《生物化学实验》课程期末考试试卷（第1卷）考试专业班级考试形式考试时间120分钟考试学期考试类型命题教师李峰李荣一、名词解释题（每题4分，共24分）1、解链温度2、层析3、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳4、复性5、蛋白质沉淀6、双缩脲反应二、填空题（每空1分，共20分）1、A、B、C、D、E五种氨基酸，其pI由低到高，设溶液pH在C的等电点，则A带，B带，C带，D带，E带。
2、测定蛋白质浓度的方法主要有（）、（）、（）。
3、双键DNA热变性后，或在pH2以下，或在pH12以上时，其OD260（），同样条件下，单键DNA的OD260（）。
4、硝酸纤维素膜可结合（）链核酸。
将RNA变性后转移到硝酸纤维素膜上再进行杂交，称（）印迹法。
5、变性DNA的复性与许多因素有关，包括（）、（）、（）、（）、（）。
6、利用蛋白质不能通过半透膜的特性，使它和其他小分子物质分开的方法有（）和（）等。
7、核酸在260nm附近有强吸收，这是由于（）。
8、在分光光度计的使用或检定中，（）的准确度是衡量仪器工作性能的一项重要指标，它的准确程度直接关系到所测数据的可信性及科学性。
（）的误差越大，测试结果的可信性越差,从而影响到测试数据的准确性。
三、选择（每题2分，共16分）1、丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制作用属于( )A 不可逆B 竞争性C 非竞争性2、羟化酶的辅酶是（）A 硫胺素B 核黄素C 吡哆素D维生素C3、下列哪组反应是错误的？（）A、葡萄糖——Molish反应B、胆固醇——Libermann-Burchard反应C、色氨酸——坂口（Sakaguchi）反应D、氨基酸——茚三酮反应4、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（）A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同B、分子大小不同C、分子极性不同D、溶解度不同5、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。
硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查？（）A、茚三酮试剂B、奈氏试剂C、双缩脲试剂D、Folin-酚试剂6、酶的活化和去活化循环中，酶的磷酸化和去磷酸化位点通常在酶的哪一种氨基酸残基上？（）A、天冬氨酸B、脯氨酸C、赖氨酸D、丝氨酸7、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收？（）A、215nmB、260nmC、280nmD、340nm8、在基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒以便于重组和筛选。
已知有些不同的限制酶也可能会切出相同的黏性末端限制酶I的识别序列和切点是一G ↓GATCC 一，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是一↓GATC一。
根据图示判断下列操作正确的是（）A、质粒用限制酶I切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割 B．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶I切割 C．目的基因和质粒均用限制酶I切割 D．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割四、简答题：（每题8分，共40分）1、紫外分光光度法测定核酸含量的原理。
2、蛋白质变性与沉淀的关系。
3、试述凝胶成像系统操作时应注意的事项。
4、许多生物材料在提取核酸时，都会遇到多糖的污染问题，具体表现为有机溶剂沉淀时，沉淀很多，但复溶时，大量沉淀不溶，电泳观察时核酸含量很低。
试述克服多糖污染可采用的办法。
5、常用移液器的规格有哪些？如何正确使用移液器？《生物化学实验》课程期末考试试卷（第2卷）考试专业班级考试形式考试时间120分钟考试学期考试类型命题教师李峰李荣一、名词解释题（每题4分，共24分）1、等电点2、解链温度3、透析4、DNA变性5、同工酶6、黄色反应二、填空题（每空1分，共20分）1、酶的专一性可分为：______________、________________和___________ 三类，2、核黄素和硫胺素在体内形成的辅酶分别是_____________和____________ 。
缺乏维生素C引起的疾病是_____________。
3、通常可用紫外分光光度法测定蛋白质的含量，这是因为蛋白质分子中的（）、（）、（）三种氨基酸的共轭双键有紫外吸收能力。
4、变性DNA的复性与许多因素有关，包括（）、（）、（）、（）、（）。
5、常用二苯胺法测定（）含量，用苔黑酚法测定（）含量。
6、使用离心机时，如有噪音或机身振动时，应立即（），并且离心管须对称放入套管中，防止机身振动，若只有一支样品管，则另外一支要用（）代替。
7、在分光光度计的使用或检定中，（）的准确度是衡量仪器工作性能的一项重要指标，它的准确程度直接关系到所测数据的可信性及科学性。
（）的误差越大，测试结果的可信性越差,从而影响到测试数据的准确性。
三、选择（每题2分，共16分）1、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收？（）A、215nmB、260nmC、280nmD、340nm2、Sanger试剂是（）A、苯异硫氰酸B、2，4-二硝基氟苯C、丹磺酰氯D、 -巯基乙醇3 、下列哪组反应是错误的？（）A、葡萄糖——Molish反应B、胆固醇——Libermann-Burchard反应C、色氨酸——坂口（Sakaguchi）反应D、氨基酸——茚三酮反应4、下列蛋白质组分中，哪一种在280nm具有最大的光吸收？（）A、色氨酸的吲哚基B、酪氨酸的酚环C、苯丙氨酸的苯环D、半胱氨酸的硫原子5、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（）A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同B、分子大小不同C、分子极性不同D、溶解度不同6、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。
硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查？（）A、茚三酮试剂B、奈氏试剂C、双缩脲试剂D、Folin-酚试剂7、磺胺类药物是下列哪种酶的抑制剂（）A二氢叶酸合成酶 B 四氢叶酸合成酶 C 一碳基团转移酶8、在基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒以便于重组和筛选。
已知有些不同的限制酶也可能会切出相同的黏性末端限制酶I的识别序列和切点是一G ↓GATCC 一，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是一↓GATC一。
根据图示判断下列操作正确的是（）A、质粒用限制酶I切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割 B．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶I切割 C．目的基因和质粒均用限制酶I切割 D．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割四、简答题：（每题8分，共40分）1、若样品中含有蛋白质和核苷酸等杂质，如何排除干扰？2、体液血糖测定有哪些方法？3、DNA在电场中的迁移率取决于哪些因素？4、琼脂糖凝胶有哪些注意事项？5、你了解的离心机有哪些种类？如何正确使用离心机？《生物化学实验》课程期末考试试卷（第3卷）考试专业班级考试形式考试时间120分钟考试学期考试类型命题教师李峰李荣一、名词解释题（每题4分，共24分）1、解链温度2、蛋白质变性3、退火4、竞争性抑制5、增色效应6、不可逆沉淀二、填空题（每空1分，共20分）1、A、B、C、D、E五种氨基酸，其pI由低到高，设溶液pH在C的等电点，则A带，B带，C带，D带，E带。
2、测定蛋白质浓度的方法主要有（）、（）、（）。
4、非竞争性抑制剂的动力学特点是：Km值_________，Vmax_________ 。
5、双键DNA热变性后，或在pH2以下，或在pH12以上时，其OD260（），同样条件下，单键DNA的OD260（）。
7、缺乏V A引起的病是_______________；缺乏V D引起的病是_____________；缺乏Vc引起的病是_____________；缺乏VB11引起的病是___________。
8、测定酶活力时，底物浓度应________________________、反应温度应选在____________、反应pH应选在____________、反应时间应在反应的______期进行。
三、选择（每题2分，共16分）1、丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制作用属于( )A 不可逆B 竞争性C 非竞争性2、羟化酶的辅酶是（）A 硫胺素B 核黄素C 吡哆素D维生素C3、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。
硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查？（）A、茚三酮试剂B、奈氏试剂C、双缩脲试剂D、Folin-酚试剂4、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（）A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同B、分子大小不同C、分子极性不同D、溶解度不同5、人体内不能合成的脂肪酸是（）A.油酸B.亚油酸C.硬脂酸D.软脂酸6、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键？（）A、双缩脲反应B、凯氏定氮C、紫外吸收D、羧肽酶法7、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键？（）A、双缩脲反应B、凯氏定氮C、紫外吸收D、羧肽酶法8、在基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒以便于重组和筛选。
已知有些不同的限制酶也可能会切出相同的黏性末端限制酶I的识别序列和切点是一G ↓GATCC 一，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是一↓GATC一。
根据图示判断下列操作正确的是（）A、质粒用限制酶I切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割 B．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶I切割 C．目的基因和质粒均用限制酶I切割 D．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割四、简答题：（每题8分，共40分）1、考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的原理是什么？2、何谓Rf值？影响Rf值的主要因素是什么？3、蛋白质分离和纯化的一般方法？4、如何正确选择核酸电泳指示剂？5、试述琼脂糖凝胶电泳分离、鉴定核酸分子的原理及简要操作步骤。