第一章：生物药物概述一、填空题1. 我国药物的三大药源指的是化学药物、生物药物、中草药。

2. 现代生物药物已形成四大类型，包括重组DNA药物、基因药物、天然生物药物、合成或半合成生物药物。

3. 请写出下列药物英文的中文全称：•IFN（Interferon）干扰素、•IL (Interleukin) 白细胞介素、•CSF（Colony Stimulating Factor）集落刺激因子、•EPO（Erythropoietin）（促）红细胞生成素、•EGF（Epidermal Growth Factor）上皮、表皮细胞生长因子、•NGF（Nerve Growth Factor）神经生长因子、•Ins（Insulin）胰岛素、•SOD 超氧化物歧化酶、•tPA 组织型纤溶酶原激活剂。

抗凝血药、•FDA 美国食品药品监督管理局•GMP 《药品生产质量管理规范》二、选择题：1、以下能用重组DNA技术生产的药物为（人生长素、人胰岛素、干扰素、表皮生长因子）（ B ）A、维生素B、生长素C、肝素D、链霉素2、下面哪一种药物属于多糖类生物药物（ C ）A、洛伐他汀B、干扰素C、肝素D、细胞色素C3、能用于防治血栓的酶类药物有（ D ）A、SODB、胰岛素C、L-天冬酰胺酶D、尿激酶4、下列属于多肽激素类生物药物的是（ D ）A、ATPB、四氢叶酸（激素）C、透明质酸（糖胺聚糖）D、降钙素（三十二肽激素）5、蛋白质工程技术改造的速效胰岛素机理是（ D ）A. 将猪胰岛素B30位改造为丙氨酸，使之和人胰岛素序列一致B. 将A21位替换成甘氨酸，B链末端增加两个精氨酸，使之在pH4溶液中可溶（PH6.8，长效）C. 将B29位赖氨酸用长链脂肪酸修饰，改变其皮下扩散和吸收速度D. 将人胰岛素B28位与B29位氨基酸互换，使之不易形成六聚体三、名词解释1.生物药物：是以生物体、生物组织或其成份为原料（包括组织、细胞、细胞器、细胞成分、代谢、排泄物）综合应用生物学、物理化学与现代药学的原理与方法加工制成的药物。

【广义的生物药物包括以动物、植物、微生物和海洋生物为原料制取的各种天然生物活性物质及其人工合成或半合成的天然物质类似物，也包括应用生物工程技术（基因工程、细胞工程、酶工程与发酵工程）制造生产的新生物技术药物（new biotech drug）。

】2.生物制品：生物制品（biological products / biologics ）是以微生物、细胞、动物或人源组织和体液等为原料，应用传统技术或现代生物技术制成，用于人类疾病的预防、治疗和诊断。

3.新药: 新药是指未曾在中国境内上市销售的药品。

已生产的药品改变剂型、改变给药途径、增加新适应症或制成新的复方制剂，亦按新药管理。

4.基因药物: 以遗传物质DNA、RNA为物质基础制造的药物，如核酸疫苗、反义药物四、问答题1.生物药物有哪些特性？1. 药理学特性（1）治疗的针对性强（2）药理活性高（3）毒副作用小，营养价值高（4）生理副作用常有发生：如免疫反应、过敏反应等。

2. 理化特性（1）原料中有效物质含量低，杂质种类多且含量高（2）稳定性差（3）易腐败（4）生物药物制剂的特殊要求2.简述新药（新生物药物）的研发过程？新生物药物的研制按其特点可分为5个阶段，即：（1）实验室研究；（2）中试研究；（3）临床前试验；（4）临床试验；（5）生产。

第二章：生物药物制剂技术目前生物药物给药方式研究的热点是缓释型注射剂和非注射途径给药。

蛋白质和多肽类药物非注射途径包括鼻腔、口服、直肠、口腔、透皮、眼内和肺部给药。

第三章：基因工程制药1.CHO 中国仓鼠卵巢细胞2.基因工程中原核表达常用的宿主有大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、链霉菌等；常用的真核表达系统有酵母、哺乳动物细胞、丝状真菌等。

3.大肠杆菌表达系统的缺点是不能进行翻译后修饰，因而像EPO等基因的表达需使用真核表达系统。

4.分泌表达是指将目的基因嵌合在编码原核蛋白信号肽序列基因下游进行表达，从而使目的基因分泌到细胞周质或培养基中。

5.《中国药典》规定热原检查采用家兔法，细菌内毒素检查采用鲎试剂法。

6. 用大肠杆菌作宿主表达重组DNA 药物，缺点是（ C ）A.蛋白质表达量低B.生长慢C.产物无糖基修饰D.难以获得工程菌7. 下面表达系统为原核表达系统的是（A ）A. E.coliB.毕赤酵母C.昆虫细胞D.动物细胞8. 如果用大肠杆菌作为宿主细胞，蛋白表达部位为周质，下面哪种细胞破碎的方法最佳？（ C ）A.匀浆法B.超声波法C. 渗透压休克法D. 冻融法1. 基因工程：基因工程（genetic engineering）是指在基因水平上采用与工程设计十分类似的方法，按照人们的需要进行设计，然后按设计方案创建出具有某种新的性状的生物新品系，并使之稳定地遗传给后代。

基因工程的核心是构建重组体DNA的技术，所以基因工程有时也称为基因操作或重组DNA技术。

2. 蛋白质工程：蛋白质工程（Protein engineering）：根据对已知蛋白质结构和功能的了解，借助计算机辅助设计，利用基因定点突变等技术对现有蛋白质结构基因进行改造，或直接从头设计全新的蛋白质序列，从而获得改良的蛋白质或自然界没有的全新蛋白质的技术过程。

有人将其称为“第二代基因工程”。

3.基因工程制药的基本过程？基因工程药物制备的一般过程：第四章发酵工程技术概论世界上一个抗生素产品是青霉素，第二个抗生素是链霉素。

•发酵工业的生产水平取决于三个要素：生产菌种、发酵工艺和发酵设备。

•冷冻干燥过程中常用的冷冻保护剂有脱脂乳和蔗糖。

•微生物发酵主要的三种方式分批发酵、补料分批发酵、连续发酵。

•微生物菌种的分离和纯化可以用的方法有平板划线法和稀释平板法。

•目前常用的诱变剂可分为物理诱变剂、化学诱变剂和生物诱变剂三大类。

•常用的菌种保藏方法有：①斜面低温保存、②液体石蜡封藏法、③冷冻干燥法、④液氮超低温保藏法、⑤甘油冷冻法、⑥其他干燥保藏法：沙土保藏法等。

•以下可用于菌种纯化的方法有（B ）A高温灭菌 B 平板划线 C 富集培养 D 诱变处理菌种保藏的目的及方法？（一）保存目的：防止退化（二）菌种退化检查方法（三）菌种退化防止方法①防止基因突变：如低温保藏②少转接传代③分离单菌落，制作平行的菌种斜面④选择培养条件（四）菌种保藏方法理想的菌种保藏方法应具备的条件：经长期保藏后菌种存活、不退化；保证高产突变株不改变表型和基因型，特别是不改变初级代谢产物和次级代谢产物生产的高产能力。

先挑选优良纯种，然后创造一个有利于休眠的条件，如低温、干燥、缺氧、避光等，以降低菌种代谢活动的速度。

菌种保藏方法：①斜面低温保存②液体石蜡封藏法③冷冻干燥法④液氮超低温保藏法⑤甘油冷冻法⑥其他干燥保藏法：沙土保藏法第五章酶工程制药1.固定化酶常采用的方法可分为吸附法、共价结合法、交联法和包埋法四大类。

2. 为什么要对酶进行化学修饰？人为地改变天然酶的一些性质，创造天然酶所不具备的某些优良特性甚至创造出新的活性，来扩大酶的应用领域，促进生物技术的发展。

通过酶的分子改造可克服上述应用中的缺点，使酶发挥更大的催化功效，以扩大其在科研和生产中的应用。

•通常，酶经过改造后会生各种各样的变化，概括起来主要有：•①提高生物活性（包括某些在修饰后对效应物反应性能的改变）；•②增强在不良环境（非生理条件）中的稳定性；•③针对异体反应，降低生物识别能力。

•可以说，酶的化学修饰在理论上为生物大分子结构与功能关系的研究提供了有力的实验依据和证明，是改善酶学性质和提高其应用价值的一种非常有效的措施。

3.抗体酶催化抗体（catalytic body）：是利用酶反应中底物过渡态类似物作为半抗原刺激免疫系统所产生的一类能够专一识别和催化酶反应中的底物反应过渡态的一类单克隆抗体。

催化抗体是抗体的高度选择性和酶的高效催化能力巧妙结合的产物，本质上是一类具有催化活力的免疫球蛋白，在其可变区赋予了酶的属性，因此催化抗体也叫抗体酶（abzyme）。

1. 细胞培养根据培养细胞的种类可分为原代培养和传代培养两种方式。

2. 生产用的动物细胞类型有原代细胞、已建立的二倍体细胞系、可无限期传代的转化细胞系、融合细胞系、基因工程细胞系。

3. 实验室中常加的双抗是青霉素和链霉素，以防细胞污染。

4. 用于动物细胞培养主要有三种培养基：天然培养基、合成培养基和无血清培养基。

6. 在动物细胞培养过程下列几种试剂的作用：RPMI 1640 维持细胞的生存，Hanks液维持细胞渗透压、调控培养液酸、碱度平衡，NaHCO3 调节培养基PH，青霉素防止微生物污染，胰蛋白酶水解细胞间的蛋白质。

7.属于人源细胞系的是（B）。

A .CHO-K1 B. WI-38 C .BHK-21 D .Vero（CHO-K1（Chinese hamster ovary cell）：从中国仓鼠卵巢中分离的上皮样细胞。

WI-38：正常胚肺组织人二倍体细胞系BHK-21（Baby hamster kidney cell）：从5只生长1d的幼仓鼠肾脏中分离的Vero：从正常成年非洲绿猴肾脏分离的。

MRC-5：从正常男性肺组织人二倍体细胞系Namalwa：从肯尼亚患有Burkitt淋巴瘤病人获取，建成的人的类淋巴母细胞。

)8.在动物细胞培养过程中，要用胰蛋白酶对取出的动物组织进行处理。

9.细胞株通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株（Cell Strain）。

也就是说，细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。

10.二倍体细胞系的定义及特点二倍体细胞系：原代细胞经过传代、筛选、克隆、纯化后，获得具一定特征的细胞系特点：细胞分裂增值旺盛，具有二倍体核型，具有贴壁依赖和接触抑制的特性，可传代培养50代，无致癌性。

11.利用动物细胞生产生物技术药物的优、缺点？优点：细胞产品多半分泌于胞外，收集纯化方便；能得到较为完善的翻译后修饰，特别是糖基化，与天然产品更为一致，更适于临床使用。

缺点：培养条件要求高，成本贵，产量低。

12.思考：在动物细胞培养过程中，为什么要用胰蛋白酶对取出的动物组织进行处理？•胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解，获得单个细胞。

•用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。

动物细胞培养适宜的pH 为7.2-7.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶（7.2-8.4）的活性较高。

1. 植物细胞培养常用的灭菌剂有次氯酸钙、次氯酸钠和氯化汞。

2.植物细胞培养的培养基的主要成分包括无机盐、碳源、有机氮源、植物生长激素、维生素等化学成分。