/掌握:核酸的结构和分类；D票畛类药物和嚅喘类药物鉴别.检查.含量测定的原理/熟悉:核酸的理化性质；反义寡核苜酸药物鉴别.检查.含量测定的原理/结构和分类 /理化性质什么是核酸?> 1869年核酸最早分离自外科绷带脓细胞的细胞核,当时发现这种物质含磷量之高超过当时发现的任何一种有机物,并且含有很强的酸性,故得名核酸。

> 1909年其组成被研究清楚,1944年生物功能初步澄清,在X射线衍射技术支持下1953年结构澄清。

>核酸是脱氧核糖核酸（DNA）与核糖核酸（RNA ）的通称。

一、结构和分类O□水解代表戊糖，对DNA而言为脱氧核糖,对RNA代表碱基代表磷酸基核昔酸'■Pentose核昔酸NH 0-（对DNA为H）OH 0H51 HOCH20 /HC4* HC- I OH核糖(in RNA)O—CH-CH I OH戊糖5*HOCH 22 '—脱氧核糖HC4*HC?O—CH「C ；H I H(in DNA)核昔NIi zHO OH廉暉哙擅普曲昔）NH20护、忡/Of! H 脱辄核甘（脱氧胞甘〕DNA & RNAStrand continues DNAH5HNHCTP»0|continue ：Strand con tinues.StrandcontinuesPS=O|Strand .continues\ Thymine AdenineOH?湖 Cytosine Guanine、N谢 Thymine Adenine1 OK"厂fk R.Cytosine Guanine3*、RNAUracil (U)尿喘旋u N—o HHCH%NIH NH嚓吟环NH2N3 4 5CH IC^1 更HI / 1胞喘旋CCytosine (C) INH2Ia、” 弭CH |F IH腺嚓吟A Adenine (A)/NHThymine (T) 胸腺碇TN 1 6 5CCdHN/H鸟嚓吟G腺嚓吟(A) 鸟嚓吟(G) 胞I 密唳(C) 胸腺嗜唳(T) 腺嚓吟(A) 鸟嚓吟(G) 胞喀唳(C) 尿嗜唳(U)磷酸类别 基本单位DNARNA核昔酸脱氧核糖核昔酸 腺瞟吟脱氧核昔酸鸟嚓吟脱氧核昔酸 胞喀睫脱氧核昔酸 胸腺嗪陀脱氧核昔酸核糖核昔酸 腺瞟吟核昔酸 鸟嚓吟核昔酸五碳糖脱氧核糖核糖碱基稀有碱基•卩票吟——次黄卩票吟、1 ■甲基次黄卩票吟、N\ N?-二甲基鸟瞟吟。

•卩密喘——5■甲基胞卩密喘、5■瓮甲基胞卩密喘、二氢尿卩密噪、4■铳尿卩密噪•都是基本碱基的化学修饰型。

二、理化性质>（一）两性性质:磷酸基；碱基（通常：酸性）pH影响碱基间氢键稳定:DNA pH4.0^11.0 ）水解性:微溶于水,不溶于_般的有机溶剂）UV :Amax=260nm 蛋白质280nrriA260/A280 ^fiDNA > 1.8纯RNA应达到2.0混有杂蛋白比值降低腺嚓岭消光系数220 240 260 280 300 320nm波长各种緘基在pH 7的紫外吸收光谱/!■•变性：在某些理化因素影响下,DNA 双螺旋区 的氢键断裂和碱基堆积力破坏,有规律的双螺旋结构变成单链无规律的"线团” ■但不发生共价 键的断裂,这过程称之。

/变性原因：高温（_般＞ 75°C）、强氧化剂、强 酸.碱.尿素等；螺旋二级结构的破坏，生物活性的丧失） "特征性Tm …DNA 的变性温度82~95°C（四）变性和复性/机理:双链间氢键断开,成为两条单链（DNA ：0.70-0.65-0.60-0.55-0^0-76 80 84 | 88 92 96lOOPTm图3-13 DNA解链曲线> 2■复性 一定条件下，去除变性因素后，核酸恢复二级结构及生物活性的现象:通常使用（退火） 缓慢冷却7急速冷®^应 … ・ •••••••<* 广ZWWVXA/ 磁热复性复性失败图3-応核醴分干杂交原理那意图甲（细线表示）和DMA乙（曲线躱示〕在鶴变社启的复性过程屮可収形成杂促冥链B.同宦素林记的冨垓廿醉（X—）牙雲性后満单絲DKA竿合双讎DNA 单ISD?JA余交A（五）颜色反应/苔黑酚反应： F 3+RNA中核糖+浓HCI （浓出葩）-糠醛+書余酚-深绿色化合物（Amax=670nm ）/二苯胺反应：DNA中脱氧核糖+浓H2SO4-5 ■羟基4拨基戊醛+二苯胺- 蓝色化合物（Amax=595nm ）/水解后磷磷酸+¥目酸-磷钳酸+还原剂（维生素c、氯化亚锡等）目蓝(Amax=660nm )• D票畛碱（腺0111$.鸟瞟畛）•戊糖•磷酸＞戊糖鉴别＞載鉴别＞磷酸鉴别＞特征吸收光谱＞熔点测定/苔黑酚反应（地衣酚反应）…凡核糖均有此反应试剂:浓盐酸,苔黑酚试剂,三氯化铁（催化剂）现象:鲜绿色/二苯胺反应DNA试剂:浓硫酸,二苯胺现象：蓝色/与商苯三酚反应（核苔酸中的戊糖）现象:玫瑰红色+氨制硝酸银-＞白色红棕色（遇光）有机磷T无机磷+铝酸-磷铝酸+还原剂-钥蓝•UV：卩票吟环，卩密噪环•IR般检查酸度■水分.无机盐,有机物,溶液的颜色和澄清度＞蛋白质检查磺基水杨酸溶液»有关物质纸色谱,薄层色谱,电泳,荧光检查>紫外-可见分光光度法现在国家已经批准的瞟唆类核苔酸药物一般都用此法测定含量>HPLCA肌昔>ATP1・结构：C10H12N4O5 268.23本品为9卜D■核糖次黄D票險。

按干燥品计算,含C10Hl2N4O5应为98・0~ 102.0%。

2 •性状：本品为白色结晶性粉末；无臭,味微苦。

本品在水中略溶,在氯仿或乙醇中不溶,在稀盐酸和氢氧化钠溶液中易溶。

3 •鉴另U＞取0.01%供试品溶液适量，加等体积的3.5-二径 基甲苯溶3 , 5■二径基甲O.lg ,加盐酸使100ml ）,混匀,在水浴中 加热约10分钟,即显绿色。

一■苔黑酚反应＞取本品1%水溶液,加氨制硝酸银试, 即产生白色胶状沉淀。

一・11 票畛碱基＞取含量测定项下的溶液■照分光光度法测定,在 248nin 俞诫长处肴最夭吸政,®222nm 的菠 长处看最小吸收。

> IR4 •检查❿溶液的澄清度与颜色（溶液的透光率）取本品0.5g ,加水50ml使溶解,照分光光度法在430nm的液长处测定透光率, 不得低于9&0%（供注射用）。

❿干燥失重取本品,在105。

（：干燥至恒重,减失重量不得过1.0❿炽灼残渣不得过0.1%（供注射用），或不得过0.2%（供口服用❿重金属取本品LOg ,依法检查含重金属不得过百万分之十。

❿次黄瞟瞼①精童称取本品0.5g ,置50ml量瓶中.加水溶解并稀释至刻度,摇匀,照纸色谱法试验,吸取上述溶,点于3x25cm色谱滤纸上,照上行法,以水为展开剂,展开约20cm 处,取出晾干,置紫外光灯（254nm）下检视,不得出现杂质斑点。

② HPLC5 •含量测定1)UV法：取本品”精密称定,加水制成每lml中约含lOpg的溶液f照分光光度法在248nm的波长处测定吸收度f按G0H12N4O5的吸收系数(Ei%lcm )为460 计算。

2)HPLC6•作用与用途辅酶类药。

有改善机体代谢作用。

用于各种类型肝脏疾患、心脏疾患.白细胞减少症.血小板减少症■中心视网膜. 视神经7•用法与用量口服f—次0・2~0・6g—日0・6~ 1.8g8•贮藏遮光.密闭保存。

9制剂⑴肌苜口服溶液（2）肌苜片⑶肌苜注射液（4）肌苜胶囊（5）肌苜颗粒剂拼音名:Sanlinsuanxiangan'erna 英文名:Adenosine Disodium Triphosphate C10H14N5Na2O13P3 551.151•结构:本品为腺D票畛核苔三磷酸酯二钠盐三水化合物。

按干燥品计算,含C10H14N5Na2O13P3^ff^T90.0%o2•甞状:本品为白色或类白色粉末或结晶块状酸臭蕊翩扁品在水中易溶•3 •鉴别(1)取本品20mg,加稀硝酸2ml溶解后,加钳酸鞍试液linl ,加热,放冷,即析出黄色沉淀。

■八磷酸盐(2 )取本品约10mg ,加盐酸溶液(1^2)5ml溶解后, 加间苯三酚lOmg ,混匀,置水浴中加热约1分钟, 即显玫瑰红色。

“戊糖(3)苔黑酚反应一戊糖(3)UV(4)IR(5 )本品的水溶液显钠盐的鉴别反应❿溶液的澄清度与颜色❿有关物质 ❿水分❿氯化物❿铁盐 ❿重金属 ❿热原4 •检查❿蛋白质 取本品20mg ,加水2ml 溶解后,滴加30%磺 基水杨酸溶液0.5ml, 不得发生浑浊。