＋表示凝集，－表示无凝集
对抗血清的要求※
①高度特异，只能与相应的红细胞抗原发
生凝集，无非特异性凝集， ABO
血 抗B血清效价在1:64以上。 型 鉴 ③高亲和力，15秒内出现凝集，其强度 为3分钟时凝块>1mm2。 定
②高效价，抗A血清效价在1:128以上，
④无冷凝集素。
⑤无菌。分离血清后56℃，30min灭活。
型 （2）立即水平离心1000r/min, 10min. 鉴 定 （3）观察及判断血型结果①阳性：对照管细胞沉
淀在管底，检测管凝集块在胶上或胶中。 ②阴性：对照管和检测管细胞沉淀均在管底。 ③试验失败：对照管细胞在胶上或 胶中，应重新做试验。
（4）报告方式：同生理盐水法。
注意事项
ABO 血 型 鉴 定
【注意事项】
交 1.如果对患者的输血史或妊辰史不明， 叉 必须使用48h内的标本。 配 血 2.不能使用溶血标本。
（ 盐 水 凝 集 法 ）
3.配血后，受血者/供血者的全部标本 须于2～6℃冰箱保存7d以备复查。
交 叉 配 血
（ 盐 水 凝 集 法 ）
【方法学评价】
本法简易、经济、快速，缺点是
仅用于检查ABO血型系统的IgM 血型抗体是否相配，不能检出不 相配的IgG血型抗体。
（ 盐 水 凝 集 法 ）
查找原因。
②异型配血时，主侧无凝集无溶血，次侧
有凝集无溶血，可以输少量血；如主侧、
次侧均不凝集或主侧凝集，不能输血，
需查找原因
交 叉 （1）受血者xxx（X型）血清＋供血者xxx 配 （X型）红细胞 凝集与否及强弱程度 血 （ （2）供血者xxx（X型）血清＋受血者xxx
交叉配血试验的注意事项
1．用于交叉配血的病人（受血者）血液标 本应该是抽取的新鲜血，供血者的标本是
刚从血袋剪下来的原已加热封闭两端小管
的血液。

2．采用试管法作交叉配血试验，最好
不用玻片法。
3．用生理盐水洗涤红细胞去除血浆，预防 纤维凝块的形成。 4．配血管中发生溶血现象，表明有抗原抗 体反应同时还有补体参与，是配血不合的 严重情况，应十分重视。
正定型结果分析
抗A血清
抗B血清
抗A、B血清
＋
被 检 红 细 胞
＋
＋ ＋Leabharlann AB 型反定型结果分析※ （被检血清和标准红细胞）
＋A型RBC
被 检 血 清
＋B型RBC
+O型RBC
血型
A型 B型 O型 AB型
－
＋
－
－ － － －
＋ ＋
－
＋
－
注意:被检血清＋O型RBC凝集，应考虑含有不 规则抗体或其他血型抗体。应追踪。
血型鉴定与交叉配血
医学检验系 陈丽华
一、ABO血型鉴定
盐水凝集法
玻片法 试管法
凝胶微柱法
血型鉴定原理 检测红细胞上存在的血型抗原，以及血清
中存在的血型抗体，依据抗原抗体存在的
情况判断血型。
常规的方法包括正向定型与反向定型
正向定型※：已知抗体特异性的血清
检查红细胞抗原
反向定型※：已知血型红细胞检查血
DS1滴
次侧配血管
判断配血是否相合
交叉配血凝聚胺介质法操作示意图
【方法学评价】
交 叉 配 血
（ ） MPT
聚凝胺介质法可加快凝集反应速度，使 原来在盐水介质中不能凝集红细胞的抗
体发生凝集，提高反应灵敏度，能检测
IgM、 IgG等引起溶血反应的几乎所有
规则与不规则抗体，适用于各类输血患
者的配血。故该法具有快速、灵敏、结
（ 凝 胶 微 柱 法 ）
1. 离心机选择：一般使用微柱凝胶卡专用 水平离心机。使凝集复合物不偏向一侧， 特别是阴性结果不偏向管底之一侧，以 免造成弱阳性假象。 2. 操作：每种微柱凝胶卡分为反应腔和凝 胶分离柱两部分。向反应腔内要先加红 细胞，后加血清或抗体。※ 3. 离心：为了应用不同离心半径和不同离 心机进行凝胶试验，应通过试验设定每 台离心机的最佳时间和速度。
清抗体
正定型结果分析※
抗A血清
抗B血清
抗A、B血清
＋
被 检 红 细 胞
＋
—
＋
A 型
正定型结果分析
—
抗A血清
抗B血清
抗A、B血清
＋
被 检 红 细 胞
＋
＋
B 型
正定型结果分析
抗A血清
抗B血清
抗A、B血清
＋
被 检 红 细 胞
— —
—
O 型
注意：正定型时抗A（－）抗B（－）抗A、B 管（＋）,应考虑到是否为亚型。应追踪。
果可靠、能捡出完全抗体及不完全抗体
等优点。
交叉配血（抗人球蛋白法）
【方法学评价】本法是确定不完全 抗体最可靠的方法※，但操作较 繁琐，需多次洗涤，需要时间常， 试剂较贵，故始终未能成为临床 常规的配血方法。
交叉配血试验的临床意义

1．进一步验证受血者和供血者血型鉴 定是否正确，发现ABO系统的不规则抗体， 以避免血型鉴定错误而导致的输血后的严 重溶血反应。
1．生理盐水凝集法
原理
ABO ①ABO血型抗体一般是IgM，属于完全
血 抗体 型 ②IgM抗体分子链较长，能克服红细胞表 鉴 面排斥力，同时分子量较大，它能与相 定 应抗原特异性结合，在生理盐水中发生
肉眼可见的凝集现象。
IgM抗体凝集红细胞示意图
IgM在盐水介质中产生凝集
①玻片法：
操作简单，不需要离心，适于大规 模血型普查。 反应时间长，易忽略较弱的凝集而 导致定型错误。不适于反定型。
盐 水 凝 集 法 ）
报告方式
（X型）红细胞 凝集与否及强弱程度 （3）受血者xxx与供血者xxx配血是否相合
DC1滴
PS1滴
主侧配血管
1000r/min 离心1min 观 察 上 层 液 有 无 溶 血
轻摇试管
肉眼观察有无凝集
有凝集
PC1滴
DS1滴
镜检证实 无凝集
次侧配血管
交叉配血盐水介质法操作示意图
5．盐水配血试验阴性，但有反复输血史或 妊娠史的受血者，应加酶法、抗人球蛋白 法等配血。 6．为确保输血的安全，应输同型血。
三、血型鉴定与交叉配血的异常及其克服 办法
（一）责任性错误
血型鉴定和交叉配血的技术并不复杂，
因配血错误而导致输入不合血液的事故中，
大多数是因为不严格执行操作规程或操作
过程中精神不集中所致，因此为杜绝责任
性错误首先应该熟悉操作规程并严格执行。
（二）假 阴 性
1.标准血清不符合要求 2.被检红细胞抗原性减弱
3.红细胞悬液浓度配置不当
4.将溶血反应误认为不凝集
5.血型物质的中和作用
（三）假
2.冷凝集
阳
性
1.红细胞呈缗钱状排列
3.全凝集与多凝集
2、聚凝胺介质配血法（MPT）※
【原理】：①聚凝胺是带有高价阳离子的多聚 季氨盐，溶解后能产生很多正电荷，可以中 和红细胞表面的负电荷，减少细胞间排斥力， 缩小了其间之距离，出现非特异性凝集。 ②低离子强度溶液降低红细胞的Zeta电位，可 进一步增加抗原抗体见的吸引力。 ③枸橼酸盐解聚液可消除聚凝胺的正电荷，使 非特异性凝集消散，但IgM或IgG类血型抗体 与红细胞产生的特异性凝集不会散开。
正反定型结果不一致的解决办法
⑤如怀疑血清中有抗A1，可用数份A2红细 胞标本进行检验。 ⑥如果试验结果未见凝集，应将反应管至 少在室温和40℃分别放置30min，用显 微镜检查。 ⑦若怀疑是由于抗原减弱造成的正反定型 不符，可进一步做木瓜酶试验、直接抗 球蛋白试验、吸收放散试验等加以鉴别。
ABO 血 型 鉴 定
交 叉 配 血
交 叉 配 血
（ ） MPT
DC1滴
PS1滴
LISS液 0.6ml
加凝聚胺2滴， 混匀15s
弃去上清 不凝集：试剂无效 1000r/min 离心1min 主 侧 、 次 侧 配 血 管 凝集 离 心 1 分 钟 加解聚液2滴
主侧配血管
1000r/min 离心1min
混匀
PC1滴
ABO 血 型 鉴 定
ABO 血 型 鉴 定（玻片法）
抗A血清1滴
加5％红细胞悬 液1滴，混匀 连续转动玻片 1～5min
凝 集
抗B血清1滴 抗A+B血清1滴
无凝集
镜检证实
②试管法：
ABO 血 型 鉴 定
需时间短，适用于急诊定型。 可正反定型。
可发现亚型或较弱抗原抗体反
应，结果判断可靠，为常规检
供血者红细胞与受血者血清反应（主侧交叉 配血※）
受血者红细胞与供血者血清反应（次侧交叉 配血※）
献血者
红细胞 血清
受血者
红细胞 血清
交叉配血目的 ①发现ABO血型鉴定的错误。
②发现不规则凝集素。如冷凝集素。
③发现其他血型抗体和一些不规则抗体。
（三）交叉配血方法
1、室温盐水配血法（只能检出IgM型
ABO血型鉴定错误可以引起严重的后
果。
鉴定结果错误因素主要有技术问题及
ABO血型本身的问题。
二、交叉配血
（一）交叉配血的重要性
交叉配血是在输血前必须做的试验。 交叉配血中最重要的是ABO血型配合， 必需ABO血型相同，且交叉配血无凝 集才能输血。
（二）交叉配血一些基本概念
概念：是检查供血者与受血者是否含有不相 合的抗原合抗体成分的试验，主要是检查受 血者血清中有无破坏献血者RBC的抗体。
（ 盐 水 法 ） 注 意 事 项
2．凝胶微柱法
凝胶具有分子筛效应和亲合效应 亲合效应：红细胞抗原与相应抗体结合 ABO