实验三十四葡萄糖酸钙片溶出度的测定
一、实验目标
1．明确药物体外溶出、释放试验的意义，完成溶出度的测定；
2．学会溶出、释放试验的数据处理方法，熟悉溶出仪的使用。

二、实验药品与器材
药品葡萄糖酸钙片、15%氢氧化钠、蒸馏水、0.01mol/L EDTA-2Na 、紫脲酸铵指示剂等；器材分析天平、溶出仪、微型电子计算机、架盘天平、乳钵、移液管、滴定管、烧杯、滤纸、玻璃棒、容量瓶、量杯、量筒、铁架台等。

三、实验内容
1．葡萄糖酸钙片的含量测定取本品10片，精密称定，研细，精密称定适量(约2片重)，加水50ml 微热溶解，放冷至室温，移至100ml 量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，精密量取滤液25ml ，加水75ml 稀释，精密量取20ml ，加15%氢氧化钠3ml ，取指示剂少许，用0.01mol/L EDTA-2Na 滴定至溶液自红色转变为紫色（1ml0.01mol/L EDTA-2Na 相当于葡萄糖酸钙4.484mg ）。

计算本品百分含量。

2．样品的测定取本品6片，分别精密称定片重，按《中国药典》转篮法操作。

量取蒸馏水800ml ，加热至37℃±0.5℃，篮转速为50r.pm 。

投入一精密称定的药片，并记时，按5min 、10min 、15min 、20min 、30min 、45min 、60min 定时取样，每次取溶液25ml ，同时补入等量的37℃释放介质，过滤，精密量取滤液20ml ，照上述1法测定，（自加“15%氢氧化钠……”起）。

3．数据处理记录测定数据，填入下表1。

表1.葡萄糖酸钙片溶出度的测定片重mg 每片百分含量最大溶出药量M ∞mg
M ∞=每片片重×百分含量
F(t)=(M t /M ∞)×100%
分别绘制F(t))－t 曲线图、ln(1-F (t ))－t 曲线图、ln(ln(1/(1-F (t ))))－ln(t-t0)曲线图。

四、实验指导
溶出度、释放度的测定方法有：转篮法、浆叶法、小杯法等，测定时按药典规定操作，要注意测定的温度、释放介质、转速、取样位置等因素。

溶出、释放试验数据的手工处理较时间t (min)
5101520304560EDTA-2Na 体积V (ml)
溶出药量X (mg)
累积溶出药量M t (mg)
累积溶出百分率F(t)
本品45min 标示溶出百分率
（药典规定本品45min 限量为标示量的75%）
一级速率模型
ln(1－F (t ))
ln(1－F (t ))—t 回归
溶出速率常数K
斜率b 1截距a 1r Weibull 分布模型
时滞t0
ln(t －t0)
ln(ln(1/(1－F (t ))))
ln(ln(1/(1－F (t ))))—ln(t-t0)回归
模型参数斜率b 2截距a 2r
αβT 0.50T d
为繁琐，如使用有关软件，则十分方便，如PKBP-N1。

这里介绍MS Excel计算单指数模型、Weibull分布模型的溶出、释放速率参数方法。

(参见《中国医院药学杂志》1999，4)
1.数据计算启动Excel，输入表1中数据，建立工作表。

计算X(mg)、M t(mg)、F(t)等值。

依单指数模型和Weibull模型处理，累积溶出百分率采用小数(Excel可格式为百分数)，计算1-F(t)、ln(1－F(t))和ln(ln(1/(1－F(t))))—ln(t－t0))等项的值，自然对数函数为LN()，时滞t0的单元格值预置为零，公式中注意t0值单元格的绝对引用。

如F(t)超过100%，则将1-F(t)取绝对值，绝对值函数为ABS()。

如F(t)为1则不参与计算。

2.绘制曲线图使用“图表向导”工具或“插入”菜单中的“图表”命令，分别绘制F(t)－t曲线图、ln(1－F(t))－t曲线图(线性1)和lnln(1/(1－F(t)))－ln(t－t0)曲线图(线性2)，图表类型选择“X—Y散点图”。

3.参数的计算分别用斜率函数SLOPE(known_y's,known_x's)(下同)、截距函数INTERCEPT()和相关系数函数CORREL()计算两个线性的斜率、截距和相关系数r。

亦可用回归参数函数LINEST()计算。

(1)单指数模型线性1直线方程y1=a1+b1x1斜率b1的绝对值，即为单指数模型的溶出速率常数K。

(2)Weibull模型从线性2直线方程y2=a2+b2x2的斜率b2、截距a2，计算形状参数α、尺度参数β，
α=b2β=EXP(-a2/b2)
式中EXP()为自然指数函数。

位置参数时滞t0的计算，方法一：试取t0值即在时滞值单元格中试着改变数值，根据Excel动态显示的回归参数如相关系数，确定最佳线性(使r最接近于1)，得t0值；方法二：打开“视图”菜单“工具栏”中的“窗体”工具，创建t0微调调节按钮，步长可为0.01，链接到时滞值单元格，调节该按钮同上法判断，得t0值。

相应的计算和图表Excel予以自动更新，无需重复操作。

参数T0.50、T d：根据WEIBULL函数，编制公式，计算T0.50、T d等参数。

T0.50=EXP((LN(LN(2))－a2)/b2)+t0
T d=EXP((LN(LN(1/0.368))－a2)/b2)+t0
利用Excel提供的WEIBULL()函数可方便地计算F(t)的理论值，公式为“=WEIBULL(t-t0,α,β,TRUE)”。

五、思考题
1．测定固体制剂的溶出度有何意义？举例说明。

2．简述固体制剂溶出、释放试验的方法及模型处理。

3.某药物的溶出释放试验结果如下表(F(t)为累积溶出百分率)，试分别用零级释药模型、一级释药模型、Higuchi方程和WEIBULL模型进行拟合处理，计算有关参数(速度常数，T0.50、T d等)。

时间(h)123467*********
F(t)0.300.460.580.730.830.880.920.960.99 1.00 1.00。