大肠杆菌受体优点：1、易转化；2、可使用多种易操作的载体，宿主范围较大
缺点：1、缺少辅助功能的生化途径，这些有利于表型功能的研究，如芳香族的降解、抗生素的合成、致病性、孢子形成等
在新宿主中克隆有3个先决条件：
1、具有将目的基因导入受体的方法：转化、接合、电穿
孔；
2、目的基因在受体菌中能稳定存在：以复制子的形式或
整合到基因组中、前质粒中；
3、目的基因在表达时能被检测到
目的基因的导入
其他菌的转化特点：1、自然发生，转化能力是一个短暂现象
2、在一些菌中，转化是独立序列进行的
3、自然转化机制涉及到DNA双螺旋的断裂，并降解其中一条单链，使得另外一条能够进入宿主
方法：感受态细胞的转化、原生质体的转化、电穿孔、质粒援救转化
目的基因的稳定
重组DNA分子通常以CCC的形式存在于质粒中，而后者主要取决于质粒的宿主范围（编码复制过程的蛋白质的数量），如S.aureus 的
质粒和RSF1010均可在G+或G-中复制
为了扩大宿主范围，通用方法为形成杂交质粒。

如大肠的pBR322和S.aureus或B.subtilis 的pC194、pUB110的混合穿梭质粒。

它的特点，人工构建、两种不同复制起点和选择标记，能在两种类群宿主中存在并复制。

它的优点是大肠能够成为克隆的中间宿主
重组DNA的综合
重组质粒进入宿主细胞后，通常会有以下结果：
1）以稳定的质粒形式存在
2）丢失
3）通常整合到基因组中
4）同源重组：代替经常是双链交换
例子：构建了一个集合质粒：neomycin抗性基因和B.subtilis
的amyE基因插入到pBR322中，将这个质粒转入B.subtilis，
该质粒不能复制，但如果筛选为抗性而做，那么质粒的集合
就在amyE处进行。

这一方法可用于构建单拷贝的外源基因
的重组子。

G-中的clone经常以大肠作为中间体，因此所需质粒必须能。