• 对倍稀释的优点：
– 操作容易 – 敏感株的MIC呈正态分布 – 区分异常(R)与敏感(S)的菌群
敏感性分类(NCCLS的定义)
• 敏感（Susceptible）
– 用常规用量治疗有效 – 常规用药时达到的平均血药浓度超过细菌的MIC 5
倍以上。
• 耐药（Resistance）
– 用常规用量治疗不能抑制细菌的生长 – MIC高于药物在血、体液中可能达到的浓度
• 材料：浸有一定Abs的干燥的圆滤纸片 • 步骤：制备菌悬液－涂平板－贴纸片－孵育－卡
尺测量抑菌圈直径－判定R、I、S • 优点：选药灵活、便宜、一个平皿可测多个药 • 缺点：影响因素多
– 适用于快生长菌、部分苛养菌
2020/10/2
12
药敏试验方法2－肉汤稀释法
4
8
混
16
32 64 128 256 ug/ml
常见抗菌药物
北京协和医院呼吸科
曹彬
2020/10/2
1
常见病原微生物
革兰阳性球菌
金黄色葡萄球菌，表皮葡萄球菌 肺炎链球菌，溶血链球菌，草绿 链球菌，肠球菌
革兰阳性杆菌
破伤风，产气荚膜，炭疽杆菌 白喉杆菌，李斯特菌 其他棒杆菌
革兰阴性球菌
脑膜炎球菌，淋球菌 卡他莫拉菌
革兰阴性杆菌
大肠杆菌，克雷伯菌，变形杆菌 沙门氏菌，志贺氏菌，产气肠杆菌 阴沟肠杆菌，枸橼酸菌，沙雷菌属 不动杆菌，绿脓杆菌，嗜麦芽窄食单胞 菌，黄杆菌
1.阻断细胞壁的合成 如B内酰胺类、万古、 杆菌肽
3. 损伤细胞浆膜影响通透性 如多粘菌素、两性霉素和制
霉菌素
5.阻断RNA DNA的合成 甲硝唑 喹诺酮类、利福平 阿糖腺苷、新生霉素
2..阻断核糖体蛋白合成
4.影响叶酸代谢 如氨基糖苷类、四环
如磺胺类
素、红和氯霉素
2020/10/2
16
一.内酰胺类抗菌药物
– 稀释法(肉汤、琼脂) – 自动化仪法 – 抗生素连续梯度法 (Etest ) – 流式细胞仪
药敏试验方法的选择
• 纸片法有独特之处
– 选药灵活、便宜、易懂
• MIC法：商品肉汤法 (自动化法)↑
– 可用于厌氧菌、苛氧菌 – 计算机管理 – 快速，但可能有错误（如诱导型菌） – 新药的评价
药敏试验方法1（纸片扩散法〕
2020/10/2
2
厌氧菌
真菌 其他
消化链球菌，消化球菌，拟杆菌（脆弱拟 杆菌），梭杆菌 念珠菌，隐球菌，曲霉菌，毛霉菌，卡氏 肺孢子菌 衣原体，支原体
2020/10/2
3
链球菌
2020/10/2
伤寒杆菌
痢疾杆菌
霍乱弧菌
4
2020/10/2
5
药敏试验
• MIC：在与微生物生长速率有关的特定时间间 隔内，通常是18－24小时，能够抑制被测菌生 长的最低药物浓度。
混清
抗生素倍比稀释，种菌105CFU/ml ， 孵育35℃， 16-20h，判读
药敏试验方法2－肉汤稀释法
• 调节离子浓度的MH肉汤 • 宏量肉汤法（2ml, 13x100mm ）
微量肉汤法 （ 0.1ml, 微量板） 自动化仪 • 优点：准确，可靠，可用于研究 • 缺点：
– 劳动强度大 – 细菌生长情况不可查
2020/10/2
24
B内酰胺类抗菌药物的给药方法
• 他唑巴坦：
– 特治星:是他唑巴坦和哌拉西林以1:8 合剂
2020/10/2
23
5. 其他内酰胺类
1、亚胺培南又名泰能，和西司他丁以1：1组成，减少对肾
毒性，对G(+)菌、肠杆菌科、绿脓杆菌、厌氧菌均有较强 的作用，用量1-3g/d。 2、美洛培南：作用基本同泰能，不良反应少。不需加西司 他丁。剂量1－4g/d。 3、氨曲南：对肠杆菌科和绿脓杆菌作用强。
2020/10/2
20
第三代头孢菌素：主要针对G(-)杆菌
• 头孢噻肟 对G(+)菌也有效 • 头孢曲松 半衰期长达８小时 • 头孢唑肟 对G(-)杆菌杀菌作用强 • 头孢哌酮 主要由胆道排泄(80%)，对绿脓杆菌有效 • 头孢他啶 对绿脓杆菌效果明显
2020/10/2
21
3. 头霉素
• 抗菌谱类似二代头孢菌素，但是增加了对厌氧菌的 活性
1、青霉素类 2、头孢菌素类 3、头霉素 4、内酰胺酶抑制剂 5、碳青霉烯类和其他
2020/10/2
17
1. 青霉素类
• 口服:青霉素V, 氨苄西林，阿莫西林 • 注射:青霉素G: 剂量160-960万U/日,个别脑膜炎用量可
>1000万U/日,要分次给,每次<500万U,主要用于G(+)菌. 新青II: (苯唑西林）剂量4-8g/日 氨苄青霉素: 剂量4-12g/日 氧哌嗪青霉素:剂量4-8g/日,对G(-)杆菌,绿 脓杆菌和厌氧菌有效,但对产酶 金葡菌无效.
敏感性分类（2）
• 中介 (Intermediate)
– MIC接近血、体液中药物的浓度，治疗反应率低 于敏感株
• 药物生理浓集部位有效 (尿－FQ) • 加大用药剂量可能有效
– 缓冲区：防止操作的系统误差造成重大结果的 判定错误
药敏试验的方法学
• 半定量…纸片扩散法 (抑菌圈直径) • MIC法：
抑菌圈直径与MIC的关系
MIC (ug/ml)
>256
12
3
5
256 128
22
22
耐药
2
1
小误差 极重要误差
64
32
1
1
小误差
中介
小误差
16
8
4
2
重要误差
12
258
1
1
12
小误差
敏感 5
1
1
25
9
0.5
0.25 6
8 10 12 14 18 20 22 24 26 28 30 32 34
抗微生物药物的作用机制
代表药物：头孢美唑
2020/10/2
22
4. 内酰胺酶抑制剂
• 舒巴坦:
– 优立新:是氨苄青霉素和舒巴坦的合剂，比例为2:1 ，750mg的优 立新含氨苄500mg和舒巴坦250mg
– 舒普深：头孢哌酮0.5g和舒巴坦0.5g以1:1 的合剂
• 克拉维酸:
– 安灭菌:是羟氨苄青霉素 250mg和克拉维酸 125mg 2:1 的合剂 – 特美汀:是替卡西林3g和克拉维酸 0.1-0.2g 的合剂
2020/10/2
18
2. 头孢菌素类
• 口服: 头孢羟氨苄 头孢氨苄，先锋4号 头孢唑啉，先锋5号 头孢拉定，先锋6号 头孢克洛， 头孢呋辛酯 头孢丙烯
2020/10/2
19Байду номын сангаас
注射剂
• 第一代头孢菌素: 主要针对G(+)球菌 头孢唑啉 头孢拉定
• 第二代头孢菌素: 对G(+)球菌和G(-)杆菌均有 效，但G(-)杆菌不如第三代 头孢菌素 头孢呋辛