色谱峰面积做单点校正 定量”
三、定量方法
Ø单点校正法
以空白样品提取液配制标准工作溶液
ØGB/T 21320-2007 动物源食品中阿维菌素类药物残 留量的测定 液相色谱-串联质谱法
Ø“分别取适量试样溶液和相近浓度的基质添加标准工 作溶液，做单点校正”，“对标准工作液和样品溶液等 体积参插进样进行测定”
定量离子对 166/148 166/148
Fragmento r（V） 80
80
CE（V）
10 20 10 20
三、定量方法
外标法 内标法 标准加入法 基质效应
三、定量方法
1. 外标法
Ø 单点校正法 Ø 外标标准曲线法
三、定量方法
Ø 单点校正法
单点校正法实际上是利用原点作为标准曲线上的 另一个点，当方法存在系统误差时（即标准工作曲线 不通过原点），单点校正法的误差较大
内标标准曲线法
内标标准曲线定量方法
配制系列标准溶液，分别加入等量的内标物,混合后进行色谱 分析。以待测组分的浓度为横坐标，待测组分与内标物峰面积（ 或峰高）的比率为纵坐标建立标准曲线（或线性方程）
在分析未知样品时，分别加入与绘制标准曲线时等量的内标 物，用样品与内标物峰面积（或峰高）的比值，在标准曲线上查 出被测组分的浓度或用线形方程计算
±10%
±20%
> 20% to 50%
±15%
±25%
ห้องสมุดไป่ตู้
> 10% to 20%
±20%
±30%
≤ 10%
±50%
±50%
二、定性（确证）方法
Ø2002/657/EC规定：
Ø要确证指令 96/23/EC 附录I-A 组所列的物质，最少需要4 个识 别点，包括具有促合成作用和其他未允许的化合物，如二苯乙 烯类化合物及其衍生物、盐、酯等、抗甲状腺剂、甾醇、 二羟 基苯甲酸内酯如玉米赤霉醇、β-受体激动剂等 Ø要确证指令 96/23/EC附录I-B 组所列的物质，最少需要3 个识 别点，包括兽药和污染物，兽药如抗菌药、驱虫药、抗球虫药 、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类、镇静药、非甾体抗炎药等； 其他环境污染物如有机氯、有机磷、真菌毒素、染料等
一、质谱基础及相关术语
术语
质谱峰类型 Ø分子离子
• 必须是化合物谱图中质量最高的离子 • 必须是奇电子离子、符合氮规则 • 必须能通过丢失合理的中性离子，产生谱图中高质量区的重 要离子
Ø准分子离子 Ø碎片离子 Ø同位素离子
• 由于天然同位素的存在，因此在质谱图上出现M+1，M+2等 峰，由这些同位素所形成的峰称之为同位素峰
例如：要区分以下离子，分辨率要达到 CO+ 27.9949 N2+ 28.0061
ArCl+
74.9312
As+ 74.9216
举例：
üatto摩尔级的灵敏度； ü优于2 ppm的MS质量准确度 ü优于5 ppm的MS/MS质量准确度 ü线性动态范围可以达到五个数量级 ； ü质量分辨率至20,000 ü高速数据采集能力（每秒获得10张MS/MS谱图），更好地兼容超 快速液相色谱 ü宽质量范围：m/z范围从25～20,000 u
分辨率
Ø有机质谱仅要求50％峰 谷刚刚分开就算分开（这 时称为有机质谱的单位质 量分辨） Ø简化为用单峰法表示， 即测定一个峰半峰高处的 全峰宽Full width half Maximum（简写为 FWHM）
eg. FWHM=0.25 m/z=100，R=400 m/z=1000，R=4000
分辨率
三、定量方法
Ø外标标准曲线法
Ø以纯溶剂配制标准工作溶液
ØGB/T 22260-2008 饲料中甲基睾丸酮的测定 高效 液相色谱串联质谱法 ØGB/T 22955-2008 河豚鱼、鳗鱼和烤鳗中苯并咪唑 类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 ØGB/T 21324-2007 食用动物肌肉和肝脏中苯并咪唑 类药物残留量检测方法
三、定量方法
Ø单点校正法
以纯溶剂配制标准工作溶液
ØGB/T 21317-2007 动物源性食品中四环素类兽药残留量 检测方法
“根据样液中被测四环素类兽药残留的含量情况， 选定峰高相近的标准工作溶液”，“对标准工作溶液和样液 等体积参插进样测定”
ØGB/T 22147-2008 饲料中沙丁胺醇、莱克多巴胺和盐酸 克仑特罗的测定
二、定性（确证）方法
关于保留时间的讨论
ØGBT 16631-2008 高效液相色谱法通则：同样条件下重复试 验的保留数据的分散性，RSD≤3% ØJJG705-2002 液相色谱仪检定规程：定性测量重复性（6次 测量）RSD≤1.5% ØJJF（闽）1032－2010 液相色谱-质谱联用仪校准规范：定 性重复性 RSD≤2% ØJY/T 021—1996 分析型气相色谱方法通则：整机重复性 保 留时间RSD≤5％
二、定性（确证）方法
3. 质谱检测
Ø全扫描 scan Ø选择离子监测 SIM ØMS-MSn技术，如多反应监测 MRM
二、定性（确证）方法
3. 质谱检测
Ø全扫描 scan 用记录全扫描质谱图进行质谱测定时，在标准
品参考图谱中所有相对丰度>10%（分子离子、分子离 子的特征加成物、特征碎片离子、同位素离子等）的特 征离子都必须检测 Ø选择离子监测 SIM