必做
药物在体内的代谢反应有哪些类型？
必做
3
常用生物样本有哪些？如何采集、储存。
答：常用生物样本有：血样（血浆、血清和全血）、尿样、唾液。
采集与储存：血浆——全血加抗凝剂，离心，取上清液；血清——全血离心，取上清液。采血后必须尽快离心分离出血浆或血清，置－20℃以下冷冻保存。尿样——收集服药后一定时间内尿样，记录体积，混合均匀后取一定量,测定尿中药物浓度，计算一定时间内尿中药物的累积量。唾液——漱口15分钟后收集口内自然流出或经舌在口内搅动后流出的混合唾液，离心后取上清液。样本采集后不能及时测定，可置4℃冷藏，若放置时间较长，则需-20℃～-80℃冷冻保存。
6
免疫分析的基本原理、基本条件是什么？
答：基本原理：即抗原-抗体结合反应。在反应体系中，当抗体（Ab）量一定时，抗原（Ag）与标记抗原（Ag*）就与抗体发生竞争性结合反应，生成的[Ag*-Ab]与[Ag]的量呈负相关，这种特异的竞争性抑制的数量关系是免疫分析的定量基础。基本条件是：特异性抗体、标记抗原、未标记抗原（即标准品）。
必做
2
药物进入体内后一般需经历哪些物理、化学变化？这些变化与药理作用的关系如何？
答：物理变化——系指药物与生物大分子如血浆蛋白的结合反应。
化学变化——系指药物的代谢反应，包括一相代谢（氧化、还原、水解反应）和二相代谢反应（各种结合反应）
由于药物的作用强度与血液中游离药物的浓度密切相关，同时药物经代谢后活性发生了变化，故药物的物理、化学变化与药理作用密切有关。
色谱分析法——包括HPLC, GC, LC/MS, GC/MS等。方法优点是具有分离分析功能，是评价其它方法的参比方法。
必做
5
紫外法消除干扰的方法有哪些？说明原理和应用条件。P82
必做
1.差示分光光度法（1）利用最大吸收波长进行测定
（2）利用最小吸收波长处的增色效应进行测定
（3）利用最大吸收与最小吸收之差（即振幅）进行测定
以纯品进行测定——选择最佳测定条件（线性，灵敏度、pH、检测波长等）。空白样品测定——按设定的方法进行前处理和测定，考察空白值的大小和干扰程度。
以水代替空白样品，添加标准品后测定，以获得提取回收率的大致情况，从而对前处理中各步操作条件进行选择。
空白样品中添加标准后测定——求样品回收率，建立标准曲线等。
必做
体内药物分析方法有哪些？各有何优缺点？
答：体内药物分析方法可分为三大类：
光谱法——包括比色法、紫外法和荧光法。方法优点是操作简便、快速，所需设备简单。其缺点是不具备分离功能，选择性较差，对前处理要求高；比色法和紫外法灵敏度较低。
免疫法——包括放射免疫、酶免疫、荧光免疫等。方法优点是灵敏、专属，操作简便、快速，对样品预处理要求不高。其缺点是精密度较差，需要试剂盒和专属仪器。
《体内药物分析》课程作业
一、问答题
第X章
题目
要求
1
什么是体内药物分析？与常规药物分析相比，体内药物分析有哪些特点？
答：体内药物分析旨在通过各种分析手段，了解药物在体内的数量与质量变化。获得药物代谢动力学的各种参数和信息，从药品生产、临床医疗、实验研究等方面对所研究药物作出估计和评价。与常规药物分析相比，体内药物分析具有干扰杂质多、样品量少且浓度变化大，不能再度获得完全相同大等特点。
必做
影响液-液提取和液-固提取效率的因素分别有哪些？
必做
影响液-液提取的因素有:水相pH提取溶剂离子强度
影响液-固提取的主要因素有:固定相 洗脱液流速 样品装载量
4
评价分析方法的效能指标包括哪些项目？如何求算？
必做
试述体内药物分析方法设定的一般步骤。
答：首先进行文献查阅，设计方案，然后通过实验加以验证。一般实验步骤如下：
体内实样测定——根据实样测定结果来判断设定的方法是否合理、可行。
以上步骤需要反复试验以获得最佳实验条件。
必做
阐述定量限与检测限的定义、区别及表示方法。
答：定量限——即定量下限（LLOQ），表示药物可定量测定的最低量，须符合一定精密度和准确度要求，常以标准曲线最低浓度点来确定，或以 S/N=5～10确定。检测限（LOD）——表示药物的最低可测度，不必定量，通常以信噪比（S/N）=2~3时被测药物的绝对量表示；两者的区别主要在于是否有定量要求：LOD没有定量要求，而LLOQ则有定量要求。
必做
常用免疫分析有哪几种？相互间区别在哪些方面？
答：常用免疫分析有放射免疫法、酶免疫法、荧光免疫法、化学发光免疫法等，它们的主要区别在于标记物不同，由此采用的测定方法也不同。
2.双波长测定法
如何进行激发光谱和荧光光谱的测定？P91页
必做
荧光物质吸收紫外光后被激发出荧光，如果将激发荧光的光源用单色器使其分光后，测定在每一波长的激发光照射下，物质所发射的荧光，以荧光强度对激光光波长作图，得到荧光物质的激光光谱，实际上，激发光谱就是荧光物质的吸收光谱。激发光谱中最高峰的波长，能使荧光物质发出最强烈的荧光。如果使激发光的波长和强度保持不变，而让物质所发生的荧光通过单色器色散，依次将不同波长的荧光照射于接收器上，并依次测其荧光强度，然后以荧光强度对相应的荧光波长作图，得到该物质的荧光发射光谱，简称荧光光谱。
必做
生物样品测定前为什么要除去蛋白质？除去蛋白质的常用方法有哪些？
答：除蛋白质的意义：使结合型药物释放出来，以测定总浓度。得到较“干净”的提取液，减少乳化。消除对测定的干扰。
常用去蛋白质方法：蛋白质沉淀法——生成不溶性盐或盐析和脱水作用。包括：加酸类、重金属盐、中性盐和能与水混溶的有机溶剂等，如：三氯乙酸、高氯酸、Cu2+、硫酸铵、甲醇、乙腈等。组织酶消化法——蛋白水解酶，如胰蛋白酶、胃蛋白酶等。
必做
影响血药浓度的因素有哪些？
答：包括机体因素：生理（年龄、性别、妊娠）、病理、遗传；药物因素：剂型因素、手性药物对映体相互作用；环境因素：化学物质、合并用药；人体昼夜节律、营养和精神状态。
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为什么要进行体内药物分析？体内药物分析的主要任务是什么？
答：为开展临床药学和临床药理学研究服务，以指导临床安全、合理、有效用药和正确评价新药。体内药分的主要任务：分析方法学的研究、治疗药物监测、药代动力学研究、人群代谢分型研究、体内内源性物质的测定及其它方面（药物滥用、吸毒、兴奋剂检测、法医毒物分析等）的应用。