阿维菌素高效液相色谱测定方法
阿维菌素是一种新型生物发酵制得的杀虫剂，该产品效果好，用量低，安全系数高，被广泛应用于农林作物多种害虫的防治。

一、阿维菌素的理化性质：
化学名称：（10E，14E，16E，22Z）-（1R，4S，5’S，6S，6’R8R，8R；12S，13S，20R，21R，24）-6’-[（S）-仲丁基]-21.24-=羟基-5’11,13,22,-四甲基-2-氧代-3，7，19-三氧杂四环[15，6，1，10,20，24]-十五-10，14，16，22，-四烯-6-螺-2’-（5’.6’-二氢-2’H-吡喃）-12-基2，6-二脱氧-4-0-（2.6-二脱氧）-3-0-甲基- d-L-阿拉伯-已吡喃糖基-3-0-甲-d-l-阿拉伯-已吡喃糖苷。

实验式：Ｃ48Ｈ72Ｏ14；
相对分子质量：873.1（按1997年国际相对原子质量计）；
生物活性：杀螨；
熔点：(150~155)℃；
蒸汽压（20℃）：199.98mpa；
溶解度（g／L,21℃）：:水0.1×10-4、丙酮100、正丁醇10、氯仿25、环已烷6、乙醇20，异丙醇70、煤油0.5、甲醇19.5、甲苯350；
稳定性：在通常贮存条件下稳定，在pH5~9和25℃时，其水溶液不发生水解。

二、阿维菌素B1a含量的测定
1、方法提要
试样用流动相溶解，使用以C18为填料的不锈钢柱和具有紫外可变波长检测器，对试样中的阿维菌素B1a进行高效液相色谱法分离和外标法定量。

2、试剂和溶液
甲醇：HPLC；
水：新蒸二次蒸馏水或杭州产娃哈哈纯净水；
a含量≥91%
阿维菌素标样：已知B
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3、仪器
高效液相色谱仪：具有可变紫外波长检测器；
色谱工作站；
色谱柱：C18ODS、５µｍ150mm×4.6mm；
定量管：20uL；
进样器：100uL；
4、液相色谱操作条件
流动相：甲醇+水=90+10（V/V ）；
溶剂：甲醇；
检测波长：250nm ；
流速：0.5mL/min 。

5、测定步骤
5.1标样溶液的配
称取阿维菌素标样0.02g(精确到期0.0002g)于25mL 容量瓶中，用甲醇定容，超声溶解，待用。

5.2样品溶液的配制
称取样品折百约0.02g （精确至0.0002g ）至25mL 容量瓶中，用甲醇定容，超声溶解，待用。

5.3 测定
在上述操作条件下，待仪器工作状态稳定后，先注入数针标样溶液，待相邻两针的相对响应值变化小于 1.5%，按标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进样分析。

6、计算
将测得的两针试样溶液及试样前后两针标样溶液中阿维菌素B 1a 的峰面积分
别进行平均，有效成份阿维菌素B 1a 质量百分含量X 1按式（1）计算：
式中：
A 1——试样溶液中阿维菌素
B 1a 峰面积的平均值；
A 2——标样溶液中阿维菌素
B 1a 峰面积的平均值；
M 1——试样的质量，g ；
M 2——阿维菌素标样的质量，g ；
P 2——阿维菌素标样B 1a 的纯度，%。

7、允许差
两次平行测定结果之差不大于0.1%。

X 1= A 1×M 2×P 2
×100% (1)
———————— A 2×M 1。