专题1基因工程一、单项选择题1．转基因技术在植物品种改良方面应用广泛，其中一项基因工程是改造CO2固定酶。
其目的是( )A．提高光合作用效率B．延长果实的储藏期 C．提高植物的抗性D．培育新作物品种2．利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需的产品。
下列选项中能说明目的基因完成表达的是( )A．棉花细胞中检测到载体上的标记基因 B．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素的基因C．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因的mRNA D．酵母菌细胞中提取到人的干扰素3．科学家将控制某药物蛋白合成的基因转移到白色来杭鸡的受精卵DNA中，发育后的雌鸡就能产出含该药物蛋白的鸡蛋，而且用这些鸡蛋孵出的雌鸡，仍能产出含该药物蛋白的鸡蛋。
下列有关叙述中正确的是( )A．表达载体的导入运用了显微注射技术 B．受精卵的发育需要运用胚胎移植技术C．这种变异属于不定向的变异 D．这种变异来源于染色体变异4．甲、乙两图表示从细菌细胞中获取目的基因的两种方法，以下说法中错误的是( )A．甲方法可建立该细菌的基因组文库B．乙方法可建立该细菌的cDNA文库C．甲方法要以脱氧核苷酸为原料D．乙方法需要逆转录酶参与5．(2012·肇庆二模)我国科学工作者培育的转基因抗虫棉，其抗虫基因来源于( )A．苏云金杆菌中的抗虫基因 B．棉铃虫变异形成的致死基因C．寄生在棉铃虫体内的线虫基因 D．普通棉的突变基因6．基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。
已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。
根据图示判断下列操作中正确的是( )A．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割 B．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割C．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割 D．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割7．(2012·杭州二模)下图表示化学方法合成目的基因I的过程。
据图分析下列叙述正确的是( )A．过程①需要DNA连接酶B．过程②需要DNA限制性核酸内切酶C．目的基因I的碱基序列是已知的D．若某质粒能与目的基因I重组，则该质粒与I的碱基序列相同8．(2012·广州二模)下列关于生物体内化合物的说法，正确的是( )A．N是组成细胞内各种有机物的必需元素B．糖类都是细胞内的能源物质 C．所有细胞中都含有蛋白质和磷脂D．人的肝细胞和神经细胞中的mRNA反转录形成的cDNA没有差别9．(2012·北京西城一模)草甘膦是一种广泛应用的除草剂，能不加选择地杀死各种杂草和农作物。
将抗草甘膦基因转入油菜中，使油菜能抗草甘膦。
在转基因油菜种植多年后，调查发现在公路边的野生油菜有80%含有抗草甘膦基因。
下列叙述正确的是( )A．野生油菜体内的抗草甘膦基因主要源自转基因油菜的花粉B．80%的野生油菜体内出现抗草甘膦基因是自然选择的结果C．含抗草甘膦基因的野生油菜是经自然选择进化出的新物种D．大量使用单一除草剂可以减轻环境污染，提高物种多样性10．(2012·广州二模)下列叙述不合理的是( )A．萌发的种子可作为诱变育种的材料 B．植物分生区细胞可用于培育脱毒苗C．带芽的枝条可提高扦插的成活率 D．乳腺细胞可作为转基因动物的受体细胞11．(2012·合肥二模)科学家依据基因工程的原理最新研制的某种疫苗是用病原微生物编码抗原的基因制成的，这个基因编码的产物能诱导机体产生免疫反应。
该疫苗( )A．引起人体特异性免疫的原因是DNA分子上具有抗原 B．引起免疫反应后相应淋巴细胞增多，细胞周期将变长C．能与浆细胞产生的相应抗体发生特异性结合 D．包括抗原基因、启动子、终止子和标记基因等12．(2012·绍兴质检)下列有关基因工程的叙述正确的是( )A．DNA 连接酶能将碱基互补的两个黏性末端的碱基对连接起来 B．获得目的基因一定要使用限制性核酸内切酶C．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 D．利用质粒上的标记基因可用来筛选含重组DNA 的细胞和转基因植物二、双项选择题13．在基因工程操作中限制性核酸内切酶是不可缺少的工具酶。
下列有关限制性核酸内切酶的叙述中错误的是( )A．一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 B．限制性核酸内切酶的活性不受温度和pH等因素的影响C．限制性核酸内切酶可以从某些原核生物中提取 D．限制性核酸内切酶也可以识别和切割RNA14．下列关于基因工程的叙述中，错误的是( )A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原有生物活性D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达15．(2012·北京东城二模)下图为转基因抗冻番茄培育过程的示意图(其中amp r为抗氨苄青霉素基因)。
下列叙述不正确的是( )A．不能同时选用限制酶PstⅠ、SmaⅠ对含目的基因的DNA进行切割B．过程②可采用农杆菌转化法将含目的基因的表达载体导入受体细胞C．质粒上的抗性基因有利于筛选含目的基因的细胞和促进目的基因的表达D．图中过程④可以利用放射性同位素标记的目的基因作为探针进行筛选三、非选择题16．(2012·全国新课标)根据基因工程的有关知识，回答下列问题：(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有______________和______________。
(2)质粒运载体用Eco RⅠ切割后产生的片段如下：AATTC……GG……CTTAA为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用Eco RⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是_______________。
(3)按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即__________DNA连接酶和__________DNA连接酶。
(4)反转录作用的模板是___________，产物是_________。
若要在体外获得大量反转录产物，常采用__________技术。
(5)基因工程中除质粒外，__________和__________也可作为运载体。
(6)若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是______________。
17．(2012·福建)肺细胞中的let7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。
研究人员利用基因工程技术将let7基因导入肺癌细胞实验表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。
该基因工程技术基本流程如图1。
请回答：(1)进行过程①时，需用__________酶切开载体以插入let7基因。
载体应用RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let7基因转录，该部位称为__________。
(2)进行过程②时，需用__________酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。
(3)研究发现，let7基因能影响RAS的表达，其影响机理如图2。
据图分析，可从细胞提取__________进行分子杂交，以直接检测let7基因是否转录。
肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中__________(RASmRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。
18．下图表示两种限制性核酸内切酶识别DNA分子的特定序列，并在特定位点对DNA进行切割的示意图，请回答以下问题：(1)图中甲和乙代表____________________________________________。
(2)Eco RⅠ、HpaⅠ代表_________________________________________。
(3)图中甲和乙经过相应操作均形成两个片段，切口的类型分别为______________、_______________。
甲中限制酶的切点是_______之间，乙中限制酶的切点是________之间。
(4)由图解可以看出，限制酶的作用特点是___________________________。
(5)如果甲中G碱基发生改变，可能发生的情况是_________________________。
19．除草剂草甘膦会把普通大豆植株与杂草一起杀死。
科学家从抗草甘膦的矮牵牛中分离克隆出EPSP合成酶基因，培育出了抗草甘膦的转基因大豆，从而大大降低了田间管理成本。
抗草甘膦转基因大豆培育过程如下图所示。
请分析回答有关问题：(1)科学家在进行上述基因操作时，通常要用同一种________分别切割质粒和含目的基因的DNA，质粒的黏性末端与目的基因两侧的黏性末端就可通过________而黏合。
这一过程体现了质粒作为运载体必须具备的条件是______________。
(2)为了确定转基因大豆是否培育成功，既要用放射性同位素标记的______________作探针进行分子杂交检测，又要用___________________方法从个体水平鉴定大豆植株的抗除草剂特性。
(3)有人提出，种植上述转基因大豆，它所携带的目的基因可以通过花粉传递给近缘物种造成“基因污染”。
另一方观点认为，由于存在________，它们很难与其他植物杂交。
20．(9分)降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。
人的降钙素活性很低，半衰期较短。
某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条各含72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Kleno w酶补平，获得双链DNA，过程如下图。
在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。
回答下列问题：(1)Kleno w酶是一种________酶，合成的双链DNA有________个碱基对。
(2)获得的双链DNA经Eco RⅠ(识别序列和切割位点—G↓AATTC—)和Bam HⅠ(识别序列和切割位点—G↓GATTC—)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。
①大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它___________________________。
②设计Eco RⅠ和Bam HⅠ双酶切的目的是__________________________________________________。
③要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有__________________。
(3)经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是_______________________________。