吐温作用：阴离子表面活性剂，促进水分与叶 片表面接触。
吐温20－聚氧乙烯(20)山梨醇酐单月桂酸酯
2、材料处理操作： 正常、冻害各取3个叶片，洗净
各打取叶圆片27个以上, 放到小烧杯中用去离子水冲洗
每支试管9个叶圆片,加15ml蒸馏水
塑料纱网用去离子水漂洗一下， 放入试管(距液面1-2cm)
抽气15min(不盖塞)，取出纱网
植物组织逆境伤害程度的测定
——电导法
（-20ºC,20min冷冻材料 ） 学生进入实验室先洗试管
逆境伤害程度的测定方法：
1 紫外法： 根据渗出物质对紫外的吸收
2 电导法:
一、实验原理：
植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起 着重要的作用。在正常情况下，细胞膜对物质具有选 择透性能力。
逆境：高温、干旱、冻害、冷害、污染、酸雨
③样品测定：
将“选择”旋钮于适合的量程，测定样品。 当测定时显示值熄灭时，说明测量值超出 量程范围，应将选择旋钮置于高一档量程
按照电极上标明的电极常数，调节常数补偿 旋钮，使仪器显示值与电极所标常数一致
每测一个样品， 用去离子水冲洗 电极，滤纸吸干 电极表面水份， 再测下个样品
结果计算:（按课本）伤 害 Nhomakorabea (%)
－
结果记录：记载表老师签字
用品洗刷干净，检查摆放整齐、齐全 报告老师，经检查同意可离去
下一个实验：地点：B124#
植物组织中硝态氮含量的定量测定 (实验12)
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抽气作用？ 纱网作用? 防止抽气时叶圆片被抽出。 防止高CO2气源和口中呼出的CO2进入试 管
放置到塑料烧杯中(不盖塞子)，统一抽气10～15min。 （设置空白1只试管）
3、电导率测定：
抽气后材料室温摇动20min， 测定初电导值S1 (设一空白)
沸水浴10min杀死组织， 自来水冷却
用力摇1-2min后， 测定终电导S2
DDS-307型电导率仪操作规程
①打开预热30min
②仪器校准：
将“选择”旋钮指向“检查”档，调节常数 补偿
旋钮到“1”刻度线，调节温度补偿旋钮到 “25”刻度线，然后调节“校准”旋钮，
使仪器显示100.0μS/cm，校准完毕
测定时电极完全浸 没到溶液中。如果 试管口小，电极不 能全部浸没，可全 部试管加去离子水 至20ml
当植物受到逆境影响时，细胞膜遭到破坏，膜透 性增大，从而使细胞内的电解质外渗，如植物组织浸 入无离子水中，水的电导将因电解质的外渗而加大。
电导仪测定外液的电导度增加值，求得伤害程度。
膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关， 也与植物抗逆性的强弱有关。因此，电导法 目前已成为作物抗性栽培、育种上鉴定植物 抗逆性强弱的一个精确而实用的方法。
相对电导度（L）= (S1-空白)/(S2-空白）
冻害的伤害度（％）= Lt LCK 100 1 LCK
Lt－冻害处理的相对电导度 Lck－室温对照的相对电导度
植物组织逆境伤害程度的测定记载表
空
实 验 材
白 电 导
处 理
料值
室 温
-
20 ℃
初电导值(μS)
重复
平 均
终电导值(μS)
重复
平 均
相 对 电 导 度(L)
二、实验材料：
大叶黄杨叶片
材料处理： 正常植物叶片
-20℃冷冻胁迫处理，处理20min。
三、操作步骤程序：
1、洗刷试管： 2、材料处理 3、电导率测定 4、整理数据, 结果计算(课后算)
三、操作步骤程序：
试管刷沾洗涤液刷一遍
1、洗刷试管：
自来水3—4遍冲净
去离子水冲1遍
去离子水中含有吐温-20 （洗用会出现泡沫）