Total coliforms do not necessarily indicate recent water contamination by faecal waste, however the presence or absence of these bacteria in treated water is often used to determine whether water disinfection is working properly.
环境微生物学
Environmental Microbiology
郑州大学生物工程系 席宇
第十章 环境污染的微生物检测
主要内容
环境污染的指示微生物 污染物生物毒性的微生物学检测方法 污染物致突变的微生物学检测方法
微生物的存在离不开环境，而微生物的数量分 布和种群组成、理化性状、遗传变异等，又是 环境状况的综合而客观的反映。
生物发光是某些生物的一种生理现象，海洋生物 中更为多见。
上世纪70年代至80年代初，国外科学家首次从海 鱼体表分离和筛选出对人体无害，对环境敏感的 发光细菌，用于检测水体生物毒性，现已成为一 种简单、快速的生物毒性检测手段。
Coliforms are several different types of bacteria that exist in the intestines of warm blooded animals and are found in bodily waste, animal droppings, and naturally in soil.
因此利用微生物我们可以指示环境状况，监测 环境污染,评价污染物毒性。
第一节 环境污染的指示微生物
指示微生物（indicator microorganism）:也称 为指示菌（indicator bacteria）是指在常规的 环境监测中，用于指示环境样品污染程度，并 评价环境污染状况的具有代表性的微生物。
绝对致死剂量：Absolute Lethal Dose ,LD100 半数致死剂量：Median Lethal Dose ,LD50 最小致死剂量：Minimum Lethal Dose ,MLD 最大耐受剂量：Maximum Lethal Dose ,LD0
半数效应浓度（Median Effect Concentration,EC50）
能够影响微生物某种正常生理指标值50%所需 的待测物质浓度,有时候也指能够引起50%的受 试生物的某种效应变化的浓度.
半数抑制浓度 （Median Inhibition Concentration,IC50） 能够引起受试生物的的某种效应50%抑制的浓度。
二、原核微生物检测方法
（一）发光细菌-生物发光抑制试验
2.粪大肠菌群（fecal coliform）
指能够在44.5 ℃(44-45℃)发酵乳糖的大肠菌群， 亦称耐热性大肠菌群(thermotolerant coliform)。
粪大肠杆菌也包括同样的4个属，但以埃希氏菌 属为主。 粪大肠菌群与粪便中大肠杆菌数目直接相关，在 外界环境中不易繁殖，作为粪便污染指示菌意义 更大
我国目前水质标准中规定的大肠菌群数（cfu/L）：
饮用水≤3
游泳池水< 100
地表水 第一级≤500 第二级≤10000 第三级≤50000
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第二节 污染物生物毒性的微生物学检测方法
一、生态毒理学的基本概念 1.毒性的概念与检测
毒性（toxicity）:指外源化合物与肌体接触或进 入体内的易感部位后，能引起损害作用的相对 能力，毒性越强的物质造成损害所需的剂量和 浓度越低。
一、一般污染指示微生物
1.细菌总数（total bacteria count）:指环境中被测 样品，在一定条件下培养后所得的1ml或者1g检 样中所含的细菌菌落总数。
细菌总数主要反映环境中异养型细菌的的污染 度，也间接反映一般营养性有机物的污染程度
微生物总数的表 或cfu/g来表 示。
我国在食品、药品和化妆品都规定了检出标准(p387)
二、粪便污染指示菌
1.总大肠菌群（total coliform）也称为大肠菌群 (coliform 或者 coliform group)。
大肠菌群是一群需氧和兼性厌氧的，能在37℃培 养24h内使乳糖发酵产酸产气的革兰氏阴性无芽 胞杆菌，包括埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、肠杆 菌属、克雷伯氏菌属等。
Coliform bacteria are described and grouped, based on their common origin or characteristics, as either total or fecal coliforms.
The group of total coliforms includes faecal coliform bacteria, such as Escherichia coli (E.coli), as well as other types of coliform bacteria that can survive in soil and vegetation.
毒性的检测一般有动物试验和微生物试验
当我们以微生物为检测手段时多称为生物毒 性（biotoxicity）
微生物检测方法的原理是选择微生物的某一项或 几项生理指标作为指征，根据待测物质影响或者 抑制这些指征的程度来判断毒性的强度。
2.毒性试验的常用参数
致死剂量或致死浓度：Lethal Dose，LD或者 Lethal Concentration，LC.
cfu(colony forming unit)是指单位体积、单
位表面积或单位质量检样中菌落形成单位。
pfu(plaque formation unit ):空斑形成单位，用
于病毒、蛭弧菌的效价测定。
2.霉菌和酵母菌总数(fungi and yeast count)
指环境中被测样品经过处理，在一定条件下培养 后所得的1ml或者1g检样中所含的霉菌和酵母菌 菌落总数。 检测霉菌和酵母菌，是从另一生物学层次，反 映环境的一般污染。