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（三）收获
接种后在温箱培养24 ~ 48小时即可收获。 收获前应将鸡胚置4度冰箱冷藏6小时或过夜，以免 收获时血管破裂。 收获前用碘酒、酒精消毒蛋壳，用镊子去除蛋壳和 壳膜，撕破绒毛尿囊膜而不破羊膜。 用灭菌镊子轻轻按住胚胎，以灭菌吸管或注射器吸 取尿囊液，装入灭菌容器内。多时可收集5 ~ 8ml/ 枚鸡胚。 如有血细胞应以2000r/min离心15min, 取上清液做 血凝试验。

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实验二
病毒的 器材准备
实验内容和方法
思考题
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一、目的要求
掌握病毒的鸡胚接种。 掌握鸡胚增殖病毒后的收获方法。 掌握病毒血凝价的测定及判定。

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二、基本原理
鸡胚是正在发育的活的机体，组织分化 程度低，细胞代谢旺盛，适于许多人类和 动物病毒的生长增殖；
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（一）接种前的准备
1、鸡胚的准备 选择9～11日龄的鸡胚，在照蛋时以铅笔勾划 出气室边界、胚胎及主要血管位置，在胚胎 对侧距气室边界上或下约5mm处避开血管作 标记，作为接种部位。 用2 ～ 5%碘酊对接种部位进行消毒，用75% 酒精再擦一遍。
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2、病毒接种材料的准备 要分离培养的病毒材料应是无菌的，因此为 达到材料无菌的目的，可在每ml接种物质中 加青霉素和链霉素各100~500IU，置室温中1 小时或冰箱中12~24小时处理。或经滤器除 菌。
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（二） 接种
1、钻孔 将选好的鸡胚气室向上置于蛋架上，在所标 记部位用经75%酒精棉球消毒的打孔器钻一 个小孔。 注意：恰好使蛋壳打通而又不伤及壳膜。
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2、绒毛尿囊腔内注射 ①用1ml注射器抽取接种物，45°角斜刺入 小孔1.5cm达尿囊腔内，注入接种物 0.1 ~ 0.2mL。 ②在距气室底边0.5cm处打一小孔，由此孔 进针1~1.5cm注射接种物0.1~ 0.2mL。


对接种的病毒不产生抗体。
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三、器材准备
鸡胚：9～11日龄非免疫ND疫苗种鸡所产的
白壳鸡胚。 接种材料：新城疫LaSota株。 器械：孵卵器、照蛋器、蛋架、打孔器、铅 笔、 1ml注射器、3%碘酊、75%酒精棉球、 蜡烛、剪刀、镊子、灭菌的离心管、平皿等。
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四、实验内容和方法
（一）接种前的准备 （二）接种 （三）收获

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五、思考题
1、用鸡胚培养病毒,在选用鸡胚时应注意什么问题? 2、以鸡胚尿囊腔接种培养病毒的操作过程中应注 意什么问题？ 3、鸡胚接种含有新城疫病毒的病料后，其死亡胚 体的有哪些病变特征，若接种48h后胚体未死，原 因是什么？ 4、为什么接种新城疫病毒后24小时内死亡的鸡胚 要丢弃，而不用于收获病毒？ 5、孵化鸡胚的过程中，为什么要翻蛋？ 6、用鸡胚增殖病毒时有哪些优缺点？
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禽胚结构
shell air pocket
outer shell membrane
allantois embryo amnion yolk sac chorion albumen
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尿囊腔接种法
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3、封孔、孵育 注射接种物后用融化的石蜡或消毒胶布封闭 注射小孔。 将鸡胚气室朝上置于37℃温箱中孵育。 每天翻蛋两次，照视一次，24小时内死亡的 舍去。