细胞化学染色
快速、准确、科学、 公正、严谨
细胞化学染色
定义
快速、准确、科学、 公正、严谨
细胞化学染色是细胞学和化学相结合而形成 的一门科学，是以细胞形态学为基础，结合 运用化学反应的原理对血细胞内的各种化学 成分(如酶类、酯类、铁、蛋白质、核酸等) 作定性、定位、半定量分析的方法。
基本要求
快速、准确、科学、 公正、严谨
三、酯 酶 染 色
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根据 酯酶 特异 性高 低分
为
特异性酯酶(氯乙酸AS-D萘酚酯酶)
酸性酯酶(酸性α- 醋酸萘酚酯酶 )
pH值不同
非特异性酯酶
α- 醋酸萘酚酯酶 中性酯酶
醋酸AS-D萘酚酯酶
碱性酯酶( α-丁酸萘酚酯酶 )
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非特异性酯酶
非特异性酯酶是属水解酶, 由较多的同工酶所组成，在不同的 细胞内存在有不同的同工酶。电泳分析证明人血细胞含有九种 酯酶同工酶，如中性粒细胞含同工酶1、2、7、9；单核细胞和 血小板含有同工酶4、5。淋巴细胞含有同工酶1和6等。其中同 工酶4、5 能被NaF所抑制，所以对染色呈阳性的细胞作NaF抑制 试验可鉴别中性粒细胞和单核细胞。
一、过氧化物酶（POX）染色
【临床意义】
1.帮助鉴别急性白血病的类型 （3）急性单核细胞白血病有时需与组织细胞白血病、 恶性组织细胞病相鉴别，异常组织细胞的过氧化物酶呈 阴性，而白血病性幼单核细胞和单核细胞呈弱阳性。
三、酯 酶 染 色
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根据 酯酶 特异 性高 低分
为
特异性酯酶(氯乙酸AS-D萘酚酯酶)
• 原位显示细胞成分和结构 • 反应产物应是有色沉淀物，具有一定的稳定性
基本步骤
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固定 显示
复染
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干燥固定
固
蒸汽固定
物理法
化学法
火焰固定
定
液体固定
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显示金属 沉淀 法源自雪夫 反应偶氮 偶联 法普鲁 士蓝 反应
联苯 胺法
胞就可见强阳性反应。且酶的活性不随细胞分化成熟 而增强。此酶的阳性产物比POX更为特异。
• 单核细胞、淋巴细胞、巨核细胞等均为阴性，所以在 临床上将AS-DCE染色作为是粒细胞的标志性酶。
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（一）氯乙酸AS-D萘酚酯酶(NAS-DCE)染色
【原理】
酯酶 氯乙酸AS-D萘酚
酸性酯酶(酸性α- 醋酸萘酚酯酶 )
pH值不同
非特异性酯酶
α- 醋酸萘酚酯酶 中性酯酶
醋酸AS-D萘酚酯酶
碱性酯酶( α-丁酸萘酚酯酶 )
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氯化醋酸AS-D萘酚酯酶染色 （AS–DCE）
• 酶主要分布在粒细胞和肥大细胞中。 • 从原粒细胞后期即可见有弱阳性反应，而到早幼粒细
【正常血细胞的染色反应】
1.粒细胞系统 • 随着细胞成熟的程度而逐渐增强，中性分叶
核粒细胞为强阳性。 • 嗜酸性粒细胞阳性程度最强，其阳性颗粒比
中性粒细胞粗大，有折光。
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一、过氧化物酶（POX）染色
【正常血细胞的染色反应】
1.粒细胞系统 2.单核细胞系统 原始单核细胞呈阴性，幼稚
偶联
AS-D萘酚
重氮盐
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（一）氯乙酸AS-D萘酚酯酶(NAS-DCE)染色
【正常血细胞的染色反应 】
（1）粒系：分化差的原始粒细胞为阴性，分化好的为阳性 • 早幼粒细胞至成熟粒细胞均为阳性 • 嗜酸性粒细胞呈阴性或弱阳性，嗜碱性粒细胞呈阳性 （2）其他细胞主要为阴性反应
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（一）氯乙酸AS-D萘酚酯酶(NAS-DCE)染色
【临床意义 】
• 本染色法主要用于鉴别急性白血病类型。 • 1.急性粒细胞白血病和急性单核细胞白血病的鉴别
意义大。
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急性粒细胞白血病（M2a）氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色 1.原始粒细胞，呈弱阳性；2.幼稚粒细胞，呈强阳性；3.中性杆状核粒细胞，呈强阳性
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急性早幼粒细胞白血病的POX染色 １.原始红细胞，呈阴性；其他早幼粒细胞均呈强阳性
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急性单核细胞白血病的POX染色 1.中性成熟粒细胞，呈强阳性；2.原始单核细胞，呈阳性；
3.原始单核细胞，呈弱阳性；其他原幼单核细胞呈阴性
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急性淋巴细胞白血病的POX染色 1.中性成熟粒细胞，呈强阳性；其他原始淋巴细胞均呈阴性
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一、过氧化物酶（POX）染色
【临床意义】
1.帮助鉴别急性白血病的类型 （2）急性早幼粒细胞白血病有时需与急性单核细胞白血
病鉴别，如果白血病细胞呈过氧化物酶强阳性，应确定 为急性早幼粒细胞白血病。
成熟中性 粒细胞过 氧化物酶 活性的变 化
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一、过氧化物酶（POX）染色
【临床意义】
1.帮助鉴别急性白血病的类型 （1）POX染色是鉴别急性淋巴细胞白血病和 急性粒细胞白血病的重要指标。
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急性粒细胞白血病（M2a) 的POX染色 原始粒细胞均呈阳性
探讨发病机制
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过氧化物酶染色 苏丹黑染色 酯酶染色 过碘酸-雪夫反应 中性粒细胞碱性磷酸酶染色 酸性磷酸酶染色
铁染色
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一、过氧化物酶（POX）染色
【原理】
二氨基联苯胺法
H2O2
POX
新生态氧
二氨基 联苯胺
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一、过氧化物酶（POX）染色
及成熟单核细胞多呈弱阳性，其颗粒细少稀 疏，分布不均。
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1.中性成熟粒细胞，呈强阳性；2.晚幼红细胞，呈阴性； 3.单核细胞，呈弱阳性；4.浆细胞，呈阴性
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一、过氧化物酶（POX）染色
帮助鉴 别急性 白血病 的类型
临床意义
是辅助判断急性白 血病细胞类型的首选、 最重要的细胞化学染色
复染
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目的： 使各种细胞能显示出来便于观察。 选择复染液的颜色应与有色沉淀的颜色有明显的对 比度，即能使细胞结构显示又能清楚地看出细胞化 学染色结果。
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辅助判断急性白血病的细胞类型
临
床
辅助血液系统等疾病的诊断和鉴别诊断
应
观察疾病疗效和预后
用
