衣原体、立克次体、支原体、螺旋体、放线菌大多数真菌不需要复杂的营养就能生长，最常用的为沙氏培养基。

结核分枝杆菌在培养前针对标本应做适当的前处理，如痰可做4%H2SO4或4%NaOH处理20～30min，除去杂菌再接种于罗氏培养基，37℃5%～10%CO2培养，定时观察，至4～8周。

解脲脲原体:主要引起非淋菌性尿道炎，应采集尿液标本。

1954年Shepard首先从非淋球菌尿道炎(NGU)患者的尿道分泌物中分离获得，因其菌落细小，故曾称为T支原体(T-mycopiasmas)。

肺炎支原体的致病性主要引起人的原发性非典型性肺炎，经呼吸道传播，无泌尿道感染。

而解脲脲原体可以经性接触传播，并可以通过垂直传播感染新生儿支原体:菌落培养3～10天可形成直径为0.2～0.5mm大小的菌落，用低倍镜观察，菌落呈“荷包蛋”样，即中央部分较厚，不透明，向下长入培养基内，周边为一层薄薄的透明颗粒区。

是一类无细胞壁、呈高度多形态性，能通过除菌滤器，在人工培养基上能生长繁殖的最小原核型微生物。

支原体“草莓”状,反复传代后呈“荷包状”菌落。

支原体因无细胞壁，对作用于细胞壁的抗生素，如青霉素、头孢菌素等不敏感，常在培养基中加入青霉素类药物，以抑制标本中杂菌的生长。

肺炎支原体:主要引起支原体肺炎，应采集痰液标本。

诊断→症状重（高热、咳嗽）而胸部体征少（双肺无干湿啰音，仅有散在哮鸣音)，加上左肺叶弥散性间质性肺炎的X线表现，最可能为肺炎支原体肺炎。

支原体对作用于核糖体，抑制或影响蛋白合成的抗生素如四环素、红霉素等敏感。

肺炎支原体可从口腔、呼吸道分离到，主要通过飞沫传播，是人类原发性非典型性肺炎的主要病原体之一。

衣原体:是一群体积较小，能通过细菌滤器，细胞内专性寄生，并有独特发育周期的原核细胞型微生物。

抵抗力弱，不耐热，加热50℃经30分钟或56～60℃5～10分钟可杀死，但耐寒，在冰冻条件下可存活数年。

对多种抗生素敏感。

微生物检验，沙眼衣原体的包涵体中含有糖原，碘染色可以着色。

鸡胚培养是间接检测法。

尿道分泌物Giemsa染色观察衣原体包涵体，对感染有诊断意义，简单易行。

细胞培养和动物培养时间长，不适合早期珍断。

①为专性细胞内寄生的微生物，绝大多数能在6～8日龄鸡胚卵黄囊中生长繁殖，并可在卵黄囊膜中找到包涵体、原体和始体颗粒。

衣原体有原体和网状体两种形态结构不同的颗粒。

1)原体在细胞外较为稳定，无繁殖能力，但有高度的感染性。

2)网状体又称始体，空泡内以二分裂方式繁殖、聚集，构成各种形状的包涵体。

②原体呈球形或椭圆形，外有胞壁，内含致密的核质，为成熟的衣原体。

姬姆萨染色呈紫色，Macchiavello染色呈红色。

在细胞外较为稳定，无繁殖能力，但有高度的感染性。

③当衣原体的原体与易感细胞接触时，通过细胞的吞饮作用进入细胞，形成吞噬小泡。

原体在泡内变软，增大为网状体。

约8小时后，网状体在空泡内以二分裂方式繁殖、聚集，构成各种形状的包涵体。

(原体→吞噬小泡(8h后)→网状体→包涵体)④肺炎衣原体经呼吸道传播，引起肺炎、支气管炎、咽炎等，因痰标本对培养细胞有毒性作用，故取咽拭标本或支气管肺泡灌洗液较好⑤沙眼衣原体沙眼亚种可引起沙眼、包涵体结膜炎、非淋菌性尿道炎和性病淋巴肉芽肿。

⑥鹦鹉热衣原体主要引起鸟类或家禽感染，由感染该衣原体的鸟类等动物的粪便污染环境，以气溶胶形式传给人。

(人畜共患病原体)⑦感染感染性尿道综合征多由沙眼衣原体、单纯疱疹病毒或淋球菌引起。

以尿频、尿急、尿痛,多次尿培养均为阴性为主要特点。

立克次体:①是一类严格细胞内寄生的原核细胞型微生物，结构与革兰阴性菌非常相似。

立克次体血清学检查宜取三份血清标本(初入院、第2周和恢复期),滴定效价在1 : 160以上者为阳性,有4倍以上增长者则更具有诊断意义。

形态以球杆状或杆状为主，革兰染色呈红色，吉姆萨染色呈紫色或蓝色。

②流行性斑疹伤寒的病原体为普氏立克次体，其传播媒介是人虱 (人虱普式流行性)③地方性斑疹伤寒的病原体为莫氏立克次体(又称斑疹伤寒立克次体），其传播媒介是鼠虱、鼠蚤(虱蚤地方性)④恙虫病的病原体为恙虫病立克次体，其传播媒介是恙螨 (患者腋窝黑色焦痂，加上外斐试验阳性，可确诊为恙虫病。

)⑤Q热的病原体为Q热柯克斯体，其传播媒介是蜱。

(蜱Q)⑥鸡胚是培养立克次体的极好宿主。

在鸡卵黄囊或细胞内培养的贝纳柯克斯体均可有芽胞形成，用芽胞染色法可着色，但不含吡啶二羧酸。

贝纳柯克斯体有荚膜，约20nm厚, 呈绒毛状。

外斐反应 :①Q热、立克次体痘及罗沙利马体感染为阴性外，其他为阳性结果。

②立克次体的脂多糖成分与变形杆菌菌体抗原有共同成分，可引起交叉反应。

根据这一原理，用变形杆菌0抗原代替立克次体抗原进行非特异性凝集反应来检测抗体，可辅助诊断斑疹伤寒与恙虫病。

肥达试验可辅助诊断肠热症(伤寒和副伤寒）外斐试验可辅助诊断某些立克次体病(斑疹伤寒、恙虫病）抗“O”试验可辅助诊断风湿热冷凝集试验可辅助诊断支原体肺炎。

罗沙利马体是巴通体属。

其他立充次体有:斑疹伤寒、斑点热、悉虫病和Q热立克次体，分离多用动物接种；埃立克体细胞培养噬菌体、病毒均无细胞结构，支原体、细菌L型均无细胞壁，衣原体有完整的细胞壁。

立克次体、衣原体及一些螺旋体需在活细胞中生存。

支原体可以在无活细胞的培养基上生存。

以复制方式繁殖、只含有一种类型的核酸、无细胞壁、对抗生素不敏感均为病毒的特点。

细菌可在人工培养基中生长，而立克次体为专性细胞内寄生物。

能在人工培养基上生长、可形成芽孢为细菌的特点；可以独立生活，生活周期分两个阶段为衣原体的特点。

衣原体含两类核酸，有独特的发育周期，对多种抗生素敏感;病毒只含一种类型的核酸，对抗生素不敏感，无核糖体，为非细胞型微生物。

只在专性活细胞内寄生为衣原体和病毒的共同特征。

有细胞壁和核糖体、有DNA和RNA两种核酸、二分裂繁殖、对抗生素敏感为立克次体与细菌的共同特征。

立克次体与病毒的共同点是严格细胞内寄生。

螺旋体与细菌的不同点为运动方式特殊螺旋体与其他原核细胞型微生物的主要不同点是运动方式(有鞭毛细菌的运动方式为明显的方向性位移螺旋体有多种运动方式，如旋转、扭转、翻滚、抖动等)细胞壁结构类似为衣原体与细菌共同具有的特点。

支原体是无细胞壁的原核细胞型微生物细菌是有细胞壁的原核细胞型微生物。

肺炎支原体分解葡萄糖产酸不产气，不能利用精氨酸、赖氨酸与尿素人型支原体不分解葡萄糖、赖氨酸和尿素，可利用精氨酸解脲脲原体可水解尿素产碱，不分解葡萄糖、精氨酸和赖氨酸。

肺炎支原体、生殖道支原体等可分解葡萄糖产酸不产气，人型支原体等不能分解葡萄糖，但可利用精氨酸产NH3。

解脲脲原体不能利用葡萄糖和精氨酸，但可利用尿素作为能源，分解尿素产碱。

放线菌菌落:为无芽孢、无抗酸性，革兰阳性菌。

压制成片，镜检可见颗粒呈菊花状，中央为革兰阳性的丝状体，周围为粗大的革兰阴性棒状体，呈放射状排列。

放线菌培养比较困难，厌氧或微需氧。

在有氧环境中一般不生长，初次分离加5%CO2可促进生长。

形态与染色革兰阳性，抗酸染色阴性。

引起外伤性创伤感染，应首选将感染标本置玻片上，以盖玻片轻压后镜检。

在低倍镜下如见有典型的放射状排列的棒状或长丝状菌体，边缘有透明发亮的棒状菌鞘，即可确定诊断。

衣氏放线菌在机体抵抗力减弱或受伤时引起的内源性感染，导致软组织的化脓性炎症。

若无B:放线菌为无芽孢、无抗酸性，革兰阳性菌。

继发感染则大多呈慢性无痛性过程，常出现多发瘘管，排出的脓性物质中含有“硫黄颗粒”。

牛放线菌37℃厌氧培养18小时菌落特点为扁平、边缘整齐、颗粒状微小菌落，继续培养7-10天，菌落增大。

诺卡菌属:是广泛分布于土壤中的一群需氧放线菌。

多为腐生寄生的非致病菌，其中有些与医学有关。

致病性主要为外源性感染。

诺卡菌属形态与放线菌相似，但菌丝末端不膨大,革兰染色时着色不均，若为压碎的顆粒，則镜下为菌团，中心部位为革兰阳性，边缘的流苏样棒状体为阴性，抗酸染色呈弱抗酸性。

怀疑诺卡菌属感染的痰标本，挑取黄红或黑色顆粒，颗粒直径通常小于 1mm。

镀银染色法为螺旋体常用的染色方法，螺旋体被染成棕褐色。

梅毒螺旋体:在暗视野显微镜可以清楚看到小而纤细的螺旋状微生物。

梅毒螺旋体抵抗力极弱。

对温度和干燥特别敏感。

离体在外环境中1～2h即死亡。

对常用化学消毒剂亦敏感，1％～2％石炭酸数分钟就死亡。

对青霉素、四环索、红霉素、庆大霉素均敏感。

梅毒是由梅毒螺旋体引起的慢性传染病。

梅毒可分为后天性梅毒和先天性梅毒两种，前者主要通过性接触感染，后者从母体通过胎盘传给胎儿。

梅毒:硬下疳为一期梅毒的特征表现。

直接镜检→一期梅毒取硬下疳渗出液，二期梅毒取梅毒疹渗出液→制成涂片用暗视野显微镜直接镜检→如见有运动活泼的密螺旋体有助于诊断。

也可经镀银染色、Giemsa染色后光学显微镜检查。

也可用直接荧光染色检查标本中的螺旋体。

血淸学方法→梅毒螺旋体属于密螺旋体非特异性密螵旋体抗原试验 : 性病研究实验室试验（VDRL)、不加热血清反应素试验(USR)、快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)、自动反应素试验(ART)特异性密螺旋体抗原试验:梅毒密螺旋体微量血凝试验（MHA-TP)、荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)钩端螺旋体:①培养时对营养的要求较高，在含有兔血清（如柯氏培养基Kothof培养基）和含清蛋白、脂肪酸的培养基中生长良好。

(柯螺)②钩端螺旋体病的诊断→潜伏期7-14天，在感染动物的肾中长期存在，持续随尿排出，污染水源和土壤，人类主要感染途径是接触了疫水。

腓肠肌痛为钩体病较明显体征，加上该患者黄疸、出血、肾功能损害、转氨酶升高，故最可能为钩体病。

③钩端螺旋体可从临床标本、携带者和自然界的水中分离获得。

发病1周内血液的阳性率高，1周后尿和脑脊液等的阳性率高。

感染6-10天取血可检出抗体，在病初和发病的3或4周采集双份生清，监测抗体滴度的变化对诊断有重要价值。

④.钩端螺旋体属运动活泼，沿长轴做旋转、扭转及菌体伸缩匍匐状运动，因而常使菌体呈C、S、8等字形。

流行性感冒和革兰阴性杆菌敗血症可出现全身感染症状，但是尿胆原、胆红素及ALT多正常。

急性病毒性肝炎可有全身乏力，食欲减退等症状，但多伴有肝区隐痛。

流行性出血热主要表现为头痛、腰痛、眼眶痛,颜面、颈、胸等部位潮红，肾损害和出血等。

奋森螺旋体:常与梭杆菌寄生于人类口腔牙龈部。

一般不致病，只有当人体抵抗力显著降低时，这两种菌大量繁殖，协同引起奋森咽峡炎、牙龈炎、溃疡性口腔炎等。

改良的Kelly培养基可用于疏螺旋体的培养伯氏疏螺旋体可引起莱姆病。