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铁皮石斛种子的组织培养

的,想做的,告诉我,我教你做!简单! 就这样开始了暗黑培养,准备培养三天,温度为 25 度±2 度。今天到此结束,看以后
的生长情况,再续,O(∩_∩)O~,不要走,不要走啊,求求你们不要走!还有续集!O(∩_ ∩)O 哈哈~
无菌萌发培养基:1/2ms 培养基+蔗糖 25g+琼脂 5g(灭完菌接种的时候才发现,有点 硬了!)
首先,我没有蒸馏水,用的就是大桶水,(态度不严谨啊 O(∩_∩)O 哈哈~)把琼脂 5g, 1/2ms 培 养 基 2.14g , 蔗 糖 25g 一 股 脑 的 倒 入 800ml 的 冷 水 里
(注:个人认为,琼脂在开水的时候倒入容易结块,不容易溶解,当然用温水是好的,但何 必 呢 , 所 以 先 倒 入 冷 水 , 然 后 再 加 热 , 大 家 以 为 对 不 对 啊 ),
这时发现,种子有一 部分好像要变质,妈呀,费了牛劲怎么会是这样。
在酒精灯旁边打开培养瓶,然后用烧过的镊子,轻轻的在种子上一捏,一小团种子就 夹起来了,由于培养瓶里在灭菌的时候,会有蒸汽此时已凝结成水,瓶子里的水不要留的太 多,但也不能不要,留一点,
把瓶子倾斜,然后把镊子 上的种子轻轻的放入培养基上的不点水里,种子一下子就散开啦。
然后轻轻晃动培养 瓶,使那少量的水里的种子,慢慢的附着在培养基上,然后在酒精灯上轻轻的灼烧瓶口和瓶 盖 , 盖 上 就 完 工 了 , 简 单 吧 。 就 这 样 , 一 个 两 个 。。。。 二 十 个 ,
终于做完了,共耗时 1 小时。 把培养瓶拿出来,放入我自己做的恒温恒湿箱中,O(∩_∩)O~,恒温箱有喜欢动手
拌............................ 好漫长啊!
大概 10 分钟的样子,终于好了,拿下来,开始测量 ph 值,然后慢慢的一滴一滴的加
入氢氧化钠溶液边搅拌边测量,5.8!
好了,就是他了,慢慢的再搅拌一会儿,再测量,还行,没变化,就是 5.8.开始分瓶啦,我 用 的 是 我 店 铺 里 卖 的 480ml 的 瓶 子 , 慢 慢 的 分 装 ,
灭完菌的培养瓶在超净台上呆了两天,不是看灭菌是否彻底,而是这两天又懒啦, (*^__^*) 嘻嘻……,不行,早晚要干,何不早去?干! 从冰箱里把种子拿出来,放到超净台上,还有手术刀,镊子,酒精灯,接种盘,次氯酸钠。。。。。。。
好多,都放到超净台上,

开紫外线灯照射 20 分钟,然后打开风机开始送风,大概 20 分钟后就开始接种了。 把 种 子 放 入 小 烧 杯 中 , 倒 入 75% 的 酒 精 灭 菌 1 分 钟
轻轻的搅拌,让培养基和蔗糖完全溶解,然后定容,注意,定容的时候要定容到 1100ml, 因为我们在加热的时候还有高压灭菌的时候,会有大量的水蒸气出现,多出的 100ml 是减 少这部分的损失。
然后测量一下 ph 值,大概在 3.4(当时记录了,但后来不知道弄哪里去了,也可能是 4.2), 先不管他,加热溶解!把烧杯放到液化气灶上开最小火,把烧杯放上,然后开始加热边搅
装了 20 瓶,接着又开四瓶,
就这样,一批一批又一批的
灭,那时间\(^o^)/~好慢!都完事之后,还有一件事情没做,就是无菌水!把大桶水倒入培 养瓶中,3/4 瓶水,盛了三瓶,然后又开始高压灭菌,这次的时间跟温度比灭培养基时候要 长,要高,为什么呢,因为瓶子里的水很多,怕灭菌不彻底呗!风风雨雨的一天又过去了。。。。
然 后 倒 出 酒 精 , 倒 入 无 菌 水 冲 洗 三 次 , 然 后 倒 入 10% 的 次 氯 酸 钠 灭 菌 10 分 钟
然后再用无菌水冲洗 5 遍,灭菌完成 小插曲,在灭菌的过程中发现我买的种子已经爆口了,我晕!我狂晕!不知道怎么样啊,
先凑合种吧。据说用 10%次氯酸钠爆口的也没啥问题,不知道真的假的。 灭菌完成,开始动刀!轻轻用镊子夹住种子,用手术刀把两端切掉,然后用刀纵切一刀, 变成两半,黄色的种子就露出来了,
铁皮石斛种子的组织培养 考虑了好久,在网上买了一粒种子,不是不舍得,就是不知道是不是真的铁皮石斛,终 于下手了,管他呢,至少是石斛吧,O(∩_∩)O~ 种子是买回来了,又犯懒了,本人最大的毛病就是思想很勤快,要是干实事,很懒,我 是没见过我这么懒的人。懒也得做啊,种子再开口了怎么办?狠狠心开始干! 准备:首先是配制培养基,查了下资料,种子的无菌萌发培养基为 1/2ms 培养基,蔗糖 20g,我稍微做了下调整,培养基 1/2ms,蔗糖由 20g 变成 25,琼脂为 5g。
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