血型鉴定、不规则抗体筛查及交叉配血步骤
一.
1. 血型鉴定
排管并标记患者红细胞悬液管、患者血浆管、患者ABO正定型试管、患者ABO反定型试管、患者RhD定型试管。

2.标本准备分离患者的血浆，取一滴压积红细胞，三次洗涤，制备患者 2%-5%红细胞悬液。

3.加样
ABO正定型： 1 滴（ 50ul ）抗 A、抗 B 试剂加 1 滴（ 50ul ）患者红细胞悬液。

ABO反定型： 1 滴（ 50ul ）患者血清加 1 滴（ 50ul ）反定型试剂红细胞。

RhD定型： 1 滴（ 50ul ）抗 D 血清加 1 滴（ 50ul ）患者红细胞悬液。

4.
二. 结果判断
离心（ 2 档）：轻摇试管，肉眼观察有无凝集，记录ABO、RhD血型结果。

不规则抗体筛查（生理盐水法+凝聚胺法）
1.排管标记 01、 02、 03 及自身对照管
2. 加样各试管分别加入相应的患者血清 2 滴（ 100ul ）及筛选细胞 1 滴（ 50ul ）。

3.结果观察
离心（ 2 档），观察结果
先看上清液有无溶血，轻轻混匀，肉眼观察有无凝集，结果判断并记录。

各试管分别加入低离子介质，轻轻混匀（参照试剂说明书）
各试管再分别加凝聚胺溶液 2 滴（ 100ul ）混匀，离心
先观察上清液有无溶血
弃去上清液，留约，轻轻混匀
肉眼观察有无凝集（凝者继续试验，否则查找原因并重复试验）
各试管分别加入重悬液 2 滴（ 100ul ），轻轻混匀
肉眼观察凝集是否在1min 内消失
显微镜检查
三. 交叉配血试验（生理盐水法+凝聚胺法）
1.标本准备
分离供血者血浆与红细胞
三次洗涤，制备供血者 2%-5%红细胞悬液
2.排管标记
排管，主侧、次侧及自身对照管
3.加样
各试管分别加入相应的备检血清 2 滴（ 100ul ）及 2%-5%备检红细胞悬液 1 滴（ 50ul ）4.结果观察
离心（ 2 档），观察结果
先看上清液有无溶血
轻轻混匀，肉眼观察有无凝集
结果判断并记录
各试管分别加入低离子介质，轻轻混匀（参照试剂说明书）
各试管再分别加凝聚胺溶液 2 滴（ 100ul ）混匀，离心
先观察上清液有无溶血
弃去上清液，留，轻轻混匀
肉眼观察有无凝集（凝者继续试验，否则查找原因并重复试验）
各试管分别加入重悬液 2 滴（ 100ul ），轻轻混匀
肉眼观察凝集是否在1min 内消失
肉眼观察阴性者，显微镜检查
记录交叉配血结果
A、 B、O试验红细胞悬液的制备
1.分别采取已知A、 B、O 三种血型的红细胞，经盐水洗涤 3 次，以压紧红细胞配成不
同浓度的红细胞悬液（见表格）
红细胞悬液的配置
悬液浓度（ %）压实红细胞（滴）盐水（滴）
2 1 （ 40）
5 1 （ 16）
10 1 （ 8）
20 1 （ 4）
2.为了防止红细胞悬液敏感性不一致，可随机采取 3 个以上健康成人血液，按A、B、O 型分别混合后，按上法制备。