V1读数偏小 V2正确读数 V3读数偏大
5、观察颜色的变化和读数。注意滴定管 要垂直，视线与刻度平行，保留小数点 后三位。
6、滴定完毕，清洗干净，凉干后在活塞 处放一小纸片存放。
四、试剂和材料
1、苹果 、Vc 注射液
2、1％、2％草酸溶液
3、2，6-二氯酚靛酚溶液
100ml/组
称取0.21 g碳酸氢钠，0.26g 2,6-二氯酚靛 酚，溶于250ml蒸馏水中，稀释到1000ml. 过滤，装入棕色瓶内，置冰箱内备用，
*100
W
VA为滴定样品提取液所用的 2，6-二氯酚靛酚溶 液的mL数 VB为滴定空白对照所用的 2，6-二氯酚靛酚溶液 的mL数 S为1mL染料能氧化抗坏血酸mg数 W为待测样品的重量。
七、思考题
1、2，6-二氯酚靛酚溶液、标准抗坏血 酸为何要在棕色瓶冰箱内保存？
2、为何整个滴定过程不要超过2分钟？ 3、为何要用1％草酸做空白对照，其滴 定终点如何判定？
八、分析讨论
维生素C是具有L系糖型的不饱和多羟基物， 属于水溶性维生素。它分布很广，植物的绿色部 分及许多水果（如橘子、苹果、草莓、山楂等）、 蔬菜（黄瓜、洋白菜、西红柿等）中的含量更为 丰富。
维生素C的结构
抗坏血酸分子中存在烯醇式结构 ——C=C——
OH OH 因而具有很强的还原性，氧化失去两 个氢原子而转变成脱氢抗坏血酸。
2，6—二氯酚靛酚钠盐（C12H6O2NCl2Na)染料
2，6—二氯酚靛酚钠盐（C12H6O2NCl2Na)染 料具有氧化性，可氧化抗坏血酸而其本身被还原 为无色的衍生物，可作为维生素C含量测定的滴 定剂和指示剂。
在酸性环境中氧化型2，6-二氯酚靛酚呈红色， 在中性或碱性溶液中呈蓝色。
用2，6—二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸 性溶液时，在抗血酸尚未完全被氧化时，滴下的 2，6-二氯酚靛酚立即被还原为无色，当抗坏血 酸全被氧化时，则滴下的2，6-二氯酚靛酚溶液 呈红色。所以在滴定过程中当溶液从无色转变为 微红色时，表示抗坏血酸全部被氧化，此时即为 滴定的终点。根据滴定消耗染料标准溶液的体积， 可以计算出被测定样品中抗坏血酸（维生素C） 的含量。
三、器材
1、研钵
2、移液管
3、容量瓶
4、锥形瓶
5、微量滴定管（5ml） 6、漏斗
7、纱布
8、滤纸
9、分析天平
附微量滴定管使用：
微量滴定管的操作
1、检查：用蒸馏水检查滴定管的活塞是否漏 水，活塞转动是否灵活。 2、装滴定剂：摇匀试剂溶液，用试剂润洗滴 定管2-3次，约装10-15ml左右。 3、排气泡：调节起始刻度（最好在整mL的刻 度处，或调零，并记录初始刻度数。 4、滴定：勿顶活塞，防漏液，轻轻转动活塞， 滴定时边用手腕轻轻摇动锥形瓶，近终点时要 “半滴”操作——冲洗。
3、滴定
量取10ml样品1提取液于锥形瓶中。用微量滴 定管，以2，6-二氯酚靛酚溶液滴定样品提取 液，呈微弱的玫瑰色，持续5秒钟不退色为终 点，记录所用2，6-二氯酚靛酚的ml数。注意 整个滴定过程不要超过2分钟。 另取10ml 1％草酸做空白对照滴定。 样品及空白同时各做二份。
注意事项
(1) 某些水果、蔬菜（如橘子、西红柿等）浆 状物泡沫太多，可加数滴丁醇或辛醇。
还原剂：样品中可能有其它杂质还原二氯酚靛 酚，但反应速度均较抗坏血酸慢，因而滴定开 始时，染料要迅速加入，而后尽可能一点一点 地加入，并要不断地摇动三角瓶直至呈粉红色， 于15s内不消退为终点。
(5) 提取的浆状物如不易过滤，亦可离心，留 取上清液进行滴定。
六、结果计算
（VA-VB）*S
维生素C mg数/100g样品= ——————
(2) 整个操作过程要迅速滴定所 用的染料不应小于1ml或多于4ml，如果样品含 维生素C太高或太低时，可酌情增减样液用量 或改变提取液稀释度。
(3) 本实验必须在酸性条件下进行。在此条件 下，干扰物反应进行得很慢。
(4) 干扰滴定因素有： 色素：若提取液中色素很多时，滴定不易看出 颜色变化，可用白陶土脱色，。
保存不超过3天。每次临用前用新配制的 标准抗坏血酸溶液标定。已配好全班公 用。
4、标准抗坏血酸溶液
准确称取纯抗坏血酸结晶100mg溶于1％ 草酸溶液定容到100ml。装入棕色瓶中贮 存冰箱内。（已配好，全班公用）
五、操作
1、维生素C提取液制备
待测样品1：水洗干净整株新鲜蔬菜或整个新 鲜水果，用纱布或吸水纸吸干表面水分。然后 称取20g，加入20ml 2％草酸，用研钵研磨， 四层纱布过滤，反复抽提2-3次，（纱布可用 少量2％草酸洗几次）合并滤液，定容至50ml （滤液混浊可离心）备用。
2、标定
准确量取1ml标准抗坏血酸溶液加入 9ml 1％草酸溶液于100ml锥形瓶。然后用2， 6-二氯酚靛酚溶液滴定，以生成为微红色 持续15秒不退色为终点。计算2，6-二氯酚 靛酚溶液的浓度，以每ml2，6-二氯酚靛酚 溶液相当于抗坏血酸的mg 数来表示。 （取10ml 1％草酸液做空白对照，按以上 方法滴定）
一、实验目的
1、学习维生素C 2，6-二氯酚靛酚定量测 定法的原理和方法。 2、进一步熟悉、掌握微量滴定法的基本操 作技术。
3、了解蔬菜、水果中维生素C含量情况。
二、原理
维生素C是人类营养中最重要的维生素之一， 缺少它时会产生坏血病，因此又称为抗坏血酸 （ascorbic acid）。它对物质代谢的调节具有重要 的作用。