实验目的：拟南芥无菌培养。

实验仪器：光照培养箱,盆.培养皿,超净台,灭菌锅.
实验试剂：营养土,蛭石,MS培养基
实验步骤：
1、配制MS培养基（一般装在三角瓶里，最好只装最大体积的70％以内），高温灭菌（115
度15分钟）在未固化情况下，（固化的话可以在微波炉里融化再使用）在超净台里倒入培养皿（一般一个培养皿内装25ml左右培养基，培养皿也是要灭菌的，一般用报纸或者牛皮纸包一排，十几个吧），待充分凝固之后平放密封保存（倒好之后最好静置15－20分钟，然后放在塑料袋里，保存在4度）
2、将拟南芥种子用10％消毒水（洗洁精体积分数）浸泡15分钟左右（要保证每粒种子都
浸透），无菌水冲洗3遍，加入适量0.12%的琼脂溶液（要灭菌的）用蓝枪头播在之前准备的灭菌MS固体培养基上(要在超净台中操作)，点种子大概的确有点难以想象，下次你来拿种子和苗的时候我可以给你演示一下；
3、４℃春化2天后转到光照培养间，温度２２℃／１８℃（日／夜），1６ｈ／８ｈ光周期，
白炽灯光照培养，光照强度五千Lx。

（也不用这么严格的，一般22－25度，5000－7000lx，差不多就行了）
4、大约7－10天后，拟南芥根须和芽均已长出，长到3至4片叶后可以移入土中培养（平
板里长太久的话似乎会影响植物以后的生长）。

5、用营养土和蛭石以1：1的比例混合拌匀配制，以保证营养及透气性。

用高温杀菌以杀
死土中的害虫。

（我们现在种得多，土都不灭菌的，注意拔拔杂草就行了）
6、用镊子小心夹住培养皿中的拟南芥茎处，取出放在土上，卷起根须塞入土中。

避免将叶
片带入土里。

放在光照培养间，条件和长平板一样就行了
7、在托盘中浇水，通过毛细作用由底部的孔吸收上去，保证土壤湿润。

刚移植的前两天可
以用基本上透明的盖子盖住盆顶。

MS培养基的配方是对的
单位mg/L
大量元素：NH4NO3 1 650
KNO3 1 900
CaCl２·2H2O 440
MgSO4·7H2O 370
KH2PO4 700
微量元素：KI 0.83
H3BO3 6.2
MnSO4·4H2O 22.3
ZnSO4·7H2O 8.6
Na2MnO4·2H2O 0.25
CuSO4·5H2O 0.025
CoCl2·6H2O 0.025
FeSO4·7H2O（27.8）+Na2-EDTA·2H2O（37.3）
有机成分：肌醇100
烟酸0.5
盐酸吡哆醇（维生素B6）0.5
盐酸硫胺素（维生素B1）0.5
甘氨酸2
注意：肌醇一般是要另外分开来独自配成浓缩液，因为它比较难溶，一般配成100倍，而除去肌醇后的有机，还是可以配成1000倍的。

要加1.2%的琼脂，才能凝固。