实验五 探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用
实验原理：
1．淀粉麦芽糖(或葡萄糖) (非还原糖) (还原糖)
蔗糖 ――→酶
葡萄糖＋果糖
(非还原糖) (还原糖) (还原糖) 2. ⎭⎪⎬⎪⎫淀粉――→淀粉酶蔗糖――→淀粉酶――→斐林试剂水浴⎩⎪⎨⎪⎧ 有砖红色沉淀→有还原糖 →酶起作用无砖红色沉淀→无还原糖 →酶不起作用
实验过程
1．蔗糖
(1)实验用的蔗糖必须保持纯净，实验前先用斐林试剂检验一下，如无砖红色沉淀产生，则可供学生实验用。

(2)蔗糖溶液应现用现配，以免时间过长后被微生物分解成还原糖，影响实验效果。

2．质量分数为2%的新鲜的淀粉酶溶液
考虑酶所需要的特定条件，在使用时，要保证其适宜的温度和pH ，不要因实验之外的因素影响酶活性的发挥。

3．斐林试剂
(1)组成
①质量浓度为0.1 g/mL 的NaOH 溶液。

②质量浓度为0.05 g/mL 的CuSO 4溶液。

(2)使用方法：①现用现配。

②混合均匀后使用。

(3)作用：检验还原糖的存在。

一、对实验步骤的理解
1．实验步骤的顺序性
用淀粉酶分别催化淀粉和蔗糖反应后，再用斐林试剂鉴定，根据是否有砖红色沉淀来判断淀粉酶是否对二者都有催化作用，从而探究酶的专一性。

二、注意事项
1．水浴煮沸用的开水，需提前备好，以缩短实验时间。

2．制备的可溶性淀粉溶液，必须完全冷却后才能使用。

如果用刚煮沸的可溶性淀粉溶液进行实验，就会因温度过高而破坏淀粉酶的活性。

3．两支试管保温时应控制在37 ℃左右，低于50 ℃或高于75 ℃，都会降低反应速
率。