属于可见吸收光度法的的范畴。 分光光度法：使用分光光度计进行吸收光谱分析的方法。
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紫外-可见波长范围：
远紫外光区：10-200 nm； 近紫外光区：200-400 nm； 可见光区：400-780 nm。
紫外可见吸收光谱法特点：
仪器较简单，价格较便宜； 分析操作简单； 分析速度较快。
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3. 红移与蓝移、增色与减色
λmax向长波方向移动称为红移，向短波方向移动称为蓝移 (或紫移)；
吸收强度即摩尔吸光系数ε增大或减小的现象分别称为增 色效应或减色效应。
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紫外-可见吸收 光谱
1. 基本原理 2. 基本组成 3. 紫外-可见分光光度计类型
紫外-可见分光 光度计
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2. 生色基团与助色基团
生色基团： 凡是能导致化合物在紫外可见光区产生吸收 的基团，不论是否显出颜色都称为生色基团。含有π键的 不饱和基团属于生色基团。简单的生色基团由双键、苯环 或叁键体系组成。
助色团： 有一些含有n电子的基团(如-OH、-OR、-NH２、 -NHR、-X等)，它们本身没有生色功能(不能吸收λ> 200 nm的光)，但当它们与生色基团相连时，就会发生n-π共轭 作用，增强生色基团的生色能力(吸收波长向长波方向移动 且吸收强度增加)，这样的基团称为助色基团。
可见光：是电磁波谱中人眼可以感知的部分，可见光 谱没有精确的范围；一般人的眼睛可以感知的电磁波的波 长在400到800纳米之间，但还有一些人能够感知到波长大 约在380到780纳米之间的电磁波。
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2. 定义
紫外-可见吸收光谱法：根据溶液中物质的分子或离子 对紫外和可见光谱区辐射能的吸收来研究物质的组成和结 构的方法，包括比色分析法与分光光度法。 比色分析法：比较有色溶液深浅来确定物质含量的方法，
通常所说的紫外-可见分光光度法，实际上是指近紫外可见分光光度法(200-780 nm) 。
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3.1 电子跃迁与分子吸收光谱
物质分子内部三种运动形式：电子相对于原子核的运动 ；原子核在其平衡位置附近的相对振动；分子本身绕其 重心的转动。
分子具有三种不同能级：电子能级、振动能级和转动能 级。
三种能级都是量子化的，且各自具有相应的能量。 分子的内能：电子能量Ee 、振动能量Ev 、转动能量Er。
紫外-可见光谱
主讲人
1.吸收 2.漫反射 3.荧光
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紫外-可见吸收 光谱
1. 紫外线、可见光 2. 定义 3. 紫外吸收光谱的产生
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1. 紫外线、可见光
紫外线：是电磁波谱中波长从10nm到400nm辐射的总 称，不能引起人们的视觉。1801年德国物理学家里特发现 在日光光谱的紫端外侧一段能够使含有溴化银的照相底片 感光，因而发现了紫外线的存在。紫外线可以用来灭菌过 多的紫外线进入体内会对人体造成皮肤癌。
p
在远紫外区；
s
吸收波长λ<150 nm；
例：甲烷的λmax为125 nm , 乙烷λmax为135 nm。只能被真 空紫外分光光度计检测到。
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1.2 n→σ＊跃迁
所需能量较大（<σ→σ＊跃迁)； 吸收波长为150～250 nm，大部分在远紫外区，近紫外区
不易观察到； 含非键合电子（n电子）的饱和烃衍生物(含N、O、S和卤
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1. 基本原理
朗伯-比尔定律
要当一束平行单色光通过含 有吸光物质的稀溶液时，溶 液的吸光度与 吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比，即
A=cbε
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2. 基本组成
光源
单色器
样品室
检测器
显示
2.1 光源
要求：在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱 具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。
素等杂原子)均呈现n→σ* 跃迁。
化合物 H2O
CH3OH CH3CL
CH3I CH3NH2
max（nm） 167 184 173 258 215
max 1480 150 200 365 600
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1.3 π→π＊跃迁
所需能量较小； 吸收波长处于远紫外区的近紫外端或近紫外区； 摩尔吸收系数εmax一般在104 L·mol-1·cm-1以上，属
当外层电子吸收紫外或可见辐射后，就从基态（成键轨 道）向激发态（反键轨道）跃迁。主要有四种跃迁，所需能 量ΔE大小顺序为：n→π＊ < π→π＊ < n→σ＊ < σ→σ＊
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1.1 σ→σ＊跃迁
所需能量最大；σ电子只有吸
s*
收远紫外光的能量才能发生跃
p*
迁；
E
n
饱和烷烃的分子吸收光谱出现
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紫外-可见吸收 光谱
1. 电子跃迁类型 2. 生色基团与助色基团 3. 红移与蓝移-增色与减色
有机化合物紫外-可 见吸收光谱
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1. 电子跃迁类型
有机化合物的紫外-可见吸收光谱是三种价电子跃迁的
结果：σ键电子、π键电子、n键电子。
s*
HC O n
s
E
Hp
p*
n
p和烃、共轭烯烃和芳香烃类可发生此跃迁。如
乙烯π→π*跃迁的λ为162 nm， εmax为: 1×104 L·mol-1·cm-1。
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1.4 n→π＊跃迁
所需能量小； 吸收波长<200nm； 吸收峰的吸收系数ε 很小，一般在10~100。 分子中有孤对电子和π键同时存在可发生此跃迁。
可见光区：钨灯,其辐射波 长范围在320～2500 nm
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分子的各能级：
转动能级间的能量差：0.005~0.05 eV，跃迁产生吸收 光谱位于远红外区（远红外光谱或分子转动光谱）；
振动能级的能量差：0.05~1 eV，跃迁产生的吸收光谱 位于红外区（红外光谱或分子振动光谱）；
电子能级的能量差较大，约为1~20 eV。电子跃迁产生 的吸收光谱在紫外-可见光区(紫外-可见光谱或分子的 电子光谱)。
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3. 紫外-可见吸收光谱的产生
紫外-可见吸收光谱：分子价电子能级跃迁（伴随着 振动能级和转动能级跃迁）。
由于O2、N2、CO2、H2O等在真空紫外区(60-200 nm) 均有吸收，测定这一范围光谱时须将光学系统抽真空并充 充入惰性气体。所以真空紫外分光光度计非常昂贵，在实 际应用中受到一定的限制。